К задачам 5, 15, 21 : определение чувствительности к антибиотикам дискодиффузным методом посев газоном бак. Петлей   или Тампоном на Ч. Петри. Наложение дисков с антибиотиками

1. Подготовка к работе:

- униформа (халат, колпак, сменная обувь)

- Гигиеническим методом обработать руки

- высушить полотенцем

- кран закрыть этим же полотенцем

- надеть одноразовые перчатки

 

Организация рабочего места:

- Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)

- Бактериологическая петля в стакане (справа)

При посеве инокулюма – взять тупфер

- Ч. Петри со стерильной питательной средой (слева, дном вверх)

- При посеве бак. петлей: пробирка с ростом на скосе (слева в штативе)

При посеве инокулюма – пробирка с инокулюмом в штативе с левой стороны

- Пинцет в стакане

- Набор флаконов с антибиотиками

 - Емкость с дез. раствором

 - Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

 

2. Манипуляции:

ПОСЕВ БАК. ПЕТЛЕЙ

· Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.

· Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем). (пробка должна быть направлена наружу).

· Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки

· Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо был виден скос

· Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.

· Снимают петлей поверхностный рост в достаточном количестве.

· Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки.

· Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и поставить в штатив.

· Левой рукой взять дно ч. Петри и густо нанести штрихи на 1 /2 площади (штрихи должны идти от ребра до ребра чашки).

· Не выпуская бак. петлю, дно чашки повернуть пальцами левой руки на 90 градусов и еще раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.

· Не выпуская бак. петлю, дно чашки еще раз повернуть пальцами левой руки на 90 градусов и еще раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.

· В третий раз повернуть дно чашки на 90 градусов раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.

· Петлю прокаливают в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя.

· Промаркировать посев по дну и поставить с левой стороны дном вверх

 

ПОСЕВ ИНОКУЛЮМА

· Тупфер стоит слева в штативе

· Взять тупфер в левую руку, извлечь тампон за пробку указательным и большим пальцем правой руки, не касаясь той части, которая будет контактировать с инокулятом или питательной средой. Тампон держат за пробку как карандаш.

· В левую руку взять пробирку с инокулюмом

· Открыть пробку мизинцем и безымянным пальцами правой руки (пробка не должна быть зажата в кулаке).Допускается вынимать пробку мизинцем и мякотью ладони правой руки.

· Пронести через пламя край пробирки и ту часть пробки, которая входит в горлышко пробирки.

· Погрузить тампон в биоматериал до дна пробирки и тщательно суспензировать его

· Приподнять тампон над поверхностью жидкости и слегка отжать тампон о стенки пробирки

· Вынуть тампон из пробирки

· Пронести через пламя край пробирки и ту часть пробки, которая входит в горлышко пробирки

· Закрыть пробирку

· Левой рукой поставить пробирку с биоматериалом в штатив

· Левой рукой взять дно ч. Петри

· Развернуть дно в сторону горения спиртовки

· Засеять инокулюм «газоном».(так же как бак. петлей) (рис.1)

· Тупфер вставить в пробирку. Сбросить в отходы класса Б

· Чашку с посевом поставить слева дном вверх

 

НАЛОЖЕНИЕ ДИСКОВ

1. В правую руку взять пинцет и пронести бранши через пламя 2-3 раза

2. Флакон с дисками удерживают в левой руке 3,4,5 плацами, а указательным и большим пальцами этой же руки открывают пробку на флаконе

3. После изъятия пинцетом диска открытый флакон проносят через пламя и закрывают пробку

4. В левую руку берут дно ч.Петри с засеянным газоном накладывают диск и слегка прижимают его пинцетом. Диски накладывать на 2 см от ребра чашки на равном расстоянии друг от друга

5. Дно ставят на место. Повторяют процедуру

6. Перед каждым наложением диска пинцет фламбируют

На одну чашки накладывают 4 диска (рис.2)

 

3. Завершение работы:

- убрать посев в термостат дном вверх

- пробирку с ростом на скосе или инокулюм убрать для дальнейшей утилизации

- штатив поместить в емкость для дезинфекции

- флаконы с антибиотиками поставить на место

- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на столе.

- Снять перчатки и сбросить их в контейнер

- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран закрыть этим же полотенцем

 

 

Рис. 1 Ход бак. петли или тампона

 

 

Рис. 2 наложение дисков с антибиотиками