Реакция с танином (проба Кункеля - Ветцеля).

При добавлении к пробам крови раствора танина, из крови, содержащей карбоксигемоглобин, выпадает светлый розово-малиновый осадок, а из крови, не содержащей карбоксигемоглобина, выпадает серовато-розовый.

Материалы и оборудование.

Кровь, содержащая и не содержащая карбоксигемоглобин, 3 %-ный раствор танина, штатив с пробирками, пипетки с грушей.

Ход работы.

Кровь разбавляют пятикратным объемом дистиллированной воды: к 0,1 см³ крови добавляют 0,5 см³ воды. Затем прибавляют 1,5 см³ 3 %-ного раствора танина и содержимое пробирки хорошо взбалтывают.

При выполнении этой реакции по Бюркеру кровь разбавляют водой в 100 раз и прибавляют 0,2 см³ 3 %-ного раствора танина.

10.5. Реакция с формальдегидом (проба Либмана).

При добавлении к пробам крови 40 %-ного раствора формалина, кровь, содержащая карбоксигемоглобин, сохраняет свою окраску, а кровь, не содержащая карбоксигемоглобина через несколько минут становится коричневато-черной. При применении 20 %-ного раствора формалина изменение окраски происходит через 40-60 мин.

Материалы и оборудование.

Кровь, содержащая и не содержащая карбоксигемоглобин, 20 %-ный и 40 %-ный растворы формальдегида, штатив с пробирками, пипетки с грушей.

Ход работы.

К 0,2 см³ неразбавленной крови прибавляют 0,2 см³ формалина (40 %-ный раствор формальдегида) и сильно взбалтывают. Аналогично поступают, используя 20 %-ный раствор формалина. В обоих случаях отмечают время изменения окраски.

Реакция с сульфатом меди (проба Залесского).

При добавлении к пробам крови 40 %-ного раствора сульфата меди, кровь, содержащая карбоксигемоглобин, становится прозрачно-розовой, не содержащая карбоксигемоглобина кровь приобретает зеленоватый оттенок.

Материалы и оборудование.

Кровь, содержащая и не содержащая карбоксигемоглобин, 40 %-ный раствор сульфата меди, штатив с пробирками, пипетки с грушей.

Ход работы.

К 0,1 см³ крови прибавляют воду до 10 см³ и хорошо взбалтывают. К 5 см³ полученного раствора крови прибавляют 0,2 см³ 10 %-ного раствора сульфата меди.

В протоколе отмечают ход работы, результаты наблюдений вносят в таблицу5.

10.7. Реакция с гексоцианоферратом (III) калия (проба Бюркера).

При добавлении к пробам крови раствора гексоцианоферрата (III) калия, кровь, в которой содержится карбоксигемоглобин, остается красной, а кровь, не содержащая карбоксигемоглобина, становится желтоватой.

Материалы и оборудование.

Кровь, содержащая и не содержащая карбоксигемоглобин, 1 %-ный раствор гексацианоферрата калия K₃[Fe(CN)₆], штатив с пробирками, пипетки с грушей.

Ход работы.

К 0,1 см³ крови прибавляют 10 см³ дистиллированной воды и взбалтывают. К 5 см³ полученного раствора крови прибавляют 0,2 см³ 1 %-ного раствора гексацианоферрата калия K₃[Fe(CN)₆].

10.8. Реакция с гексацианоферратом (III) калия и бихроматом калия (проба Сидорова)

При добавлении к пробам крови растворов гексоцианоферрата (III) калия и бихромата калия, кровь, содержащая карбоксигемоглобин, становится карминово-красной, а кровь, не содержащая карбоксигемоглобин, приобретает коричнево-зеленую окраску.

Материалы и оборудование.

Кровь, содержащая и не содержащая карбоксигемоглобин, 1 %-ный раствор гексацианоферрата калия K₃[Fe(CN)₆], 0,01 %-ный раствор бихромата калия, штатив с пробирками, пипетки с грушей.

Ход работы.

0,5 см³ крови разбавляют водой до 5 см³. К 2 см³ полученного раствора крови прибавляют 0,2 см³ 20%-ного раствора гексацианоферрата калия и такой же объем 0,01%-го раствора бихромата калия. Смесь крови и реактивов слегка взбалтывают. Кровь, содержащая карбоксигемоглобин, становится карминово-красной, а кровь, не содержащая карбоксигемоглобин, приобретает коричнево-зеленую окраску.

Реакция с гексацианоферратом (III) калия и уксусной кислотой (проба Ветцеля)

При добавлении к пробам крови раствора гексоцианоферрата (III) калия и уксусной кислоты, из крови, содержащей карбоксигемоглобин, выпадает светлый карминово-красный осадок, а из крови не содержащий карбоксигемоглобин – серовато-коричневый осадок

Материалы и оборудование.

Кровь, содержащая и не содержащая карбоксигемоглобин, 20 %-ный раствор гексацианоферрата калия K₃[Fe(CN)₆], уксусная кислота ледяная, штатив с пробирками, пипетки с грушей.

Ход работы.

К 0,5 см³ крови прибавляют 4,5 см³ дистиллированной воды. К 5 см³ полученного раствора крови прибавляют 2,5 см³ 20 %-ного раствора гексацианоферрата калия и 0,5 см³ ледяной уксусной кислоты.

В протокол записывают ход работы, результаты наблюдений вносят в таблицу 5.

Таблица 5. Результаты реакций обнаружения оксида углерода (II) в крови лабораторных крыс

ПРОБЫ	ОКРАСКА КРОВИ
Содержащей СО (II)	Не содержащей СО (II)
Гоппе-Зейлера
Сальковского– Катаяма
Кункеля – Ветцеля
Либмана
Залесского
Бюркера
Сидорова
Ветцеля

Вопросы для самоконтроля.

1. Пути проникновения в организм СО.

2. Какие соединения гемоглобина образуются при его взаимодействии с СО?

3. На чем основано обнаружение карбоксигемоглобина в крови при помощи качественных реакций?