Аутоиммунные болезни и аутоиммунитет. Характеристика аутоантигенов и аутоантител. Классификация аутоиммунных заболеваний.

АУТОИММУНИТЕТ) - способность иммунной системы распознавать и атаковать клетки собственного организма. В норме иммунная система не реагирует на клетки и ткани своего организма. аутоиммунитет лежит не только в основе аутоиммунных заболеваний, но может быть связан и с выполнением нормальных физиологических функций, напр. с удалением старых и разрушенных клеток.

Заболевания, которые связаны с нарушением работы иммунной системы человека, называются аутоиммунными, или системными. При них поражению может подвергаться не только конкретная система, но и весь организм в целом. До сих пор специалистами так и не выявлено, почему иммунитет человека начинает негативно реагировать на свои же ткани. Огромное количество таких заболеваний носят хронический характер. Могут появляться периоды ремиссий и обострений. Очень важно адекватно и тщательно приступить к лечению, иначе это может привести к нарушению функций внутренних органов и инвалидности. Первым шагом в данном случае является своевременная сдача анализов. Их Вы можете пройти в нашем медицинском центре.

Все аутоиммунные заболевания разделяют на следующие группы, в зависимости от механизма их возникновения: Заболевания, развивающиеся вследствие высвобождения антигенов и нарушения сосудисто-тканевых барьеров.

Во вторую группу относят болезни, которые вызываются собственными тканевыми компонентами. Они кардинально изменяют свои свойства, после чего идентифицируются организмом, как чужие. Сюда относят различные заболевания, возникающие как эффект от сродства внешних антигенов с собственными компонентами ткани. Иммунная система, в данном случае реагируя на антигены, может направиться против своих же тканей.

В последнюю, четвёртую группу включены заболевания, которые основаны на нарушениях функции лимфоидной ткани. В этом случае появляются клетки, разрушающие здоровые ткани организма. Причина большинства аутоиммунных заболеваний неизвестна. Некоторые ученые полагают, что вирусные инфекции могут воздействовать на Т-лимфоциты таким образом, что они начинают атаковать собственные ткани. Другие думают, что это результат нехватки питательных веществ или просто старения и вредных привычек. По неизвестной пока причине аутоиммунные болезни, оказывается, чаще поражают женщин, чем мужчин. Аутоиммунные болезни - это болезни, в основе которых лежит аутоиммунизация, т.е. агрессия аутоантител, циркулирующих иммунных комплексов, содержащих аутоантигены, и эффекторных иммунных клеток (лимфоцитов-киллеров) в отношении антигенов собственных тканей организма. Поэтому аутоиммунные болезни называют также аутоагрессивными. Руководствуясь механизмом аутоиммунизации, различают две группы аутоиммунных заболеваниЙ. Первая группа - это органоспецифические аутоиммунные болезни, которые развиваются в связи с повреждением физиологических барьеров иммунологически обособленных органов, что позволяет иммунной системе реагировать на их неизмененные антигены выработкой аутоантител и сенсибилизированных лимфоцитов. При этом в органах развиваются морфологические изменения, характерные преимущественно для Г3Т: ткань органов инфильтрируется лимфоцитами, паренхиматозные элементы погибают, в финале развивается склероз. В эту группу входят тиреоидит (болезнь Хасимото), энцефаломиелит, полиневрит, рассеянный склероз, идиопатичеекая аддисонова болезнь, асперматогения, симпатическая офтальмия. Вторая группа - это органонеспецифические аутоиммунные заболевания. Ведущими при этих заболеваниях являются нарушения контроля иммунологического гомеостаза лимфоидной системой. Аутоиммунизация при этом развивается по отношению к антигенам многих органов и тканей, не обладающих органной специфичностью и неспособных вызывать продукцию антител при парентеральном введении. В органах и тканях развиваются морфологические изменения, характерные для реакций гиперчувствительности как замедленного, так и особенно немедленного типов. К этой группе аутоиммунных заболеваний относят системную красную волчанку, ревматоидный артрит, системную склеродермию, дерматомиозит.

 

Аутоантиге́ны — молекулы веществ в составе клеток, органов и тканей высших животных, которые распознаются при определённых условиях как чужеродные.

К ним относят белки, синтез которых начинается после созревания иммунной системы (к примеру входящих в состав спермы, материнского молока), макромолекулы органов, отделённых от иммунной системы гистогематическим барьером. К ним относят гемато-энцефалический, гемато-ликворный, гемато-тестикулярный, гемато-клубо́чковый, гемато-ретина́льный,гемато-офтальмический, гемато-ти́мусный.

 

При нарушении проницаемости данных барьеров, либо других нарушениях при которых иммунная система воспринимает нормальные белки как чужеродные. В результате начинается развитие аутоиммунной реакции. Они могут приводить к развитию самых разнообразных аутоиммунных заболеваний. К ним в частности относят рассеянный склероз, аутоиммунный тиреоидит и др.

Аутоантитела (аутоагрессивные антитела, аутологичные антитела) — антитела, способные взаимодействовать аутоантигенами, то есть с антигенами собственного организма. Могут образовываться спонтанно или вследствие перенесенных инфекций (например, вызванных Mycoplasma pneumoniae).

Аутоантитела образуются при аутоиммунных заболеваниях, к которым относятся ревматоидный артрит, рассеянный склероз, системная красная волчанка и т. д. (более 40 заболеваний). В некоторых случаях аутоантитела начинают вырабатываться задолго до клинических проявлений заболевания.

56. Специфическая терапия и методы лабораторной диагностики аутоиммунных заболеваний. При диагностике аутоиммунных заболеваний используются следующие группы тестов:

· Тесты, позволяющие обнаружить эффекторные механизмы и факторы, специфичные для АИЗ. Они обладают простотой в постановке (рутинностью) и высокой степенью ассоциации с поражениями тканей. К числу рутинных относятся определение концентрации С-реактивного белка, ревматоидного и антинуклеарного факторов и С3-компонента комплемента. Эти маркеры аутоиммунного процесса позволяют с достаточной точностью поставить диагноз и оценить активность патологического процесса.

· Тесты, предназначенные для определения структурно-функциональных характеристик иммунокомпетентных клеток. Они имеют вспомогательное для постановки диагноза значение, но важны для контроля эффективности терапии, а также для уточнения патогенеза заболевания.

Помимо специальных иммунологических тестов обязательно исследование общего анализа крови, мочи, белков острой фазы и других биохимических показателей с учетом клиники (тяжесть, острота, осложнения), проводимых в динамике заболевания и терапии.

Определение LE-клеток

На определении LE-клеток (LupusErythematosuscells - клетки красной волчанки) основан первый лабораторный метод диагностики системной красной волчанки, разработанный в 1948 г., и широко используемый в нашей стране до сих пор.

LE-феномен имеет три морфологических признака: тельце, розетка, LE-клетка. LE-феномен является следствием как реакции антител, так и фагоцитоза опсонированного материала клеточных ядер.

Тельце образуется следующим образом. Известно, что LE сывороточный фактор представляет собой антиядерное аутоАт. В результате его соединения с составными частями ядер клетки последние погибают, ядра оголяются. Эти измененные, освобожденные от протоплазмы ядра лейкоцитов и представляют собой LE тельце. Под действием хемотаксиса около LE-тельца скапливаются активные сегментоядерные лейкоциты, образуя форму розетки. Морфология LE-феномена. LE-клетки представляют собой зрелые нейтрофилы или моноциты с крупными гомогенными базофильными включениями в виде гомогенных аморфных глыбок, состоящих из деполимеризированных ДНК. Вследствие включения крупного свободного ядра других распавшихся клеток ядро фагоцита смещено к краю за счет включения. Таким образом, LE-клетка является конечной морфологической фазой LE-феномена.

Invivo LE-клетки присутствуют в периферической крови, перикардиальном и плевральном выпотах, а также в области поражения кожи. Тестом на выявление LE-клетокопределяют антитела к нуклеопротеидам в 75 (70-95)% случаев. Однако, выявление LE-клеток - трудоемкий и недостаточно чувствительный метод лабораторной диагностики системной красной волчанки, поэтому сейчас для диагностики этого и других аутоиммунных заболеваний используются более простые, легко воспроизводимые методы, основанные на определении антинуклеарных антител (иммунофлуоресцентным или иммуноферментным методами).

Условия проведения реакции

1. Гепаринизированная кровь больного ротируется со стеклянными бусами в шприце (отношение крови и бус = 1:1) и инкубируется в термостате при 37⁰С в течение 10 минут. Затем кровь переносят в центрифужную пробирку.

2. Исследуемая проба крови центрифугируется при 3000 об/мин в течение 3-х минут.

3. Из полученной нейтрофильной пленки приготавливается мазок, фиксируется и окрашивается по Романовскому-Гимзе.

4. Приготовленный мазок микроскопируется под иммерсией.

Определение ревматоидного фактора (РФ). Диагностическое значение ревматоидного фактора состоит в том, что в высоких титрах они выявляются преимущественно у больных ревматоидным артритом (РА). Нали­чие РФ подтверждает клинический диагноз. Это легло в основу современного подразделения РА на серопозитивный (при нали­чии РФ) и серонегативный (при его отсутствии). РФ определя­ется у 70—80 % больных РА. Имеет прогностическое значение, поскольку свидетельствует о неблагоприятном течении болезни, быстром развитии эрозивно-деструктивного процесса, угрозе воз­никновения системных проявлений при РА.

Ревматоидный фактор - это аутоантитела к Fc-фрагменту IgG. В сыворотке ревматоидный фактор обычно присутствует в виде комплекса с IgG.Определение ревматоидного фактора играет важную роль в диагностике ревматоидного артрита, при котором наблюдаются значительные нарушения иммунной системы. Они обусловлены неполноценным иммунным ответом с образованием ем иммунных комплексов. В формировании последних основную роль играет РФ.Активность РФ может быть реализована через следующие патогенетические механизмы:

1. Превращение растворимых иммунных комплексов в нерастворимые, которые не могут быть фагоцитированы.

2. Стимуляция клеточно-опосредованных реакций.

3. Превращение иммунных комплексов, не связывающих комплемент, в комплементсвязывающие

В низком титре (до 1:80) ревматоидный фактор выявляется у 5% здоровых лиц моложе 60 лет и у 30% — старше 80 лет. Более чем у 75% больных ревматоидным артритом титр ревматоидного фактора в реакции латекс-агглютинации превышает 1:80. В высоком титре ревматоидный фактор выявляется у больных с тяжелым прогрессирующим ревматоидным артритом. При этом обычно наблюдаются внесуставные проявления заболевания, например ревматоидные узелки, системный васкулит, синдром Шегрена. При синдроме Шегрена ревматоидный фактор определяется в наиболее высоком титре. Ревматоидный фактор в сыворотке обычно появляется через 3—6 мес после начала ревматоидного артрита. У серопозитивных больных (больные, в сыворотке которых выявляется ревматоидный фактор) во время ремиссии титр ревматоидного фактора значительно снижается, хотя обычно не нормализуется. Ревматоидный фактор не специфичен для ревматоидного артрита и выявляется при других аутоиммунных заболеваниях, сопровождающихся поражением суставов, инфекционном эндокардите, некоторых хронических заболеваниях печени и идиопатическом фиброзирующемальвеолите.Любые частицы, покрытые IgG, могут быть агглютинированы ревматоидным фактором. Первоначально для обнаружения ревматоидного фактора использовались покрытые антителами эритроциты барана или человеческие эритроциты группы 0 (Реакция Валера-Роза). В последующем их заменили на частицы латекса и бентонита, что повысило чувствительность метода.

Реакция Ваалера-Роза. Используются эритроциты барана, нагруженные антителами кроличьей сыворотки. В присутствии РФ происходит склеивание (агглютинация эритроцитов) в результате взаимодействия его с гаммаглобулином, находящимся на поверхности эритроцитов барана. Реакция считается положительной при титре Ат, превышающем 1:16.

Условия проведения реакции:

Хорошо обезжиренное предметное стекло делят на две равные части. На одну половину стекла помещают каплю разведенной (1:20) исследуемой сыворотки, на другую - такую же каплю 0,9% раствора хлорида натрия (отрицательный контроль). К ним добавляют по капле разведенногодиагностикума. Тщательно перемешивают стеклянной палочкой и оставляют стекла на столе. Учет результатов через 3-5 минут с помощью лупы или микроскопа.

Регистрация результатов.

В контрольной пробе и при отриц. реакции - равномерное помутнение.

При положительной реакции в пробе с испытуемой сывороткой эритроциты склеиваются, В капле появляется зернистость. Агглютинация оценивается по следующей условной шкале:

+++ - эритроциты склеиваются в плотные, довольно крупные зерна;

++ - отчетливо выражена мелкая зернистость;

+ - на фоне мутной взвеси эритроцитов слабо выраженная зернистость

Латекс-тест. Исследование латекс-теста позволяет сделать полуколичественное определение РФ в неразбавленной сыворотке методом агглютинации латексных частиц. Метод удобен в использовании, экономически выгоден, время анализа - 2-3 мин. В наборе имеются положительный и отрицательный контроли.

Принцип метода. Основан на реакции агглютинации между РФ образца пациента или контрольной сывороткой и человеческим IgG, находящимся на полистироловых латексных частицах.IgG, осажденный на латексных частицах + АТ к IgG, находящиеся в исследуемой сыворотке или положительном контроле ® агглютинация латекс-частиц, видная невооруженным глазом

Условия проведения реакции :

1. перед постановкой реакции сыворотку пациента и набор выдержать в течение 30 мин. при комнатной температуре.

2. Пипетировать на слайд-стекло в отдельные лунки:

- сыворотку пациентов - 20 мкл;

- положительный контроль - 20 мкл;

- отрицательный контроль - 20 мкл;

3. добавить в каждую лунку по 20 мкл латексного реагента;

4. осторожно перемешать содержимое лунок стеклянной палочкой; результаты учесть через 2-3 мин.

Регистрация результатов :

· анализ образцов пациентов пров-ть после получения рез-товотриц-го и полож-ого контролей;

· отсутствие агглютинации в сыворотке указ-ет на отсутствие РФ; отриц-ным будет результат, содержащий в образце РФ менее 20 МЕ/мл;

· полож-ный: результат (четкая агглютинация) указывает на кол-нное содержание РФ в сыворотке пациента. При полож-ной р-ции (четкая агглютинация) тест поторить, удваивая разведение сыворотки (1:2; 1:4; 1:8; т.д.). Наибольшее разведение, при к-омпроис-ит агглютинация, считается титром реакции. В сыворотке диагн-ким титром в р-ции латекс – агглютинации считается 1:20.

· Произвести пересчет содержания РФ в МЕ/мл. Прибл-ные значения РФ в международных единицах на мл соответствуют наивысшему разведению с положительным результатом, умноженным на 10.