Иммуннологические методы диагностики

Иммунные реакции используют при диагностических и иммунологических исследованиях у больных и здоровых людей. Серологические методы – методы изучения взаимодействия между антигеном и антителом. Их используют для выявления антител в сыворотке больного, т.е. для серодиагностики, определения вида или типа антигена – идентификации выделенного от больного микроорганизма.

Реакция агглютинации (РА) – это склеивание и выпадение в осадок микробов или других клеток под действием антител в присутствии электролита.

Для реакции необходимы антитела (находятся в сыворотке больного или в иммунной сыворотке), антиген (взвесь живых или убитых микроорганизмов, эритроцитов или других клеток) и изотонический раствор. РА используют для определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и др., определения возбудителя, выделенного от больного, определения групп крови с использованием моноклональных антител против аллоантигенов эритроцитов.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА)

основана на использовании эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их поверхности антигенами или антителами. Взаимодействие адсорбированных антигенов или антител с соответствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде «пуговки». Широко применяют при диагностике ряда инфекций.

Реакция обратной непрямой гемагглютинации основана на при-

менении антительных эритроцитарных диагностикумов, на которых адсорбированы антитела. В практике применяются при диагностике инфекционных болезней, определении гонадотропного гормона в моче при установлении беременности, выявлении повышенной чувствительности к лекарственным препаратам, гормонам.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде, подавлении антигенов вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. Используют для диагностики вирусных инфекций: гриппа, кори, краснухи, клещевого энцефалита.

Реакцию агглютинации для определения антирезусных антител

(непрямая реакция Кумбса) применяют у больных при внутрисосудистом гемолизе. У таких больных обнаруживают антирезусные антитела, которые специфически взаимодействуют с резусположительными эритроцитами, но не вызывают их агглютинации. Суть реакции: в систему антирезусные антитела + резусположительные эритроциты добавляют антиглобулиновую сыворотку, что вызывает агглютинацию эритроцитов. Применяют для диагностики гемолитической болезни новорожденных.

Реакция препицитации (РП). РП – это формирование и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Широкое применение получили разновидности реакции преципитации в полужидком геле агара.

Реакцию кольцепреципитации проводят в узких пробирках с иммунной сывороткой, на которую наслаивают растворимый антиген. При оптимальном соотношении антигена и антител на границе этих двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата. Практически применяют для диагностики ряда инфекций (сибирская язва, менингит и др.); в судебной медицине – для определения видовой принадлежности крови, спермы и др.; в санитарногигиенических исследованиях при установлении фальсификации продуктов; для определения филогенетического родства животных и растений.

Реакция связывания комплемента (РСК). Специфический ком-

плекс антиген-антителоадсорбирует на себе (связывает) комплемент. РСК проводят в 2 фазы: инкубация смеси, содержащей три компонента (а/г + а/т + комплемент); индикаторная: выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. Применяют для идентификации антигенов и серодиагностике инфекций, вызванных спирохетами (реакция Вассермана), риккетсиями и вирусами.

Реакция иммунного лизиса – это растворение клеток под воздействием антител при обязательном участии комплемента. Реакцию проводят в лунках геля из агара, содержащего эритроциты барана и комплемент. Вокруг гемолитической сыворотки, содержащей антитела против эритроцитов барана в результате радиальной диффузии антител образуется зона гемолиза. Применяют для диагностики вирусных инфекций: гриппа, краснухи, клещевого энцефалита.

Реакция нейтрализации. Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или токсинов на чувствительные клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами.

Опсонофагоцитарная реакция (ОФР) – один из методов оценки активности иммунного фагоцитоза. Чем выше эта активность, темвыше устойчивость организма к инфекции. В иммунном организме под влиянием антител (опсонинов) фагоцитоз протекает активнее. Поэтому показатели фагоцитарной активности имеют не только диагностическое значение, но и дают возможность прогнозировать исход инфекционного процесса, оценивать результаты лечения и вакцинации.

Реакция иммунофлюоресценции. Различают 3 разновидности:

прямая, непрямая, с комплементом. Антигены тканей или микробы, обработанные иммунной сывороткой с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучахлюминесцентного микроскопа.

Иммуноферментный анализ. Выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментомметкой. После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляютсубстрат-хромоген.Субстрат расщепляется ферментом, и изменяется цвет продукта реакции. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностикиВИЧ-инфекций,гепатита В и др., определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других БАВ, содержащихся в исследуемом материале.

Лекция 19

КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ

Состояние иммунной системы имеет важнейшее значение в обеспечении гомеостаза организма, защите от всего генетически чужеродного.

Иммунный статус определяет эффективность и согласованность работы всех систем и звеньев иммунитета – макрофагов, комплемента, интерферонов, Т- и В-лимфоцитов– главной системы гистосовместимости. Раздел медицины, изучающий нарушения функций иммунной системы человека, называется клинической иммунологией.

Для постановки диагноза иммунопатологического состояния проводят сбор иммунологического анамнеза и постановку иммунологических тестов. Могут также осуществляться тесты in vivo (кож-

ные тесты), рентгенологическое исследование лимфоидных органов (тимуса).

Иммунный статус – это структурное и функциональное состояние иммунной системы индивидуума, определяемое комплексом клинических и лабораторных иммунологических показателей. Иммунный статус характеризует способность макроорганизма к иммунному ответу на определенный антиген в данный момент времени. Иммунный ответ на один и тот же антиген у разных лиц может варьировать не только по форме, но и по степени выраженности.

Р.П. Петров с соавторами в 1984г. создали двухэтапный подход к оценке иммунного статуса, в соответствии с которым лабораторные иммунологические тесты разделены на тесты первого и второго уровня.

На первом этапе с помощью простых ориентировочных мето-

дов выявляют «грубые» дефекты фагоцитоза, клеточного и гуморального иммунитета. К тестам первого уровня относят:

определение абсолютного и относительного содержания лимфоцитов в периферической крови;

определение количества Т- иВ-лимфоцитов;

определение уровня иммуноглобулинов основных классов

(IgG, IgM, IgA);

определение фагоцитарной активности лейкоцитов;

определение титра комплемента (не обязательно).

С учетом анализа результатов тестов 1-гоуровня определяют дальнейшую тактику иммунологического исследования.

Более тщательный и глубокий анализ состояния иммунной системы проводят с помощью тестов второго уровня – аналитических методов. К ним можно отнести методы оценки функциональной активности Т- иВ-лимфоцитов,фагоцитов, вспомогательных клеток, естественных киллеров, компонентов системы комплемента и многих других.

Методы исследования главных компонентов иммунной системы принято делить также на скрининговые и развернутые.

Показания к оценке иммунного статуса человека:

своевременное выявление приобретенных иммунологических дефектов (вторичные иммунодефициты);

диагностика иммунопатологических проявлений соматической патологии;

специфическая диагностика аллергии; диагностика аутоиммунной патологии; диагностика лимфопролиферативных заболеваний;

подбор пары донор-реципиентпри пересадке органов и тка-

ней;

диагностика дефектов иммунной системы при опухолях и их лечение;

выявление конкретного иммунологического дефекта и подбор способа иммунокоррекции;

оценка эффективности иммунокорригирующей терапии и прогноза течения заболевания;

диагностика и лечение иммунопатологии репродуктивной функции (в т.ч. «иммунные формы» бесплодия, беременность, лактация), а также нарушений, связанных с климаксом.

Факторы естественной резистентности. При оценке состоя-

ния факторов естественной резистентности определяют функциональную активность фагоцитоза, функцию системы комплемента, интерфероновый статус, колонизационную резистентность.

Функциональная активность фагоцитов определяют по под-

вижности, адгезии, поглощению, дегрануляции клеток фагоцитами, внутриклеточному киллингу и расщеплению захваченных частиц, образованию активных форм кислорода (определение фагоцитарного индекса, НСТ-тести др.).

Состояние системы комплемента определяют в реакции гемо-

лиза (результат учитывают по 50%-мугемолизу).

Интерфероновый статус выявляют путем титрования на культуре клеток уровня интерферона в сыворотке крови.

Колонизационную резистентность определяют по степени дис-

бактериоза различных биотопов организма (чаще всего толстой кишки).

Тесты оценки гуморального иммунитета. Гуморальный имму-

нитет определяют по уровню Ig классов M, A, G, D, E в сыворотке крови, количеству специфических а/т, катаболизму Ig, ГНТ, показателюВ-лв периферической крови, бласттрансформацииВ-лпод действиемВ-клеточныхмитогенов и другим тестам.

Клеточный иммунитет. Состояние клеточного иммунитета оценивают по количествуТ-лимфоцитов,количеству субпопуляцийТ-лв периферической крови, бласттрансформацииТ-лпод действием Т-

клеточных митогенов, определению гормонов тимуса, уровню секретируемых цитокинов, постановкой кожных проб с аллергенами.

Для определения количества Т-клеток чаще используют метод розеткообразования с эритроцитами барана. Метод основан на родстве рецептора CD2 с белками мембраны эритроцитов барана. При смешивании лимфоцитов с эритроцитами барана образуются фигуры в виде розеток. Количество розеткообразующих клеток(Е-РОК)соответствует количествуТ-лимфоцитов(CD2+ клеток).

Важнейшее значение имеет вычисление индекса CD4/CD8 (хел- перно-супрессорногоотношения). Необходимо учитывать, что нет единого метода для оценкиТ-хелперовиТ-супрессоров.

Существуют дополнительные тесты для оценки иммунного статуса: определение бактерицидности сыворотки крови, титрование С3-, С4-компонентов комплемента, определение содержания С- реактивного белка в сыворотке крови, определение ревматоидных факторов.

Существующие методы оценки иммунного статуса постоянно совершенствуются, однако есть ряд общих правил, которого необходимо придерживаться при оценке иммунограмм:

комплексный анализ, а не оценка одного показателя;

анализ в комплексе с клиническими и анамнестическими данными;

оценка резких сдвигов показателей (не менее 20% от нормы); анализ в динамике; анализ не только (и не столько) абсолютных данных, а соот-

ношений показателей (особо-индексTh/Ts);

учет возможных индивидуальных особенностей (возраст, сопутствующие заболевания) и колебаний показателей (физиологических и патологических – прием пищи, физические нагрузки, время суток, действие стрессоров и т.д.);

учет региональных норм.

Патология иммунной системы:

иммунная недостаточность или иммунодефициты, когда имеется отклонение в показателях одного или нескольких механизмов иммунного ответа;

аллергические или аутоиммунные болезни. Излишняя активация иммунных механизмов.

Иммунодефициты – это нарушения нормального иммунного статуса, обусловленные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа.

Различают иммунодефициты первичные или врожденные; вторичные или приобретенные.

Первичные или врожденные иммунодефициты. Нарушение им-

мунных гуморальных и клеточных механизмов связано с генетическим блоком, т.е. генетически обусловлена неспособность организма реализовывать то или иное звено иммунологической реактивности. Расстройства иммунной системы могут затрагивать и факторы, определяющие неспецифическую резистентность.

Причинами врожденных иммунодефицитов являются удвоение хромосом, точечные мутации, дефект ферментов обмена нуклеиновых кислот, повреждения генома в эмбриональном периоде и др.

Иммунодефициты могут быть связаны с недостаточностью фа-

гоцитоза, комплемента, гуморального иммунитета, недостаточностью клеточного иммунитета, комбинированные иммунодефициты.

Вторичные или приобретенные иммунодефициты формируются под воздействием окружающей среды на уровне фенотипа и обусловлены нарушением функций иммунной системы в результате различных заболеваний или неблагоприятных воздействий на организм.

К основным причинам возникновения вторичных иммунодефицитов можно отнести следующие:

1.Паразитарные и протозойные болезни (описторхоз, малярия, шисто- и трипаносомозы, трихинеллез и др.).

2.Вирусные инфекции – наиболее крупная группа инфекционных агентов, вызывающих иммунодефициты:

внутриутробные инфекции (цитомегаловирусная инфекция, краснуха);

острые инфекции (корь, грипп, краснуха, паротит, ветряная оспа, вирусные гепатиты);

персистирующие (гепатит В и С, герпес); инфекции иммунной системы (ВИЧ, ЦМВ, вирус Эпштейна –

Барр).

3.Бактериальные инфекции (туберкулез, сифилис, лепра).

4.Хирургические вмешательства, травмы.

5.Ожоги.

6.Нарушения обмена веществ (сахарный диабет) и истощение (голодание).

7.Заболевания органов выделения (уремия).

8.Опухоли.

9.Хронические соматические заболевания.

10.Действие лекарств, экологических и производственных факторов, радиация.

Дефекты иммунного статуса при паразитарных и протозойных заболеваниях связаны с рядом механизмов:

угнетением функции макрофагов (малярия); выработкой лимфоцитотоксинов (описторхоз, трихинеллез);

выработкой супрессивно действующих факторов (трипано- и шистосомозы);

различными нарушениями иммунорегуляции.

Иммунодефициты при бактериальных инфекциях. Часто наблю-

дается снижение Т-лимфоцитови митогенной активности на фитогемагглютинин (ФГА) (лепра, туберкулез, сифилис, пневмококковые инфекции, коклюш, бруцеллез, скарлатина). При стрепто- и стафилококковых инфекциях подавлениеТ-звенаиммунитета часто сочетается с повышением функцииВ-системыи формированиеминфекционно-аллергическихи аутоиммунных осложнений (заболеваний).

Иммунодефициты при вирусных инфекциях. Многие вирусы вы-

зывают резкое угнетение Т-звенаиммунитета (вирусы кори, краснухи, гриппа, паротита). При кори и гриппе это нарушение сочетается с дефектами фагоцитоза, что еще более угнетает противомикробную защиту и способствует присоединению бактериальных осложнений. Однако наиболее существенные нарушения иммунной системы вызывают вирусы, непосредственно поражающие иммунную систему.

1. Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) вызывает заболева-

ние, которое называют «синдром приобретенного иммунодефицита» (СПИД). Этот вирус относится к ретровирусам и имеет тропизм к клеткам иммунной системы и некоторым другим клеткам, несущим CD4+ рецептор. CD4 является фактически рецептором для ВИЧ, благодаря которому РНК вируса попадает (инфицирует) клетки, формирует ДНК-копию,которая встраивается в ДНК (геном) клетки хозяина и получает возможность реплицироваться. Вирус оказывает на клетки цитопатический эффект, вызывая поражение Т-

хелперов и других СД4+ клеток, снижение индекса CD4/CD8, глобальный дефект гуморального и клеточного иммунитета в сочетании с поликлональной активацией В-лимфоцитов,резкое ослабление противоинфекционной и противоопухолевой защиты. Характерно прогрессирование болезни (иммунодефицита) на фоне активного антительного ответа и ГЗТ на ВИЧ. На этом фоне присоединяются оппортунистические(СПИД-ассоциированные)вторичные инфекции и инвазии (ЦМВ, гепрес, пневмоцистоз, токсоплазмоз, микоплазмоз и др.).

2. Цитомегаловирус. ЦМВ инфекция приводит к резкому снижению CD4+Т-лимфоцитови гиперактивности CD8+Т-клеток,угнетению клеточного иммунитета. ЦМВ относится к семейству герпесвирусов, часто вызывающих персистентные инфекции и развитие вторичных иммунодефицитов.

3. Вирус Эпштейна-Барр вызывает инфекционный мононуклеоз. Рецептором для этого вируса являетсяCD21-рецептор,поэтому поражаются преимущественноВ-клетки.Эти же рецепторы имеются на дендритных клетках лимфоидных фолликулов, цервикальном эпителии. СД21 рецептор является местом присоединения С3dкомпонента комплемента. Присоединение к рецептору вируса Эп-штейна-Баррвызывает экспрессию на мембранеВ-лимфоцитовособого антигена, распознаваемого СД8+лимфоцитами как чужеродного. В результатеВ-клеткистановятся мишенью для собственныхТ-клеток.В крови определяется атипичныйТ-лимфоцитоз,бласттрансформацияВ-клеток,выработка гетерофильных антител. Формируется сложный иммунодефицит с элементами аутоагрессии.

Иммунодефициты при ожогах усугубляют опасность инфекционных осложнений. В первые дни преобладает снижение иммуноглобулинов основных классов (особенно IgG). В дальнейшем действие ожоговых антигенов приводит кВ-клеточнойстимуляции. Отмечено снижение ряда показателейТ-клеточногоиммунитета в результате действия ожоговых токсинов – CD3+ и CD4+ клеток, ингибируется фагоцитоз, снижается активность комплемента. Прогностически не благоприятен дисбаланс соотношения CD4/CD8.

Иммунодефициты, связанные с недостаточностью питания, голоданием, нарушениями обмена веществ.

При сахарном диабете возникает предрасположенность к бактериальным инфекциям, связанная с нарушением функций лейкоцитов – хемотаксиса, адгезивных и бактерицидных свойств.

Дефицит белка в организме также повышает восприимчивость к инфекциям. Угнетается первичный иммунный ответ (синтез IgM), фагоцитарная активность клеток, митогенная активность.

Дефицит микроэлементов существенно сказывается на иммунной системе. Дефицит железа ведет к снижению активности железосодержащих ферментов,Т-звена,уровня миелопероксидазы и АФК. Дефицит цинка ведет к гипофункции тимуса со снижением CD4+Т-лимфоцитов,ответа на митогены, активности NK клеток, фагоцитарного звена. Дефицит лития ведет к недостаточности Т- лимфоцитов, особенно CD8+клеток. Существенно сказывается на иммунной системе дефицит меди, селена, кальция, магния. С дефицитом магния связаны нарушения синтеза антител, активации системы комплемента.

Лекарственные иммунодефициты связаны преимущественно с их иммунотоксическим действием. Достаточно часто отмечается активация Т-супрессоров, уменьшение количества В-клеток, снижение IgA. Существенное влияние на иммунный статус оказывают антибиотики, даже при коротких циклах применения, прежде всего

– пенициллины, тетрациклины, стрептомицин, противотуберкулезные и антигрибковые препараты. Они вызывают:

дефекты формирования первичного иммунного ответа (скорость образования клона плазматических клеток и антителообразования);

снижение противовирусной защиты; снижение цитотоксической активности Т- лимфоцитов;

уменьшение фагоцитарной активности нейтрофилов и макрофагов.

Существенно влияние на иммунную систему оказывает стресс. Начальный период острого стресса характеризуется снижением противоопухолевого и противоинфекционного иммунитета, в дальнейшем могут присоединяться аутоиммунные и аллергические реакции. Хронический стресс неизбежно приводит к формированию вторичного иммунодефицита.

Существенно меняется иммунный статус при старении. Отмечается инволюция тимуса, снижается уровень тимического фактора. С возрастом снижается активность клеточного иммунитета, страдают этапы распознавания антигена, пролиферативная активность Т- клеток, изменяется CD4/CD8 индекс в сторону супрессорной активности, страдают надзорные функции противоопухолевой защиты.

В отличие от первичных иммунодефицитов, вторичные иммунодефициты в большинстве случаев не носят необратимого характера и функции иммунной системы могут восстанавливаться, если прекращается действие факторов, обословивших иммунодефицит.

Иммунокоррекция – раздел клинической иммунологии, изучающий способы и методы профилактики и лечения болезней или состояний, связанных с нарушением функции иммунной системы.

Препараты, влияющие на иммунный статус и применяемые для иммунокоррекции, называются иммунотропными средствами.

Способы воздействия на иммунную систему:

иммунная инженерия (трансплантация органов и тканей иммунной системы: костный мозг, клетки эмбриональной печени, тимуса, комплексатимус-грудинаи т.д., введение Ig или Ig отдельных классов, плазмы крови);

коррекция гормонами и медиаторами иммунной системы

(тимические факторы, миелопептиды, цитокины типа интерферона, факторов переноса, интерлейкинов, колониестимулирующих факторов и др.);

фармакологическая иммунокоррекция иммунотропными пре-

паратами естественного происхождения (вакцины, липополисахариды, бактериальные смеси), а также синтетическими препаратами (левамизол, диуцифон, полианионы, изопреназин и др.);

экстракорпоральная иммунокоррекция – использование ла-

зерного и ультразвукового облучения, сорбционные методы, плазмаферез и др.

Классификация иммунотропных средств. Выделяют четыре большие группы (Хаитов Р.М., 2000): иммуномодуляторы, иммунокорректоры, иммуностимуляторы, иммунодепрессанты.

Иммуномодуляторы – это лекарственные средства иные препараты, которые в терапевтической дозе восстанавливают активность иммунной системы, повышая или снижая ее (эффект иммуномодуляторов определяется не только их свойствами, но и исходным состоянием иммунной системы).

Иммунокорректоры – это средства воздействия, обладающие иммунотропной активностью, которые нормализуют конкретное звено в иммунной системе – иммуномодуляторы точечного действия.

Иммуностимуляторы – это лекарственные средства, которые преимущественно усиливают иммунитет, доводя пониженные показатели до нормальных значений.

Иммунодепрессанты – лекарственные средства, подавляющие иммунный ответ.

Лекция 20

ИММУНОПРОФИЛАКТИКА

Специфические методы иммунотерапии: серотерапия, вакцинотерапия, иммунокоррекция.

Иммунопрофилактика – способ предупреждения инфекционных заболеваний путем создания искусственного специфического иммунитета.

Вакцинопрофилактика – создание активного иммунитета за счет вакцин, антигенов.

Серопрофилактика – создание пассивного иммунитета за счет введения в организм специфических антител – иммуноглобулинов.

Типы вакцин: живые, убитые, компонентные и субъединичные, рекомбинантные, синтетические олигопептидные, антиидиотипические и др.

Живые вакцины. Аттенуированные или ослабленные вакцины. Преимущества вакцин: полностью сохраняют антигенный набор микроорганизма; обеспечивают более длительное состояние специфической невосприимчивости. Живые вакцины используют для профилактики полиомиелита, туляремии, бруцеллеза, кори, желтой лихорадки, эпидемического паротита. Вместе с тем существуют и недостатки: наличие антигенных комплексов, перекрестно реагирующих с тканями человека, сенсибилизация организма, большая антигенная нагрузка на иммунную систему.

Убитые вакцины – это вакцинные препараты, не содержащие живых микроорганизмов. Вакцины могут содержать цельные микробы (корпускулы) (вакцины против чумы, гриппа, полиомиелитная вакцина Солка), отдельные компоненты (полисахаридная пневмококковая вакцина), иммунологически активные фракции (вакцина против вируса гепатита В)

Различают вакцины, содержащие антигены одного возбудителя

(моновалентные) или нескольких возбудителей (поливалентные).

Убитые вакцины, как правило, менее иммуногенны, чем живые, реактогенны, могут вызывать сенсибилизацию организма.

Компонентные (субъединичные) вакцины. Они состоят из глав-

ных (мажорных) антигенных компонентов, способных обеспечить протективный иммунитет. Ими могут быть:

компоненты структур клетки (антигены клеточной стенки, Н

– и Vi – антигены, рибосомальные антигены);

анатоксины – препараты, содержащие модифицированные химическим путем экзотоксины, лишенные токсических свойств, но сохранившие высокую антигенность и иммуногенность. Эти препараты обеспечивают выработку антитоксического иммунитета (антитоксических антител – антитоксинов). Наиболее широко используются дифтерийный и столбнячный анатоксины. Полученные химическим путем вакцинные препараты (пример, анатоксины, получаемые обработкой экзотоксинов формалином) называют химическими вакцинами;

конъюгированные вакцины – комплекс малоиммуногенных полисахаридов и высокоиммуногенных анатоксинов, например, сочетание антигенов Haemophilus influenza, обеспечивающего иммуногенность вакцины дифтерийного анатоксина;

субъединичные вакцины. Вакцину против вируса гепатита В готовят из поверхностных белков (субъединиц) вирусных частиц (HBs антиген). В настоящее время эту вакцину получают на рекомбинантной основе с помощью дрожжевых клеток с плазмидой, кодирующей HBs антиген.

Рекомбинантные вакцины. С помощью методов генной инженерии гены, контролирующие синтез наиболее значимых иммуногенных детерминант, встраивают в самореплицирующиеся генетические структуры (плазмиды, вирусы). Если носителем (вектором) является вирус осповакцины, то данная вакцина будет в организме индуцировать иммунитет не только против оспы, но и против того возбудителя, чей ген был встроен в его геном (если ген HBs антигена – против вируса гепатита В). Если вектором является плазмида, то при размножении рекомбинантного клона микроорганизма (дрожжей) нарабатывается необходимый антиген, который и используется в дальнейшем для производства вакцин.

 

Синтетические олигопептидные вакцины. Принципы их конст-

руирования включают синтез пептидных последовательностей, образующих эпитопы, распознаваемые нейтрализующими антителами.

Кассетные или экспозиционные вакцины. В качестве носителя используют белковую структуру, на поверхности которой экспонируют (располагают) введенные химическим или генно-инженерным путем соответствующие определенные антигенные детерминанты. В качестве носителей при создании искусственных вакцин могут использовать синтетические полимеры-полиэлектролиты.

Липосомальные вакцины – комплексы, состоящие из антигенов и липофильных носителей (пример – фосфолипиды). Иммуногенные липосомы более эффективно стимулируют выработку антител, пролиферацию Т- лимфоцитов и секрецию ими ИЛ- 2.

Антиидиопатические вакцины. Антиидиотипические антитела содержат «внутренний» специфический портрет антигенной детерминанты. Получают моноклональные антиидиотипические антитела, содержащие «внутренний образ» протективного антигена. Для оптимальных результатов (защиты в отношении возбудителя) необходимо иметь набор МКА против различных антигенных детерминант возбудителя.

Контроль качества вакцин:

1.Иммуногенность – защитные свойства вакцины против заболевания, вызванного возбудителем;

2.Безопасность – не должны вызывать заболевание или смерть

идолжны обеспечиваться гарантией;

3.Реактогенность – определение частоты и интенсивности поствакцинальных реакций;

4.Стабильность – сохранность физико-химическихсвойств в течение срока годности;

5.Стерильность – отсутствие всех микроорганизмов, в том числе и споровых.