Исследуемый материал берется только 1 раз

· Приоткрыть крышку в сторону горения спиртовки

· Вести бак. петлю под крышку и сделать 40 штрихов на площади 2-3 см² - сектор А

· Закрыть крышку.

· Прожечь бак. петлю.

· Остудить бак. петлю на воздухе

· Приоткрыть крышку ч. Петри

· Ввести бак. петлю и провести 4 параллельных штриха от сектора А – это сектор 1

· Закрыть крышку.

· Прожечь бак. петлю.

· Остудить бак. петлю на воздухе

· Приоткрыть крышку ч. Петри

· Ввести бак. петлю и провести 4 параллельных штриха от сектора 1 – сектор 2

· Закрыть крышку.

· Прожечь бак. петлю.

· Остудить бак. петлю на воздухе

· Приоткрыть крышку ч. Петри

· Ввести бак. петлю и провести 4 параллельных штриха от сектора 2

· ВАЖНО: линии сектора 3 не должны касаться сектора А

· Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и поставить в штатив.

· Петлю прожигают  в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя.

· Промаркировать посев

3. Завершение работы:

- убрать посев в термостат дном вверх

- биоматериал поставить для обезвреживания

- штатив поставить в емкость для обеззараживания

- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей.

- Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на столе.

- Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б

- Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов класса Б

- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран закрыть этим же полотенцем

К ЗАДАЧАМ 7, 17, 23: ПРИГОТОВИТЬ МАЗОК ИЗ КУЛЬТУРЫ С ПЛОТНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ И ОКРАСИТЬ ЕГО ПО ГРАМУ

1. Подготовка к работе:

- униформа (халат, колпак, сменная обувь)

- обработать руки гигиеническим способом

- высушить полотенцем

- кран закрыть этим же полотенцем

-надеть одноразовые перчатки и очки

 

2. Организация рабочего места:

- спиртовка (перед собой на расстоянии локтя)

-спички

- бак.петля (справа в стакане)

- физ. р-р (пробирка в штативе слева)

- предметное стекло (перед собой на перевернутой ч.Петри)

- ч.П. с ростом (слева дном вверх) на подносе, на салфетке, смоченной дез. раствором

- контейнер для сбора отходов класса Б

- маркер

3. Выполнение манипуляций:

- стекло протереть спиртовой салфеткой

- промаркировать стекло с обратной стороны (можно ограничить границы мазка)

- стекло положить на салазки или перевернутую чашку Петри

- выбрать изолированную колонию на ч.Петри с ростом

- маркировка колонии по дну ч. Петри

- петлю прожаривают в пламени, держа ее как карандаш вертикально в правой руке до ярко-оранжевого цвета. Проволоку прожигают до держателя. Потом два три раза проводят держатель горизонтально через пламя.

- Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем). (пробка должна быть направлена наружу).

- Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки

- Взять бак. петле    й физ. раствор

- Нанести ф.р. на стекло

- Провести край пробирки и пробку через пламя,

- Закрыть пробирку

- Петлю прожечь в пламени,  сначала горизонтально, потом - вертикально до ярко-оранжевого цвета. Проволоку прожигают до держателя. Два три раза проводят горизонтально через пламя.

- петлю остудить на воздухе

- в левую руку взять дно ч.Петри с ростом

- отколоть от выбранной колонии кусочек культуры (очень маленький)

- дно поставить на место

- Внести культуру в каплю физ. раствора и растереть на стекле – мазок должен быть тонкий!

- Петлю прожечь в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя. Петлю поставить в стакан держателем вниз

- высушить мазок в теплом воздухе горелки

- Фиксируют мазок в пламени горелки (проносят через пламя 3 сек.)

Окраска по Граму

· На фиксированный мазок, наложить фильтровальную бумагу

· на фильтровальную бумагу наносят карболовый раствор генцианвиолета на 2—минуты.

· аккуратно удаляют фильтровальную бумагу пинцетом. Избыток краски стряхнуть

· Мазок заливают раствором Люголя на 1минуту до почернения препарата

· Раствор сливают,

· На мазок наносят  96° этиловый спирт. Стекло покачивают в горизонтальной плоскости, до отхождения фиолетовых струй (приблизительно 15—40 секунд).

· Тщательно промывают водой, держа стекло наклонно 1—2 мин.

· Воду как следует стряхнуть

· Дополнительно окрашивают фуксином (2—5 мин)

· Промыть в проточной воде

· Высушить фильтровальной бумагой.

5. Завершение работы:

- убрать на общий стол ч.П. с ростом

- стекло с мазком положить в ванночку на общем столе

- ч.Петри на которой готовили мазок поместить в емкость для дезинфекции

- жидкость после окраски слить в спец. контейнер.

- убрать ёмкость с «салазками» в емкость для дезинфекции

- убрать красители

- продезинфицировать рабочую поверхность: Нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все что стоит на столе

- ветошь (вату) сбросить в контейнер для отходов класса Б

- снять перчатки (правильно) и сбросить в контейнер для отходов класса Б

- гигиеническим методом обработать руки

- руки вытереть полотенцем и полотенцем закрыть кран.