Реакция Манчини: цель, механизм и ингредиенты реакции

Реакция радиальной иммунодиффузии (реакция Манчини). Иммунную антиглобулиновую сыворотку (анти-IgG) смешивают с расплавленным агаровым гелем и равномерно наливают на стекло. После застывания в геле делают лунки, в которые помещают антиген (Аг) в различных разведениях. В качестве антигена используют сыворотки человека с известной концентрацией IgG и исследуемые сыворотки с неизвестной концентрацией IgG. Антиген, диффундируя в гель, образует с антителами антиглобулиновой сыворотки кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена (рис. 29). Реакцию используют для определения в сыворотке крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента и др. Постановка реакции (см. практическую часть).

Рис. 29. Реакция радиальной иммунодиффузии по Манчини

5. Механизм, ингредиенты, постановка реакции определения титра комплемента

Комплемент — это совокупность нескольких нормальных компонентов свежей сыворотки с различными физико-химическими свойствами. Он содержится в большинстве сывороток теплокровных и холоднокровных животных. Основным свойством комплемента является его способность вызывать лизис сенсибилизированных соответствующими иммунными сыворотками клеток, а также адсорбироваться системами антиген + антитело. Комплемент широко применяется для серологической диагностики ряда инфекционных заболеваний в реакции связывания комплемента (сифилис, гонорея, бруцеллез, туляремия, риккетсиозы, грипп, клещевой энцефалит и др.).

Учитывая чрезвычайную лабильность некоторых компонентов комплемента, для постановки РСК выбирают оптимальную дозу комплемента. Для этого производят его титрование в присутствии гемолитической системы. Титр комплемента ¾ минимальная его концентрация, обеспечивающая полный лизис 3 %-ной взвеси бараньих эритроцитов в присутствии гемолитической сыворотки. Рабочая доза комплемента увеличивается по сравнению с титром на 25–30 %. Избыток или недостаток комплемента могут значительно исказить результаты РСК. Реакция расчета титра комплемента (см. практическую работу).

6. Понятие об иммунопрофилактике и иммунотерапии. Показания к вакцинации и противопоказания

Иммунопрофилактика и иммунотерапия являются разделами иммунологии, которые изучают и разрабатывают способы и методы специфической профилактики, лечения и диа­гностики инфекционных и неинфекционных болезней с помощью иммунобиологических препаратов, оказывающих влияние на функ­цию иммунной системы, или действие которых основано на иммунологических принципах.

Иммунопрофилактика направлена на со­здание активного или пассивного иммуни­тета к возбудителю инфекционной болезни (антигену) с целью предупреждения возможного заболевания путем формирования невосприимчивости к ним организма.

Иммунотерапия направлена на лечение уже развившейся болезни, в ос­нове которой лежит нарушение функции им­мунной системы.

Разработкой и изучением иммунобиологических препаратов занимается раздел иммунологии ¾ иммунобиотехнология.

Показаниями к вакцинации являются нали­чие или угроза распространения инфекционных заболеваний, а также возникновение эпидемий среди населения. В России принят Федеральный закон «О вакцинопрофилактике инфекционных заболеваний человека», который предусматривает вакцинацию населения согласно национальному календарю вакцинации и по эпидемиологической ситуации, определяет права и обязанности граждан в области вакцинопрофилактики, а также правовое регулирование деятельности го­сударственных органов, учреждений, долж­ностных лиц и установливает их ответствен­ность в области вакцинопрофилактики.

Принципы вакцинации:

1. Риск от вакцинации должен быть меньше, чем вред наносимый заболеванием.

2. Заболеваемость среди привитых должна быть примерно в пять раз меньше, чем среди непривитых.

3. Проведение вакцинации должно иметь эпидемиологическое обоснование.

Часть вакцин применяется для плановой обязательной профилактики инфекционных заболеваний и проводится в сроки, установленные Министерством здравоохранения: противотуберкулезная вакцина BCG, АКДС, против гепатита В, полиомиелитная вакцина, паротитная, коревая (календарь прививок смотри в приложении № 1).

Другие вакцины являются обязательными для ограниченного контингента людей, проживающих в определенной местности (например, вакцина против клещевого энцефалита) или при опасности профессионального контакта с возбудителем (например, сибиреязвенная, бруцеллезная, туляремийная, чумная вакцины).

Наконец, некоторые вакцины применяют по эпидемиологическим показаниям. Они предназначены для предупреждения распространения эпидемий (например, вакцины против гриппа).

Значительно реже вакцины применяют с целью иммуннотерапии, в основном, в тех случаях, когда инфекционный процесс носит затяжной хронический характер. С этой целью применяют убитые вакцины.

Вместе с тем, при применении вакцин следует помнить, что это грозное средство воздействия на иммунную систему организма. Поэтому применение вакцинных препаратов должно проводится при её нормальном функционировании, при относительно «спокойном» состоянии иммунной системы. В связи с этим, применение вакцин, особенно, у детей имеет ряд ограничений.

Противопоказания к применению вакцинации:

1. Острые заболевания инфекционной и неинфекционной природы.

2. Аллергические состояния и заболевания.

3. Аутоиммунные и коллагеновые болезни.

4. Гематологические заболевания.

5. Некоторые первичные и вторичные иммунодефициты.

6. Некоторые соматические заболевания: эндокринной, нервной, сердечно-сосудистой систем, преимущественно с хроническим течением.

7. Наличие злокачественных новообразований.

Примеры вакцин, применяемых с лечебной целью

• стафилококковая аутовакцина ¾ готовится из убитых стафилококков, являющихся возбудителями заболевания у данного больного и используется для его лечения;

• бруцеллезная вакцина ¾ представляет собой взвесь убитых нагреванием бруцелл овечьего и коровьего видов;

• гонококовая вакцина ¾ взвесь убитых нагреванием гонококков, используется для провокации при хронической гонорее;

• спиртовая дизентерийная вакцина содержит дизентерийные микробы Флекснера и Зонне, применяется для лечения затяжных и хронических форм дизентерии;

В отличие от иммунопрофилактики, когда антиген-содержащий препарат вводят для создания активного иммунитета с целью предупреждения инфекционного заболевания, иммуннотерапия служит вспомогательным методом лечения и применяется с целью повышения реактивности организма. Это бывает целесообразно, например, при хронических формах инфекционных заболеваний (хронический бруцеллёз, хроническая туляремия) и у пациентов с синдромом иммунодефицита.

Требования, предъявляемые к вакцинным препаратам:

• высокая иммуногенность (способность создавать напряженный, прочный и длительный иммуннитет;

• безвредность (отсутствие побочных реакций на введение вакцины;

• ареактогенность (минимальное сенсибилизирующее действие);

• стандартность (вакцинные препараты должны соответствовать международным стандартам, разработанным Международными лабораториями по биологической стандартизации в системе ВОЗ);

• специфическая стерильность, т.е. отсутствие микробного загрязнения посторонними агентами (бактериями, спорами, грибами, вирусами).

Осложнения при применении вакцин:

Далеко не все вакцинные препараты отвечают выше изложенным требованиям, поэтому у определенной части вакцинированных людей возникают побочные реакции и осложнения.

К общим реакциям относятся такие объективные и субъективные показатели как повышение температуры, головная боль, боли в суставах, тошнота, рвота и т.д.

Под местной реакцией подразумевают реакции, которые возникают в месте введения вакцины:

· при парентеральном введении ¾ отек, гиперемия, формирование инфильтрата и регионарного лимфаденита;

· при аэрозольной, интраназальной иммунизации ¾ катаральные явления со стороны верхних дыхательных путей и конъюнктивит;

· при энтеральной иммунизации ¾ тошнота, рвота, боли в животе.

При иммунизации убитыми вакцинами, химическими и анатоксинами общие и местные побочные реакции бывают однотипными, тогда как при введении живых бактериальных и вирусных вакцин они в значительной степени специфичны, что обусловлено свойствами вакцинного штамма.

Интервал между проведенной прививкой и появлением побочных реакций зависит от характера препарата и от иммунологического статуса прививаемого.

Подводя итог вышесказанному, еще раз следует подчеркнуть, что вакцины ¾ это препараты для создания искусственного АКТИВНОГО иммунитета, причем, вакцины, приготовленные из живых и убитых микробов, а также химические вакцины создают АНТИМИКРОБНЫЙ иммунитет, а анатоксины ¾ АНТИТОКСИЧЕСКИЙ иммунитет. Все перечисленные препараты обеспечивают формирование иммунной реакции организма, а применяемый метод получил название активной иммунизации.