Разобрать схему постановки и учесть РСК в серодиагностике хламидийной пневмонии.

Метод диагностики: серологический — используют для выявления противохламидийных антител в сыворотке крови больного.

Компоненты: исследуемая сыворотка больного человека (в которой ищут антитела к возбудителюхламидийной пневмонии), хламидийный диагностикум (взвесь убитых Chlamydophila pneumoniae), система комплемента в рабочей дозе и гемолитическая система (состоящая из гемолитической сыворотки кролика и эритроцитов барана), физиологический раствор.

Постановка в рабочую пробирку вносятисследуемую сыворотку больного человека в титре 1:40, хламидийный диагностикум, комплемент в рабочей дозе. Контроли: 1 пробирка — контроль сыворотки больного. В тест-системе находятся сыворотка больного, комплемент и физиологический раствор; 2 пробирка — контроль комплемента: хламидийная диагностическая сыворотка, хламидийный диагностикум и комплемент; 3 пробирка — контроль диагностикума: хламидийный диагностикум, комплемент и физиологический раствор.

После инкубации опытной и контрольных пробирок в течение 30-40 минут при температуре 37°C в них добавляют гемолитическую систему и снова инкубируют 40 минут при температуре 37 °C.

Учет реакции начинают с контролей.

1 контроль сыворотки больного — гемолиз эритроцитов («лаковая кровь»). Комплемент не связался в тест-системе с компонентами сыворотки, т.к. нет комплекса Аг-Ат, поэтому после добавления гемолитической системы в присутствии свободного комплемента произошел гемолиз эритроцитов. Контроль правильный.

2 контроль комплемента — гемолиз отсутствует, на дне пробирки осадок эритроцитов. В тест-системе составлен заведомо положительный комплекс Аг-Ат, и комплемент в рабочей дозе полностью с ним связался без остатка. При добавлении гемолитической системы в отсутствии комплемента гемолиза не происходит, и эритроциты выпадают в осадок. Контроль правильный.

В случае передозировки комплемента в данной пробирке произойдет гемолиз.

3 контроль диагностикума — гемолиз эритроцитов («лаковая кровь»). Комплемент не связался в тест-системе с антигенами диагностикума, т.к. нет комплекса Аг-Ат, поэтому после добавления гемолитической системы в присутствии свободного комплемента произошел гемолиз эритроцитов. Контроль правильный.

Опытная пробирка: положительная реакция «+» — пробирка с ровным осадком в виде «красной пуговки», гемолиз отсутствует (возбудитель хламидийной пневмонии и антитело образуют иммунный комплекс, к которому через Fс-фрагмент антител присоединяется комплемент, т.е. происходит связывание комплемента комплексом Аг-Ат. При добавлении гемолитической системы гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет, т.к. комплемент весь израсходован на формирование первоначального иммунного комплекса. Отрицательная реакция «-» — содержимое пробирки равномерно красного цвета («лаковая кровь») — гемолиз эритроцитов. Если антиген и антитело не соответствуют друг другу, т.е. в исследуемом образце нет антитела, комплемент остается свободным и присоединится к комплексу эритроцит — антиэритроцитарное антитело (гемолитическая система), вызывая гемолиз.

Заключение: Исследуемая сыворотка содержит антитела к возбудителю хламидийной пневмонии.

Заполнить таблицу по факторам вирулентности возбудителя легионеллезной пневмонии.

IV. Примеры ситуационных задач

Ситуационная задача

Больной 60 лет, заядлый курильщик, в рабочей комнате имеется кондиционер, обратился к врачу с жалобами на общую слабость, анорексию, заторможенность, упорные головные боли, непродуктивный кашель, высокую температуру (38,5⁰С) и одышку. Болен 3 дня. При осмотре выявлены локальная крепитация, бронхиальное дыхание, укорочение перкуторного звука, при рентгеноскопии — зоны затемнения в пределах одной доли легких. Определить возбудителя пневмонии:

1) Mycoplasma pneumoniae

2) Legionella pneumophila

3) Chlamydophila pneumonia

4) Streptococcus pneumoniae

Перечислить пути передачи установленной инфекции:

1) Воздушно-капельный

2) Пищевой

3) Воздушно-пылевой

4) Контактно-бытовой

Выбрать питательные среды, используемые для культивирования возбудителя установленной инфекции:

1) Кровяной МПА

2) Среда Мюллера-Хинтона

3) Среда Борде-Жангу

4) Угольно-дрожжевой агар

5) Клетки культуры ткани