Шигеллы. Классификация. Свойства. Заболевания, вызываемые ими. Эпидемиология и патогенез. Иммунитет. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

Шигеллез (бактериальная дизентерия)– острое антропонозное инфекционное заболевание, вызываемое бактериями рода Shigella, с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя и характеризующееся поражением толстого кишечника, проявляющееся частой болезненной дефекацией, жидким стулом с кровью и явлениями общей интоксикации.Возможен переход в хроническую форму или бактерионосительство.

· 1891 г. - А.В. Григорьевым был описан первый из открытых возбудителей дизентерии

· 1898 г. - японский микробиолог Киёси Шига обосновал эпидемиологическую роль бактерий в развитии данного заболевания

· 1900 г. - американский микробиоло С. Флекснер описал второй вид шигелл

· 1915 г. - датский ученый Зонне описал третий вид шигелл

· 1932 г. - английским микробиологом Бойдом был обнаружен четвертый вид шигелл

Классификация

· 5 группа по Берджи (факультативно-анаэробные Гр- палочки)

· семейство Enterobacteriaceae

· род Shigella

· 4 подгруппы A, B, C, D, которым соответствуют виды

1. Sh. dysenteriae (10 сероваров, 1-й Григорьева-Шига)

2. Sh. flexneri (6 сероваров, 6-й Ньюкастл)

3. Sh. boydii (15 сероваров)

4. Sh. sonnei (серологически однороден, но включает 4 биовара, отличающиеся по способности расщеплять ксилозу, рамнозу и арабинозу)

Морфологические и тинкториальные свойства Мелкие с закругленными концами палочки; спор, капсул и жгутиков не образуют, имеют микроворсинки – фактор адгезии, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, Грам-отрицательны.

Культуральные свойства

· Хорошо растут на простых питательных средах (МПА, МПБ)

· на жидких (селективные среды – желчный бульон, селенитовый бульон) – диффузный рост

· на плотных (дифференциально-диагностические – Эндо, Левина, предпочтительнее – Плоскирева) – мелкие прозрачные округлые слегка сероватые блестящие колонии плотные (исследуют лактозонегативные колонии)

Биохимические свойства

· Не расщепляют лактозу в отличие от E. coli, (Sh. sonnei может расщеплять лактозу на 2 – 3 сутки)

· расщепляют углеводы только до кислоты (только 6 – й серовар Sh. flexneri – Sh. newcastle, расщепляет глюкозу до кислоты и газа)

· могут образовывать индол, но не образуют сероводород (в отличие от сальмонелл)

· Ферментативная активность шигелл повышается по мере снижения патогенности

Токсигенные свойства

Связаны с энтеротоксином, который обладает следующими свойствами:

· энтеротоксигенность

· антифагоцитарная активность

· антикомплементарная активность

· способность разрушать энтероциты, что приводит к образованию кровоточащих язв=>жидкий стул с кровью в жалобах

Шигеллы способны выделять цитотоксины, нарушающие синтез белка в энтероцитах

· Экзотоксин выделяемый шигеллой Григорьева – Шига, обладает нейротропным, кардиотропным и цитотоксическим действием

Факторы вирулентности: адгезины, ферменты инвазивности – лецитиназа, гиалуронидаза, фибринолизин, муциназа

· Шигеллы проникают в энтероциты, где размножаются, т.е. являются факультативными внутриклеточными паразитами

Антигенные свойства

· Основной антиген (соматический О – АГ) видоспецифический (определяет виды) вариантоспецифический (деление на серовары) Sh. Dysenteriae (10 сероваров), Sh. Boydii (15 сероваров)

· Sh. Flexneri имеет в своем составе К – АГ (поверхностно - оболочечный), по которому выделяют 6 сероваров

Таким образом, антигенные свойства положены в основу международной классификации шигелл, Sh. Sonnei не имеет сероваров

Резистентность

· Чувствительны к действию температуры, (при 100° погибают мгновенно, при 80° - через 10 минут)

· В воде сохраняются от 2 недель до 2 месяцев

· Излюбленные продукты – молочные, Sh. sonnei может размножаться в молочных продуктах

· При УФО погибают через 10 минут

· Чувствительны к дезрастворам в рабочих концентрациях

Патогенез, эпидемиология, клиническая картина.

Клинические варианты острого шигеллеза:

1. Колитический

2. Гастроэнтероколитический

3. Гастроэнтеритический

1.Колитический. Встречается чаще всего, начинается остро. Схваткообразные боли в нижней части живота, в левой подвздошной области. Особенность болей - после дефекации боль уменьшается или исчезает на некоторое время. Позывы к дефекации появляются одновременно с болью или чуть позже. Сопровождаются тенезмами – тянущие судорожные боли в области заднего прохода, часто возникают ложные позывы.Стул первоначально каловый, постепенно объем каловых масс уменьшается, появляются слизь и кровь (незначительное количество), дефекации учащаются. В разгар болезни «ректальный плевок» - вместо стула – незначительное количество слизис примесью крови. С первого дня заболевания признаки интоксикации: t, гол.боль, головокр. Длительность 5-10 дней при неосложненном течении.

2.Гастроэнтероколитический вариант. Начало болезни напоминает пищевую токсикоинфекцию, а в разгаре болезни на первый план выходят симптомы колита.

3.Гастроэнтеритический. По течению похож на предыдущий, только признаки энтероклоита в разгар болезни не доминируют. И в целом болезнь протекает как пищевая токсикоинфекция.

Бактерионосительство может быть реконвалесцентным(сразу после перенесенного шигеллеза) и субклиническим(шигеллы в кишечнике есть, но клинических проявлений у человека никаких не было).

Хронический шигеллез – пат процесс продолжается более 3х месяцев.

Эпидемиология

Источник – человек (больной или бактерионоситель)

Пути передачи:

1. Водный (для Shigella flexneri)

2. Контактно-бытовой (для Shigella dysenteriae)

3. Алиментарный (для Shigella sonnei, через молочные продукты)

Восприимчивый коллектив – любой человек. После перенесения заболевания непродолжительный типоспецифический иммунитет. После перенесенного заболевания, вызванного шигеллой Григорьева – Шига - иммунитет пожизненный.

Заболеваемость носит сезонный характер – летом и осенью увеличивается, что связано с употреблением загрязненных ягод, фруктов, овощей

Патогенез.

Первые сутки в желудке. Здесь некоторые разрушаются и выделяют эндотоксин. Остальные идут в тонкую кишку. Тут задерживаются несколько суток и размножаются.

Продвигаются в толстую кишку.!!!Определяющий момент в развитии инфекционного процесса при шигеллезе – шигеллы способны к внутриклеточной инвазии эпителия слизистой толстой кишки с последующим межклеточным распространением. Инвазия происходит благодаря белкам-инвазинам, которые чувствительны к трипсину. Поэтому в желудке и тонкой кишке они не могут внедриться в клетки, а в толстой кишке трипсина нет – поэтому инвазия происходит.

Через М-клетки шигеллы проникают в подслизистую, взаимодействуют с макрофагами и вызывают их апоптоз. Выделяется ИЛ-8 =>воспаление в подслизистой. Т.к. макрофаги апоптознулись, то шигеллы легко проникают в эпителий слизистой с базальной стороны.

В эпителиоцитах они окутываются в мембранную вакуоль, но они лизируют эту вакуоль и проникают в цитоплазму клетки. Здесь покрываются филаментами актина и формируют актиновый хвост. Этот хвост способствует движению по цитоплазме и продвижению в соседние клетки благодаря полимеризации актина. Процесс происходит с помощью белка внутриклеточного распространения. Белок этот вызывает лизис мембран клеток и тем самым обеспечивает внутриклеточное и межклеточное распространение шигелл.

Шигатоксин продуцирует Shigella dysenteriae 1 серовар, все остальные шигеллы продуцируют шигаподобные токсины. Эти тикосины состоят из субъединиц А и В, которые имеют сродство к рецепторам эндотелия капилляров. Субъединица А проникает в клетку, взаимодействует с рибосомами=>блокирует синтез белка (цитотоксическое действие).!!!!У Sh.dysenteriae шигатоксина вырабатывается много, и он так же попадает в кровь, поражая гломерулы почек=>развивается гемолитический уремический синдром с почечной недостаточностью. Шигаподобные токсины остальных шигелл вырабатывается в 1000 раз меньше, поэтому токсическое действие ограничивается стенкой кишечника. Эндотоксин вообще нужен для защиты шигеллы от действия низкой рН, всасывается в кровоток и вызывает интоксикацию.

ЛАБ.ДИАГНОСТИКА

Исследуемый материал – испражнения

1.Экспресс-метод: ПЦР, РИФ, ИФА

2.Микроскопический метод:окр. По Граму-Гр-, низкая диагностич ценность, практически не используют

3.Бак.метод

Селективные среды: ср.Мюллера(МПБ+мел+р-рЛюголя+тетратионат Na), селенитовый бульон

Дифференциально-диагностические пит.ср.: ср.Эндо(МПА+лактоза+фуксин+сульфит Na, гидрофосфат Na, карбонат Na), ср.Левина(МПА+метиленовый синий+эозин+лактоза+фосфат калия), ср.Плоскирева(желчные соли+лактоза+индикатор)

Колонии мелкие,округлые, прозрачные, бесцветные(лактозонегативные-лактозу не расщепляют).

Из колоний делают мазок с окраской по Граму, определяют подвижность(неподвижны).

Из подозрительных колоний выделяют чистую культуру на среде Ресселя(глюкоза+лактоза+агар+бромтимоловый синий+натрий хлористый).

Культуру идентифицируют по бх свойствам: 1.ферментируют глюкозу до ксилоты (кроме 6го серовара Sh.flexneri), 2.не ферментируют лактозу (кроме Sh.sonnei через 48-72ч), 3.не образуют H2S.

По фаголизабельным свойствам. По антигенным свойствам:РА на стекле сначала с поливалентной агглютинирующей

адсорбированной шигеллезной сывороткой. Если результат +, то затем с каждой из моновалентных видовых агглютинирующих адсорбированных шигеллезных сывороток. Затем определение серовара с типовыми моновалентными агглютинирующими адсорбированными шигеллезными сыворотками.

4.Серологический метод. РА и РПГА с определением титра АТ в парных сыворотках; этот метод так же используют для выявления бактерионосительства. Sh.flexneri титр 1:200, Sh.sonnei 1:100).

5.Метод кожно – аллергических проб: проба Цуверкалова с дизентерином (в настоящее время не используется)

6.Биологический метод: в настоящее время не используется (кератоконъюнктивальная проба)

ПРОФИЛАКТИКА И ЛЕЧЕНИЕ

Вакцина «Шигеллвак» (вакцина дизентерийная против шигелл Зонне липополисахаридная жидкая)- для профилактики дизентерии Зонне по эпидемиологическим показаниям у с 3хлетнего возраста. Иммунитет в течение 1 года. При необходимости ревакцинация. Бактериофаг дизентерийный поливалентный в таблетках с кислотоустойчивым покрытием и в свечах(специф профилактика).

Для экстренной профилактики в очагах инфекции и специф лечения – бактериофаг дизентерийный поливалентный, интести-бактериофаг.