Клостридии. Классификация. Свойства. Заболевания, вызываемые ими. Эпидемиология и патогенез. Иммунитет. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

Газовая гангрена (анаэробная раневая инфекция) – полимикробное заболевание. Вызывают: C. Perfringens, С. Novyi (oedematies), C. Septicum, C. histolyticum, С. Sordellii

Классификация:

○ Надцарство Прокариоты

○ Царство Бактерии

○ Подцарство Эубактерии

○ Семейство: Bacillaceae;

○ Род: Clostridium;

○ Виды: C. Perfringens, С. Novyi (oedematies), C. Septicum, C. histolyticum, С. Sordellii.

18 группа по Бержи - Гр+ образующие споры анаэробы. Палочки с центрально или субтерминально расположенными спорами. C. Perfringens не имеет жгутиков. С. Novyi (oedematies) – не образует капсулы. C. Septicum – встречаются нитевидные формы до 50 мкм в длину, не образует капсулы.

Эпидемиология. Clostridium perfringens распространены повсеместно; бактерии выделяют из воды, почвы и сточных вод. Также они колонизируют кишечник животных и человека (выделяют у 25-35% здоровых лиц). У человека возбудитель газовой гангрены вызывает два типа поражений — газовую гангрену и пищевые токсикоинфекции.

Патогенез. Возникновению ГГ способствует загрязнение ран землей, наличие обширных очагов разможжения и некроза тканей (т.к. некротизированная ткань не снабжается кровью, лишаясь притока антибактериальных факторов и способности к воспалительной реакции). Это создает идеальную среду для размножения Cl. Инвазивность бактерий ограничена и даже при массивных поражениях носит вторичный характер. В организме Cl в результате биохимической активности выделяют газ, который расслаивает мышцы, а гиалуронидаза и коллагеназа увеличивают проницаемость тканей. Всасывание продуктов распада ведет к интоксикации.

Лабораторная диагностика.

ИМ - раневое отделяемое, некротизированная ткань, секционный материал, перевязочный и шовный материал.

1. Экспресс-диагностика – РИФ

2. Микроскопический метод – наличие крупных ГР+ палочек с центрально или субтерминально расположенными спорами и окруженных капсулой (C. Perfringens).

3. Бактериологический метод – ИМ засевают на плотную или жидкую среду КАБ (кровяной агар для бактериоидов), сахарно-кровяной агар, на среду Китта-Тароцци, на среду Вильсона-Блера (железосульфитный агар). Посевы помещают в анаэробные условия. Учитывают культуральные, морфологические и тинкториальные свойства, определяют подвижность. Идентифицируют по БХ свойствам.

Для бактериологического исследования на газовую гангрену берут экссудат, кусочки измененной ткани из раны больного, а также кровь, отделяемое из раны м секционный материал. При пищевых токсикоинфекциях исследуют рвотные массы, фекалии и остатки пищевых продуктов. Все взятые материалы помещают в стерильную герметически закрывающуюся стеклянную посуду и немедленно пересылают в бактериологическую лабораторию. Все пробы подвергают микроскопии. Для этой цели готовят мазки-отпечатки и окрашивают их по Граму. Наличие в пробе большого количества крупных грамположительных палочек, имеющих споры, служит ориентировочным признаком для подозрения на клостридиальную инфекцию. Взвесь исследуемого материала засевают на кровянойагар, агар Вильсона-Блэра. Посевы инкубируют в анаэробных условиях при 37°С, просматривают на следующий день и затем через каждые 2 дня (до 7 суток) для выделения подозрительных колоний.

ЖЕЛЕЗО-СУЛЬФИТНЫЙ АГАР используется для выделения анаэробных бактерий. Готовится из питательного агара, к которому добавляют 1% глюкозы, хлорид железа и сульфит натрия. Анаэробные клостридии (Clostridiumperfringens) образуют на среде колонии черного цвета за счет образования соединений железа с серой.

КАБ - питательная среда для выявления гемолитических свойств бактерий. К расплавленному остуженному (до 45- 50 гр С) питательному агаруасептически добавляют 5-10% дефибринированной крови. Вокруг выросших колоний отчетливо видны прозрачные зоны гемолиза. Колонии, вызывающие гемолиз проверяют на чистоту и наличие грамположительных палочек (путем микроскопии), и затем отсевают в пробирки на анаэробную среду КиттаТароцци.

СРЕДА КИТТА-ТАРОЦЦИ обеспечивает рост многих спорообразующих и строгих аспорогенных анаэробов. Ее используют для культивирования и хранения клостридий. Состоит из питательного бульона, 2% глюкозы и кусочков печени или мясного фарша для адсорбции кислорода. Перед посевом среду прогревают на кипящей водяной бане в течение 10-15 минут для удаления воздуха. После посева среду заливают небольшим слоем вазелинового масла. Выросшие анаэробы вызывают помутнение питательной среды, а обильное газообразование приводит к всплытию кусочков печени или фарша. Выделенные чистые культуры идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам и проверяют на токсичность (реакция преципитации в геле), а также проводят биологическую пробу на лабораторных животных (мышах, морских свинках). Полуавтоматический микробиологический анализатор. Проводит идентификацию микроорганизмов и определение чувствительности к антибактериальным препаратам за 24 часа. Идентификацию грибов,нейсерий и анаэробов возможно проводить за 4 часа.

4. Биологический метод – основной. Контрольной группе мышей вводят исследуемый материал от больного, если есть экзотоксин – на след день умирает вся контрольная группа. Опытной группе вводят смесь ИМ и анатоксические сыворотки, группа остается живой (нейтрализация с учетом по биопробе).

5. Реакция нейтрализации экзотоксинов в ИМ с помощью противогангренозных видовых сывороток на белых мышах или морских свинках.

Профилактика и лечение. Вакцинация не проводится. Экстренная профилактика: сыворотка антитоксическая противогангреозная поливалентная лошадиная концентрированная жидкая (содержит АТ

нейтрализирующие токсины С.perfringens, С.novyi, C. septicum). Профилактика: вводят в/м 30000 МЕ (10000МЕ каждого типа АТ).

Лечение:

○ Хирургическое

○ Антитоксические сыворотки – направлено на нейтрализацию гангренозных токсинов. Местно – обкалывание, орошение.

○ Антибиотики – местно и парентерально, комплексно.

○ Гипербарическая оксигенация

Столбняк — анаэробная раневая инфекция, вызываемая Clostridium tetani, характеризуется поражением нервной системы, приступами тонических и клонических судорог.

Классификация: 18 группа по Берджи ГР+, образующие споры анаэробы.

Вид Clostridium Tetani

C. Tetani – Гр+ палочки, образуют терминально расположенную спору (клетка со спорой имеет вид барабанной палочки). Перитрих. Капсулу не образует.

Эпидемиология. Возбудитель столбняка широко распространен в природе. Средой обитания является кишечник животных и человека. С фекалиями он попадает в почву, в которой образуются споры, сохраняющиеся много лет. Заражение наступает только при проникновении спор в организм через раневую поверхность, особенно при создании в них анаэробных условий.

Диагностика.

Лабораторная диагностика столбняка имеет второстепенное значение. При появлении клинических симптомов болезни диагноз не представляет труда.

ИМ – кусочки ткани вокруг ворот инфекции, перевязочный материал, ликвор.

1. Микроскопический метод – наличие ГР+ палочек с терминальными спорами (барабанные палочки).

2. Бактериологический метод – питательные среды для анаэробов

3. Биологический метод – основной. Реакция нейтрализаии на белых мышах. (см. выше)

Профилактика и лечение.

Плановая вакцинация – Вакцина АКДС (Адсорбированная Коклюшно-Дифтерийно-Столбнячная) – с 3 мес. 3-кратно, по 0.5 мл. Ревакцинация через 12-18 мес., последующие – каждые 10 лет АДС, АДС-М (Анатоксин Дифтерийно-Столбнячный в малых дозах) или АС.

Экстренная – как можно раньше, вплоть до 20 дня с момента получения травмы.

○ пассивная иммунизация противостолбнячной лошадиной сывороткой (проба Безредко) или противостолбнячным Ig человека;

○ пассивно-активная - сыворотка/Ig + анатоксин

○ экстренная ревакцинация АС-анатоксином

Лечение: противостолбнячная сыворотка (1000-3000 МЕ). Получена из крови лошадей, гинериммунизированных столбнячным анатоксином. Применяется для профилактики и лечения столбняка.

Ботулизм — острое инфекционное заболевание, характеризующееся интоксикацией организма с преимущественным поражением центральной нервной системы. Болезнь возникает в результате употребления пищевых продуктов, содержащих токсины C.botulinum.

Классификация: 18 группа по Берджи, ГР+, образующие споры анаэробы. Вид Clostridium botulinum

С.botulinum – образуют субтерминально расположенную спору (теннисная ракетка). Перитрих, капсулу не образует. Возбудитель ботулизма.

Эпидемиология. Резервуар инфекции — травоядные животные, выделяющие Cl. botulinum с испражнениями. В последующем из Cl. botulinum образуются споры, а при попадании их на пищевые продукты (обязательно в анаэробных условиях) выделяется токсин. Источником болезни чаще являются грибы (маринованные, иногда соленые), вяленая рыба, реже — мясо, колбасы (анаэробная среда). Больной ботулизмом не заразен.

Лабораторная диагностика. ИМ – кровь, промывные воды желудка, рвотные массы, испражнения, пищевые продукты.

1. Микроскопический метод – теннисные ракетки

2. Бактериологический метод – как и для других клостридий. Все иммунологические реакции: сероиндикации, сероидентификации, серодиагностики.

3. Биологический метод – основной. РН на белых мышах

Профилактика и лечение: По эпидемиологическим показаниям – трианатоксин адсорбированный (ботулинические анатоксины A,B,E) или тетраанатоксин адсорбированный (ботулинические антитоксины A,B,E и столбнячный анатоксин) Лечение: Поливалентная противобутолиническая лошадиная сыворотка в разовой дозе типа А – 10000 МЕ, типа В – 5000 МЕ, типа Е – 10000МЕ, иногда типа С – 10000 МЕ. Человеческий противоботулинический Ig и ЧПБ плазма.