Поставить и учесть (демонстрация) опыт по определению чувствительности кандид к противогрибковым препаратам, красителям, антибиотикам широкого спектра действия

Чистую культуру возбудителя, выделенную из клинического материала больного (соскоб белого налета из мест поражений), засевают на поверхность питательного ага­ра (среда Сабуро) сплошным газоном с помощью стеклянного шпателя. После посева крышку чашки при­открывают не более чем на 15 мин и дают поверхности среды подсохнуть. Затем стерильным пинцетом следует положить на поверхность агара бумажные диски, про­питанные раствором определенного противогрибкового препарата, и слег­ка придавить. Расстояние между дисками и краем чаш­ки должно быть не менее 15 мм. Для контроля наносят диски с антибиотиками широкого спектра действия (тетрациклин, стрептомицин и др.). Чашки инкубируют около 18 ч при 37°С в перевернутом положении. При на­личии чувствительной к антибиотику флоры вокруг со­ответствующих дисков отмечается зона угнетения роста микроорганизмов. Диаметр зоны измеряют с точностью до 1 мм, определяя чувствительность: чувствительные (>20 мм), промежуточная чувствительность (15-20 мм), устойчивые (14 мм и менее).

Заключение: рекомендовано применение противогрибковых препаратов, к которым чувствительны кандиды: …….

Учесть и зарисовать готовую РА с “парными” сыворотками в серодиагностике кандидоза.

Данный серологический метод диагностики используют для выявления противогрибковых антител в сыворотке крови больного.

Компоненты реакции: исследуемые сыворотки пациента (материал берется на конец 1-й — начало 2-й и конец 3-й — начало 4-йнеделях с момента заболевания), кандидозный диагностикум и фосфатный буфер.

Постановка: «парные» исследуемые сыворотки титруют в 2-х рядах пробирок фосфатным буфером от 1:50 с двукратным увеличением титра. Для создания контролей в каждую предпоследнюю пробирку ряда вносят 0,5 мл сыворотки на физиологическом растворе и в каждую последнюю — 0,5 мл кандидозного диагностикума на физиологическом растворе. После добавления во все опытные лунки одинакового количества кандидозного диагностикума проводят инкубацию в термостате при температуре 37º 30-40 минут, а затем сутки выдерживают при комнатной температуре (18-20°С).

Учет развернутой реакции агглютинации производят, оценивая последовательно каждую пробирку, начиная с контрольных. Контроль сыворотки больного — жидкость прозрачная, осадка нет. Контроль диагностикума — жидкость прозрачная, на дне осадок в виде белой «пуговки».

Для опытных лунок положительным результатом является агглютинация в лунках (хлопья агглютината в абсолютной прозрачной жидкости (белый «зонтик»); отрицательная реакция «-» — отсутствие агглютинации (белая «пуговка»).

Учет результатов реакции производят путем установления нарастания антител в «парных» сыворотках (нарастание титра антител во второй сыворотке по сравнению с первой в 4 и более раза является положительным результатом).

Заключение: отмечаетсянарастание титра антител во второй сыворотке по сравнению с первой в 4 раза, что является признаком «свежего» инфекционного процесса.

Изучить и зарисовать морфологические и тинкториальные свойства актиномицетов и друзы в тканях по таблице.

Характерная особенность актиномицетов — способность образовывать хорошо развитый мицелий. Грам+ палочковидные формы часто имеют утолщённые концы, в мазках располагаются одиночно, парами, V-или Y-образно. Окраску по Граму фиксируют плохо; часто образуют фиолетовые зернистые формы.

Друзы актиномицетов имеют плотную, каменистую консистенцию и скрипят как песок при раздавливании между стеклами. Друзы актиномицетов (по Романовскому-Гимзе) образованы агрегатами мицелия, имеющими вид округлых или овальных базофильных масс с эозинофильными включениями на поверхности.

Примеры ситуационных задач

Ситуационная задача

У больного С. 22 года, после курса антибиотикотерапии появился желтоватый «творожистый» налет на слизистой оболочке полости рта. При микроскопии в мазке обнаружены скопления Грам+ овальных клеток. При посеве на питательные среды возбудитель образует колонии средних размеров, молочно-белые, напоминающие «капли майонеза». Биохимические свойства характеризуются способностью ферментировать глюкозу и мальтозу с образованием кислоты и газа.

Назовите возбудителя данного заболевания:

1) Actinomyces israelii

2) Epidermophyton floccosum

3) Trichophyton rubrum

4) Candida albicans

5) Staphylococcus aureus

Назовите питательные среды для культивирования данного возбудителя:

1) сывороточная среда с ристомицином

2) среда Сабуро

3) среда Сотона

4) глюкозо-пептонный агар

5) ЖСА

Перечислить методы лабораторной диагностики заболевания:

1) бактериоскопический

2) биологический

3) с ерологический

4) бактериологический

5) аллергологический

Теоретические вопросы для рубежного контроля знаний

1) Характеристика биологических свойств возбудителя и особенности микробиологической диагностики сыпного тифа: эпидемического и эндемического (крысиного)

2) Характеристика биологических свойств возбудителя и особенности микробиологической диагностики Ку-лихорадки

3) Характеристика биологических свойств возбудителя и особенности микробиологической диагностики возвратного тифа

4) Характеристика биологических свойств возбудителя и особенности микробиологической диагностики клещевого боррелиоза (болезни Лайма)

5) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики сифилиса

6) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики гонореи

7) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики трихомоноза

8) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики урогенитального хламидиоза

9) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики урогенитального микоплазмоза

10) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики кандидоза

11) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики дерматомикозов (Асhorion sp., Epidermophyton sp., Trichophyton sp.)

12) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики актиномикоза