Сфера применения и стоимость

Цена на моноклональные антитела по мере роста их производства будет уменьшаться. Все описанное выше довольно сложно. Однако наука не стоит на месте, а высокими темпами движется вперед. Поэтому сегодня моноклональные антитела являются эффективным средством для борьбы с раком и находят широкое применение в других направлениях медицины.

Ввиду важности исследований, проведенных для создания моноклональных препаратов, в работу были вовлечены ведущие фармацевтические компании всего мира. Сегодня МАТ – основное направление разработок по борьбе с раком.

1. Типы вакцин и их конструирование. Культуральные и генноинженерные вакцины. Субъединичные вакцины. Современные вакцины. Современные способы и направления разработок. Пептидные вакцины на примере противоящурной вакцины. Аутовакцины. Липосомальные вакцины. Технологии совершенствования липосамальных вакцин.

Удельный вес вакцинации животных в системе противоэпизоотологических мероприятий определяется многими факторами, в том числе и наличием эффективных и безвредных биопрепаратов. Ветеринарная статистика показывает, что имеется тенденция нарастания масштабов применения специфических средств защиты животных при многих инфекционных болезнях. Поэтому развитие современной биопромышленности иммунных препаратов вызвано практической необходимостью получения большого количества (по объему и перечню) иммунопрепаратов для профилактики, диагностики и лечения животных.

Со времен Дженера и Пастера, когда были намечены принципиальные способы получения вакцин и их применения, иммунопрофилактика прошла большой путь и выросла в специальный раздел иммунологии и биотехнологии, без которого невозможно решение современных задач промышленного изготовления и применения биопрепаратов. В настоящее время в арсенале иммунопрофилактики находится целый ряд вакцин, различающихся по виду и характеру технологии производства, способу применения и эффективности, а именно: живые, инактивированные, корпускулярные, химические и анатоксины; по числу антигенов – моно- и ассоциированные вакцины.

Большинство из названных вакцин по-прежнему получают апробированными классическими способами, и лишь часть из них конструируют по новым, нетрадиционным принципам – это вакцины искусственных антигенов, субклеточные (рибосомальные), субъединичные и генно-инженерные вакцины.

При приготовлении вакцин производство их делится на несколько технологических этапов, включая накопление биомассы организмов или продуктов их жизнедеятельности, концентрацию и очистку антигенов, в отдельных случаях их инактивацию, добавление сорбирующих и адъювантных субстанций, лиофилизацию, расфасовку и т.д. Что же касается обеспечения выпуска безопасных, стандартных и эффективных в антигеном и иммуногенном отношении вакцин, то во всех случаях применяется универсальная принципиальная схема получения, апробации и внедрения в производственную практику новых вакцин.

Она включает следующие этапы:

1. Получение автором вакцинного (аттенуированного) или производственного (вирулентного) штамма;

2. Авторское изготовление вакцины в лабораторных условиях и экспериментальное изучение стерильности, токсичности, безвредности, реактогенности и иммуногенности in vitro и на животных;

3. Экспериментально-производственное изготовление опытной серии препарата и оценка безвредности антигенных и иммуногенных свойств в лабораторных условиях и в ограниченном эпизоотологическом опыте в условиях производства;

4. Государственное комиссионное испытание нового биопрепарата с целью определения безвредности, реактогенности, иммуногенности и эпизоотологической эффективности в широком производственном опыте. Утверждение нормативных документов (технических условий) по изготовлению и контролю вакцин и наставления по ее применению.

Генно-инженерные вакцины. В 70-х гг. нашего века успехи генетической клеточной инженерии дали возможность разработать новую технологию получения противовирусных вакцин, получивших название генно-инженерных вакцин. Необходимость таких разработок диктовалась следующими причинами:

1) недостатком природных источников сырья/подходящих животных;

2) невозможностью размножать вирус в классических объектах/культуры ткани и пр. Принцип создания генно-инженерных вакцин включает:

а) выделение природных генов антигенов или их активных фрагментов;

б) встройку этих генов в простые биологические объекты – бактерии, дрожжи;

в) получение необходимого продукта в процессе культивирования биологического объекта – продуцента антигена.

Геномы вирусов по сравнению с геномом клетки (прокариотической или эукариотической) ничтожно малы по размерам. Гены, кодирующие протективные белки, можно клонировать у ДНК –содержащих вирусов непосредственно, у РНК-содержащих вирусов – после обратной транскрипции их генома(для вирусов с непрерывным геномом) или даже отдельных генов (у вирусов с фрагментированным геномом). На первом этапе развития новой биотехнологии ученые занимались преимущественно клонированием вирусных генов, кодирующих синтез белков, несущих главные антигенные детерминанты. Вскоре были получены рекомбинантные бактериальные плазмиды, несущие гены или геномы вирусов гепатита В, гриппа, полимиолита. Следующим этапом явилось получение антигена. Вопрос оказался сложным, ибо экспрессии вирусных генов в прокариотной системе была ничтожной. Это можно объяснить тем, что вирусы в ходе эволюции приспособились к паразитированию в организме человека.

Однако со временем были получены экспрессии антигенов. И одним из наиболее типичных примеров, показывающих необходимость создания генно-инженерных вакцины, является гепатит В. Проблема заключается в том, что до сих пор не найдены чувствительные к вирусу культуры клеток или животных. Поэтому разработка генно-инженерного метода получения вакцин стала необходимостью. Метод заключается в том, что геном клонируют в клетках Е. coli с использованием плазмидных и фаговых векторов. Бактерии, несущие рекомбинантные плазмиды, продуцируют белки, специфически реагирующие с антителами против самого вируса. В 1982 г. в США была получена первая экспериментальная вакцина против гепатита В. Для продукции вирусспецифических белков (антигенов) используют и эукариотические клетки (дрожжи, животных). Интенсивно ведутся работы по созданию и других генно-инженерных вакцин, в частности против гриппа, герпеса, ящура, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций. Новейшим подходом в создании вирусных вакцин является включение генов, отвечающих за синтез вирусных протеинов, в геном другого вируса. Таким образом создаются рекомбинантные вирусы, обеспечивающие комбинированный иммунитет.

Субъединичные вирусные вакцины. Живые и инактивированные вакцины во многих случаях обеспечивают надежную защиту организма животных. Однако они не лишены недостатков – у привитых могут возникать поствакцинальные осложнения, аллергические реакции и т.п. Поэтому была начата работа по усовершенствованию вирусных вакцин. Субъединичные вакцины – это дальнейший путь улучшения расщепленных вирусных вакцин. Для того,чтобы получить их, нужно иметь в очищенной форме антигены, необходимые для иммунизации. Поэтому производство субъединичных вакцин включено против тех возбудителей инфекций, у которых известна антигенная структура, определены протективные антигены и их можно отделить и сконцентрировать как субъединицы биопрепарата. В процессе формирования иммунитета к вирусам критически полными антигенами являются наружные белки. Именно этот факт испоьзовался как основа для создания субъединичных вакцин. Наиболее перспективной моделью для создания субъединичных вакцин являются так называемые оболочечные вирусы, имеющие липопротеидную мембрану. Субъединичные вакцины можнл отнести к 3-ему поколению инактивированных вирусных вакцин. Традиционными являются культуральные вакцины – 1е поколение. Современные вакцины характеризуются высокой степенью очистки и концентрации – 3е поколение. Типичным примером использования различных типов вакцин является вакцинация против гриппа человека. В наши дни используется несколько типов тнактивированных очищенных вакцин – субвирионных из полностью разрушенных вирионов (сплит-вирусные вакцины) и субвирионных субъединичных вакцин – с наивысшей степенью очистки от балластных веществ. Таким образом, субъединичные вакцины против гриппа и парагриппа животных должны содержать в качестве субъединиц гемагглютинин и нейрамидазу. Определены и выделены в чистом виде субъединицы возбудителей ящура, адено- и герпесвирусных инфекций, против которых также получены субъединичные вакцины. Но надо помнить, что вирусные субъединичные вакцины только тогда активны, если они индуцируют вируснейтрализующие антитела.

Технологический процесс изготовления субъединичных вакцин состоит из следующих этапов:

1) получение вируса зараженных культур клеток или эмбрионов;

2) очистка вируса с помощью пластинчатого сепаратора или на колонке с сефадоксом;

3) микрофильтрация;

4) понцентрирование (примерно в 50 раз) на фильтрах;

5) дополнительная очистка ультрацентрифугированием в градиенте плотности сахарозы;

6) расщепление концентратов детергентами;

7) извлечение гликопротеинов вирусов путем ультрацентрифугирования или ультрафильтрации;

8) диализ;

9) стерилизующая фильтрация концентрата субъединиц;

10) стандартизация концентрата субъединиц;

11) контроль биопрепарата В настоящее время также разрабатываются и бактериально субъединичные вакцины, в которых в качестве протективных субъединиц используются очищенные Н- и О- антигены из клеточной стенки капсулы, ЦПМ, жгутиков, пили и т.д. Получены также вакцины против пневмококкоза, пастереллеза, колибактериоза и ряда других болезней. Все последователи отмечают биотехнологические сложности получения субъединичных вакцин и одновременно отмечают перспективность научного направления и большие возможности биопрепаратов этого типа.

Биосинтетические вакцины - это вакцины, полученные способами генной инженерии и представляют собой искусственно созданные антигенные детерминанты микроорганизмов. Примером может служить рекомбинантная вакцина против вирусного гепатита B, вакцина против ротавирусной инфекции. Для их получения употребляют дрожжевые клеточки в культуре, в которые встраивают вырезанный ген, кодирующий выработку нужного для получения вакцины протеин, который потом выделяется в чистом виде.

На современном этапе развития иммунологии как базовой медико-биологической науки стала очевидной необходимость сотворения принципиально новейших подходов к конструированию вакцин на базе знаний об антигенной структуре патогена и об иммунном ответе организма на патоген и его составляющие.

Биосинтетические вакцины представляют собой синтезированные из аминокислот пептидные фрагменты, которые соответствуют аминокислотной последовательности тем структурам вирусного (бактериального) белка, которые распознаются иммунной системой и вызывают иммунный ответ. Принципиальным преимуществом синтетических вакцин по сравнению с традиционными является то, что они не содержат микробов и вирусов, товаров их жизнедеятельности и вызывают иммунный ответ узенькой специфичности. Не считая того, исключаются трудности выкармливания вирусов, хранения и способности репликации в организме вакцинируемого в случае использования живых вакцин. При разработке данного типа вакцин можно присоединять к носителю несколько различных пептидов, выбирать более иммуногенные из них для коплексирования с носителем. Совместно с тем, синтетические вакцины менее эффективны, по сравнению с традиционными, т.К. Многие участки вирусов проявляют вариабельность в плане иммуногенности и дают меньшую иммуногенность, ежели нативный вирус. Но, внедрение одного либо двух иммуногенных белков заместо целого возбудителя обеспечивает формирование иммунитета при значимом понижении реактогенности вакцины и её побочного деяния.

Рибосомальные вакцины. Для получения такового вида вакцин употребляют рибосомы, имеющиеся в каждой клеточке. Рибосомы - это органеллы, продуцирующие белок по матрице - и-РНК. Выделенные рибосомы с матрицей в чистом виде и представляют вакцину. Примером может служить бронхиальная и дизентерийная вакцины (к примеру, ИРС-19, Бронхо-мунал, Рибомунил).

Разработка и изготовление современных вакцин делается в согласовании с высокими требованиями к их качеству, в первую очередь, безвредности для привитых. Традиционно такие требования основываются на наставлениях глобальной Организации Здравоохранения, которая завлекает для их составления самых знатных профессионалов из различных государств мира. "Идеальной" вакцин мог бы считаться продукт, владеющий таковыми свойствами, как:

1. полной безвредностью для привитых, а в случае живых вакцин - и для лиц, к которым вакцинный микроорганизм попадает в итоге контактов с привитыми;

2. способностью вызывать стойкий иммунитет после малого количества введений (не более трех);

3. возможностью введения в организм методом, исключающим парентеральные манипуляции, к примеру, нанесением на слизистые оболочки;

4. достаточной стабильностью, чтоб не допустить ухудшения параметров вакцины при транспортировке и хранении в условиях прививочного пункта;

5. умеренной ценой, которая не препятствовала бы массовому применению вакцины.

Новое поколение вакцин. Внедрение новейших технологий позволило сделать вакцины второй генерации.

К ним относятся:

а) конъюгированные - некие бактерии, вызывающие такие опасные заболевания, как менингиты либо пневмонию (гемофилюс инфлюэнце, пневмококки), имеют антигены, тяжело распознаваемые незрелой иммунной системой новорожденных и грудных детей. В конъюгированных вакцинах употребляется принцип связывания таковых антигенов с протеинами либо анатоксинами другого типа микроорганизмов, отлично распознаваемых иммунной системой дитя. Протективный иммунитет вырабатывается против конъюгированных антигенов.

б) субъединичные вакцины. Субъединичные вакцины состоят из фрагментов антигена, способных обеспечить адекватный иммунный ответ. Эти вакцины могут быть представлены как частицами микробов, так и получены в лабораторных условиях с внедрением генно-инженерной технологии.

Примерами субъедиинчных вакцин, в которых употребляются фрагменты микроорганизмов, являются вакцины против Streptococcus pneumoniae и вакцина против менингококка типа А.

Рекомбинантные субъединичные вакцины (к примеру, против гепатита B) получают методом введения части генетического материала вируса гепатита B в клеточки пекарских дрожжей. В итоге экспрессии вирусного гена происходит наработка антигенного материала, который потом очищается и связывается с адъювантом. В итоге выходит эффективная и безопасная вакцина.

в) рекомбинантные векторные вакцины. Вектор, либо носитель, - это ослабленные вирусы либо бактерии, вовнутрь которых может быть вставлен генетический материал от другого микроорганизма, являющегося причинно-значимым для развития заболевания, к которому нужно создание протективного иммунитета. Вирус коровьей оспы употребляется для сотворения рекомбинантных векторных вакцин, в частности, против ВИЧ-инфекции. Подобные исследования проводятся с ослабленными бактериями, в частности, сальмонеллами, как носителями частиц вируса гепатита B. В настоящее время широкого внедрения векторные вакцины не нашли.

Несмотря на неизменное улучшение вакцин, существует целый ряд событий, изменение которых в реальный момент нереально. К ним относятся следующие: добавление к вакцине стабилизаторов, наличие остатков питательных сред, добавление лекарств. Понятно, что вакцины могут быть различными и тогда, когда они выпускаются различными фирмами. Не считая того, активные и инертные ингредиенты в различных вакцинах могут быть не постоянно идентичными (для одинаковых вакцин).

Вакцины будущего. В 1990 г. в некоторых исследовательских лабораториях приступили к разработке новых вакцин, которые основаны на введении «голой» молекулы ДНК. Уже в 1992–1993 гг. несколько независимых групп исследователей в результате эксперимента доказали, что введение чужеродной ДНК в организм животного способствует формированию иммунитета.

Принцип применения ДНК-вакцин заключается в том, что в организм пациента вводят молекулу ДНК, содержащую гены, кодирующие иммуногенные белки патогенного микроорганизма. ДНК-вакцины называют еще генными, генетическими, полинуклеотидными вакцинами, вакцинами из нуклеиновых кислот. На совещании специалистов по генным вакцинам, проведенном в 1994 г. под эгидой ВОЗ, было решено отдать предпочтение термину «вакцины из нуклеиновых кислот» с их подразделением соответственно на ДНК- и РНК-вакцины. Для получения ДНК-вакцин ген, кодирующий продукцию иммуногенного протеина какого-либо микроорганизма, встраивают в бактериальную плазмиду. Плазмида представляет собой небольшую стабильную молекулу кольцевой двухцепочечной ДНК, которая способна к репликации (воспроизведению) в бактериальной клетке. Кроме гена, кодирующего вакцинирующий протеин, в плазмиду встраивают генетические элементы, которые необходимы для экспрессии («включения») этого гена в клетках эукариотов, в том числе человека, для обеспечения синтеза белка. Такую плазмиду вводят в культуру бактериальных клеток, чтобы получить большое количество копий. Затем плазмидную ДНК выделяют из бактерий, очищают от других молекул ДНК и примесей. Очищенная молекула ДНК и служит вакциной. Введение ДНК-вакцины обеспечивает синтез чужеродных протеинов клетками вакцинируемого организма, что приводит к последующей выработке иммунитета против соответствующего возбудителя. При этом плазмиды, содержащие соответствующий ген, не встраиваются в ДНК хромосом человека.

ДНК-вакцины можно вводить в солевом растворе обычным парентеральным способом (внутримышечно, внутрикожно). При этом бoльшая часть ДНК поступает в межклеточное пространство и только после этого включается в клетки. Применяют и другой метод введения, используя так называемый генный пистолет. Для этого ДНК фиксируют на микроскопических золотых гранулах (около 1–2 мкм), затем с помощью устройства, приводимого в действие сжатым гелием, гранулы «выстреливают» непосредственно внутрь клеток. Следует отметить, что аналогичный принцип введения лекарства с помощью струи сжатого гелия используют и для разработки новых способов доставки лекарственных средств (с этой целью оптимизируют размеры частиц лекарственного вещества и их плотность для достижения необходимой глубины проникновения в соответствующую ткань организма). Этот метод требует очень небольшого количества ДНК для иммунизации. Если при иммунизации классическими субъединичными вакцинами вводят микрограммы протеина, то при использовании ДНК-вакцины — нанограммы и даже меньше. Говоря о минимальном количестве ДНК, достаточном для индукции иммунного ответа, С.А. Джонстон, директор Центра биомедицинских изобретений Техасского университета, отмечает, что с помощью генного пистолета можно однократно ввести мыши «фактически 27 тыс. различных плазмид и получить иммунный ответ на индивидуальную плазмиду».

Ученые из Института биоорганической химии (ИБХ РАН) разработали универсальный способ получения микрокапсул — своего рода миниконтейнеров ради снадобий или вакцин. В многослойную биодеградируемую полимерную оболочку можно внедрять белки, ДНК, иные молекулы. На основе таких микрокапсул разрабатывают вакцины новоиспеченного поколения — ДНК-вакцины.

Похожих микроконтейнеров ради доставки, например, ДНК, придумано не так много. Есть зарубежные аналоги, в которых оболочка капсулы выполнена из полимолочной кислоты. На их основе создают вакцины против гепатита и даже СПИДа.

В пористую микросферу из карбоната кальция (CaCO3) внедряют белок, ДНК, иные вещества, которые нужно доставить в организм. Покрывают ее полупроницаемой оболочкой из немногих слоев естественных полимеров — полисахаридов. Можно покрыть каркас полипептидами или приобрести комбинированную оболочку. Если микросферы в полимерной оболочке поместить в подкисленный раствор, карбонат кальция внутри растворится и уйдет через полимерную мембрану. Внутри останется только белок или ДНК, подлежащие транспортировке. Микрокапсулы с бодрой «начинкой» готовы

Средний диаметр микрокапсул ради доставки ДНК-вакцин — 1—2 микрона (мкм). Его можно уменьшить, если взять карбонатные микросферы меньшего размера. Такие микрокапсулы можно ввести подкожно или даже в кровь. Короткий размер обеспечивает им свободное действие по сосудам: они меньше эритроцитов (диаметр которых 7,2—7,5 мкм), пластичны, меняют форму, протискиваясь через утонченные капилляры. Клетки «заглатывают» капсулы, их оболочка растворяется клеточными ферментами, выпуская бодрую «начинку».

Метод разрешает не просто доставить лекарственные вещества в клетки организма, но продлевать и регулировать время их движения. Если в микрочастицу вместе, например, с ДНК или снадобьем поместить фермент, расщепляющий оболочку капсулы изнутри, высвобождением снадобья можно править: чем меньше фермента, тем медлительнее рушится оболочка.

Российские ученые успешно применили микрокапсулы ради получения ДНК-вакцин, испытали их на клеточных линиях и лабораторных мышах. Традиционная вакцина содержит белки вирусов или бактерий, ДНК-вакцина — гены таких белков. Белки-антигены традиционной вакцины скоро разрушаются, поскольку чужеродны. То же проистекает с некапсулированной ДНК — ее в организме скоро расщепляют соответствующие ферменты. Микрокапсулированная ДНК, попав в клетки, разрешает организму самому производить достаточное число антигена, формирующего иммунитет. Это проистекает в движение длительного времени: в организме капсулы постепенно, как минимум месяц, растворяются и помогают нужную концентрацию антигена, что важно ради воспитания стабильного иммунитета.

Привлекательность ДНК-вакцин заключается в относительной простоте их создания, дешевизне производства и удобстве хранения, что позволило некоторым авторам заговорить о ДНК-вакцинах, как о вакцинах третьего поколения и о произошедшей революции в вакцинации. Однако, их широкое применение сдерживается некоторыми опасениями, вызванными, в первую очередь, теоретической возможностью внедрения такой чужеродной ДНК в геном вакцинированного организма. Тем не менее, до сих пор не получено сколько-нибудь убедительных доказательств встраивания ДНК таких вакцин в геном млекопитающих, в то время как имеется множество подтверждений о длительном существовании введенных в организм ДНК-вакцин в форме исходной плазмиды. Впрочем, подобные опасения, пожалуй, можно считать излишними, если вспомнить, что при использовании классических вакцин (применяющихся уже две сотни лет) в организм человека тоже попадает, в частности, ДНК патогена, которая теоретически также способна встраиваться в геном. Более того, как считают некоторые исследователи – если бы ДНК-вакцины были разработаны раньше классических, то ситуация могла бы быть в корне обратной, и предложения применять «живые» или «убитые» вакцины, как вакцины нового типа, также вызывали бы аналогичные и наверное справедливые опасения.

К преимуществам ДНК-вакцин, кроме уже упоминавшейся простоты их получения, производства и хранения, можно отнести и то, что при введении в организм они как бы имитируют нахождение в нем настоящего патогена, поскольку образование белковых продуктов, выступающих антигенами, происходит в этом случае непосредственно в клетках человека или животного и, следовательно, все посттрансляционные модификации белков происходят в полном соответствии тому, как это совершается при настоящей инфекции. Видимо, этим можно объяснить и высокий уровень иммунного ответа на ДНК-вакцины, и их специфичность.

Синтетические пептидные вакцины — искусственно синтезированные из аминокислот пептидные фрагменты, соответствующие антигенным детерминантам микроорганизмов. Они индуцируют иммунный ответ узкой специфичности.

Получение синтетических пептидных вакцин:

 

· выявление главной детерминанты (эпитопа протективного антигена), ответственной за иммуногенность и расшифровка ее структуры;

· проведение химического синтеза пептидных последовательностей эпитопа;

· химическая сшивка эпитопа с полимерным носителем.

Экспериментальные синтетические вакцины получены против дифтерии, холеры, стрептококковой инфекции, пневмококковой инфекции, сальмонеллезной инфекции, ВГВ, гриппа, клещевого энцефалита.

Преимущества синтетических вакцин:

 

· не содержат микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности, имеют высокую степень стандартности;

· исключаются трудности культивирования микроорганизмов
и хранения вакцин;

· безопасны, так как отсутствует возможность реверсии в вирулентную форму и остаточная вирулентность ввиду неполной инактивации;

· использование 1–2 иммуногенных белков вместо целого микроорганизма обеспечивает формирование специфического иммунитета и устраняет образование антител к другим антигенам, что обеспечивает самую низкую реактогенность;

· иммунный ответ направлен к определенным детерминантам, это позволяет избежать индукции T-супрессоров и образования аутоантител, что может произойти при иммунизации целым антигеном;

· использование полимерных носителей позволяет проводить фенотипическую коррекцию иммунного ответа и индуцировать Т-независимый иммунный ответ у особей, которые по генетическим причинам слабо отвечают на антиген;

· к носителю можно присоединить несколько разных пептидов,
которые способны индуцировать формирование иммунитета к разным инфекциям.
Проблемы синтетических вакцин:

· отсутствие полной информации о гомологии синтетических
пептидов нативным антигенам;

· синтетические пептиды имеют малую молекулярную массу и поэтому низкоиммуногенны (менее иммуногенны, чем нативные антигены); для повышения иммуногенности необходимы носители (адъюванты или полимерные).

Липосомальные вакцины.

Липосомы представляют собой пузырьки с двухслойной мембраной, состоящей из фосфолипидов. Их используют для транспортирования антигенов к антигенпрезентирующим клеткам. Размеры липосом варьируют от 0,01 до 150 мкм. Антигены могут включаться в липосомы в растворимой водной фазе или прикрепляться к мембране. Это обеспечивает снижение их токсичности и более продолжительную циркуляцию. Установлено также, что липосомы потенцируют иммунный ответ к включенному в них антигену, являясь, таким образом, иммунными адъювантами. Липосомы оказались весьма перспективной формой, так как стимулируют образование как гуморального, так и клеточного иммунитета.

В настоящее время липосомальные вакцины используются в ветеринарной практике. В Швейцарии впервые разработана вакцина против гепатита А, и проходят испытания липосомальные вакцины против гриппа, гепатита А и В, дифтерии, столбняка и др. В США осуществляется клиническое испытание липосомальной гриппозной вакцины из гемагглютинина и менингококковой В вакцины.

Аутовакцина - (autovaccine) - вакцина, приготовленная из бактерий, выделенных от больного человека, с последующим их культивированием и дальнейшим использованием в качестве лекарства по классическому принципу медицины: лечи подобное подобным. Концепция лечения хронических бактериальных инфекций и заболеваний с позиции «убийства» всех бактерий путем назначения антибиотиков, априори ошибочна и ведет в полный терапевтический тупик. Аутовакцины позволяют побеждать хронические инфекции за счет внутренних резервов самого организма человека методом повышения общегоспецифического иммунитета и восстановления местного иммунитета на слизистых оболочках, «приютивших» эти бактерии. Т.е. не убивать бактерию, а восстановить такой уровень местной защиты, чтобы произошло самопроизвольное очищение слизистых оболочек от этих бактерий.

Корпускулярная аутовакцина представляет собой суспензию бактериальных клеток, выращенных на твердых или жидких питательных средах. Применяется как лечебный препарат в основном при фурункулезе и других гнойничковых поражениях кожи.

Комплексная аутовакцина приготовляется методом выращивания микроорганизмов на твердых питательных средах, покрытых целлофановыми дисками (мембранами), или в целлофановых мешочках, погруженных в жидкие питательные среды.

Препарат содержит целые микробные клетки и продукты их метаболизма (при культивации микробов на целлофановых дисках экзогенные метаболиты бактерий задерживаются на целлофане). Разновидностью комплексной аутовакцины являются полные бактериальные антигены, изготовляемые методом центрифугирования комплексной аутовакцины с последующим удалением осадка, состоящего из микробных тел. Препарат содержит в основном продукты метаболизма микроорганизмов и незначительное количество микробных клеток. Комплексную аутовакцину используют как аллерген при аллергологическом обследовании больного (постановка кожных, провокационных ингаляционных тестов), а также в качестве лечебного препарата при специфической гипосенсибилизирующей терапии больных рецидивирующими воспалениями верхних дыхательных путей и инфекционно-аллергической бронхиальной астмой.

1. Производство сывороток. Современные прививочные препараты. Иммуносенсоры. Производство иммуномодуляторов, иммуностимуляторов и иммунодепрессантов. Проблемы биобезопасности вакцинных препараторов.

Глав­ным дей­ству­ющим ве­щес­твом та­ких сы­воро­ток яв­ля­ют­ся ан­ти­тела к раз­личных па­тоген­ным мик­ро­бам или их ток­си­нам. Сы­ворот­ки при­нято под­разде­лять на:

· лечебные, используемые при инфекционных заболеваниях, с целью гибели их возбудителя или нейтрализации их ядов.;

· профилактические, позволяющие создать кратковременный пассивный иммунитет;

· диагностические, позволяющие выявить наличие инфекционного заболевания по реакции на него антител сыворотки.

Им­мунные сы­ворот­ки при­меня­ют­ся не толь­ко в ме­дици­не, но и в ве­тери­нарии. На­иболь­шее рас­простра­нение по­лучи­ли ан­ти­ток­си­чес­кие пре­пара­ты, ней­тра­лизу­ющие ток­си­ны воз­бу­дите­лей та­ких за­боле­ваний, как диф­те­рия, стол­бняк или ган­гре­на. Эф­фект от их при­мене­ния нас­ту­па­ет очень быс­тро, что поз­во­ля­ет спас­ти жизнь боль­но­го. На вто­ром мес­те по по­пуляр­ности на­ходят­ся сы­ворот­ки ан­ти­бак­те­ри­аль­ные. Их эф­фект про­яв­ля­ет­ся мед­леннее, но зак­лю­ча­ет­ся в ги­бели мик­ро­ор­га­низ­мов, вы­зыва­ющих за­боле­вания, нап­ри­мер, ме­нин­гит или стреп­то­кок­ко­вую ин­фекцию. Сы­ворот­ки всег­да вво­дят в стро­го вы­верен­ной до­зиров­ке.