Алгоритмы мануальных действий

АЛГОРИТМЫ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ

К ЗАДАЧЕ 1, 24: ПОСЕВ ФЕКАЛИЙ НА СРЕДУ ЭНДО СТЕКЛЯННОЙ ПАЛОЧКОЙ.

1. Подготовка к работе:

- униформа (халат, колпак, сменная обувь)

- Гигиеническим способом обработать руки (можно с использованием дез. салфеток).  Высушить руки

  - этим же полотенцем закрыть кран

  - надеть одноразовые перчатки

Организация рабочего места:

Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)

Спички

Стерильная стеклянная палочка (завернута в бумагу, лежит справа)

Среда Эндо (розовая среда, поставить дном вверх слева)

Емкость с дез. раствором

Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

2. Манипуляции:

1. Развернуть палочку и взять ее как карандаш в правую руку (за верхнюю треть)

2. Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем). (пробка должна быть направлена наружу).

3. Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки

4. Ввести палочку в исследуемый материал до дна, перемешать материал

5. Приподнять палочку над материалом и, не вынимая из пробирки стряхнуть, чтобы материал не собирался в каплю

6. Пронести через пламя пробку и устье пробирки

7. Закрытую пробирку поставить в штатив

8. В левую руку взять дно ч. Петри со средой Эндо

9. Развернуть дно в сторону горения спиртовки

10. Сделать посевную площадку вращая палочку

11. Засеять материал одним из способов механического разобщения (штрихами; зигзагом; по секторам; комбинированный и др.)

12. Палочку инфицированным концом погрузить в дез. раствор

13. Промаркировать посев

3. Завершение работы:

- Посев поставить в термостат дном вверх

- убрать в термостат ч.П. с посевом дном вверх

- штатив убрать для дезинфекции

- исследуемый материал убрать для последующей утилизации

- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую поверхность сбросить в контейнер для отходов класса Б

- снять перчатки (правильно) и сбросить в контейнер для отходов класса Б

- гигиеническим методом обработать руки

К ЗАДАЧЕ 2: ПОСЕВ ГНОЯ НА ЖЕЛТОЧНО - СОЛЕВОЙ АГАР (ЖСА) ШПАТЕЛЕМ

1. Подготовка к работе:

- униформа (халат, колпак, сменная обувь)

- Гигиеническим методом обработать руки

- высушить полотенцем

- кран закрыть этим же полотенцем

- надеть одноразовые перчатки

Организация рабочего места:

Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)

Бактериологическая петля в стакане (справа)

Стерильный шпатель (справа или поставлен в стакан, или лежит завернутый в бумагу) Обратить внимание: нельзя брать в руки посевную сторону шпателя

Ч. Петри со стерильной питательной средой желтого цвета (слева, дном вниз)

Пробирка с исследуемым материалом (слева в штативе)

Емкость с дез. раствором

Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

 

2. Манипуляции:

· Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.

· Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем). (пробка должна быть направлена наружу).

· Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки

· Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо была видена жидкость

· Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.

· Берут  петлей жидкость (на петле должна быть пленочка)

· Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки, чтобы не сбросить пленку.

· Пронести через пламя пробку и верх пробирки.

· Закрыть пробирку и поставить в штатив.

· Приоткрыть крышку в сторону горения спиртовки

· Вести бак. петлю и сделать посевную площадку 2-3 см² у ребра дна

· Закрыть крышку.

· Прожечь бак. петлю.

· Поставить бак. петлю на место

· Приоткрыть крышку в сторону горения спиртовки

· Ввести шпатель под крышку и расположить его на посевной площадке прямым углом к ребру чашки

· Втереть материал в питательную среду (круг шпателем делают один раз)

· Сбросить шпатель в дез. раствор инфицированным концом

· закрыть чашку

· Перевернуть чашку дном вверх

· Промаркировать посев 

 

 

3. Завершение работы:

· - убрать посев в термостат дном вверх

· - пробирку с исследуемым материалом убрать для утилизации, штатив - для дезинфекции

· - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей.

· - Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на столе.

· - Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б

· - Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов класса Б

· - Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран закрыть этим же полотенцем

 

 

К ЗАДАЧЕ 3: ПОСЕВ «ГАЗОНОМ» НА СКОШЕННЫЙ АГАР (МПА) ДЛЯ НАКОПЛЕНИЯ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ

 

1. Подготовка к работе:

- униформа (халат, колпак, сменная обувь)

- Гигиеническим методом обработать руки

- высушить полотенцем

- кран закрыть этим же полотенцем

- надеть одноразовые перчатки

 

Организация рабочего места:

Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)

Бактериологическая петля в стакане (справа)

Ч. Петри с ростом (слева, дном вверх ) на подносе на дез. салфетке.

Пробирка со стерильным скосом МПА(слева, в штативе)

Емкость с дез. раствором

Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

2. Манипуляции:

· Оценить рост на ч.Петри с целью выбора изолированной колонии

· Промаркировать изолированную колонию по дну

· Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.

· Остудить петлю на воздухе

· Левой рукой взять дно ч. Петри

· Отколоть кусочек колонии

· Поставить дно на место

· Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем). (пробка должна быть направлена наружу).

· Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки

· Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо был виден скос

· Петлю вводят в пробирку до основания скоса и смешивают культуру с конденсатом

· Частыми штрихами засевают всю поверхность скоса. (Петлю водят частым зигзагом от стенки к стенке)

· Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки.

· Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и поставить в штатив.

· Петлю прожигают  в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя.

· Промаркировать посев

 

3. Завершение работы:

- убрать посев в термостат

- чашку с ростом убрать для дальнейшего обезвреживания

- салфетку сбросить в отходы класса Б

- поднос поместить в емкость для дезинфекции

- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей.

- Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на столе.

- Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б

- Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов класса Б

- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран закрыть этим же полотенцем

 

 

ПОСЕВ БАК. ПЕТЛЕЙ

· Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.

· Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем). (пробка должна быть направлена наружу).

· Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки

· Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо был виден скос

· Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.

· Снимают петлей поверхностный рост в достаточном количестве.

· Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки.

· Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и поставить в штатив.

· Левой рукой взять дно ч. Петри и густо нанести штрихи на 1 /2 площади (штрихи должны идти от ребра до ребра чашки).

· Не выпуская бак. петлю, дно чашки повернуть пальцами левой руки на 90 градусов и еще раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.

· Не выпуская бак. петлю, дно чашки еще раз повернуть пальцами левой руки на 90 градусов и еще раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.

· В третий раз повернуть дно чашки на 90 градусов раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.

· Петлю прокаливают в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя.

· Промаркировать посев по дну и поставить с левой стороны дном вверх

 

ПОСЕВ ИНОКУЛЮМА

· Тупфер стоит слева в штативе

· Взять тупфер в левую руку, извлечь тампон за пробку указательным и большим пальцем правой руки, не касаясь той части, которая будет контактировать с инокулятом или питательной средой. Тампон держат за пробку как карандаш.

· В левую руку взять пробирку с инокулюмом

· Открыть пробку мизинцем и безымянным пальцами правой руки (пробка не должна быть зажата в кулаке).Допускается вынимать пробку мизинцем и мякотью ладони правой руки.

· Пронести через пламя край пробирки и ту часть пробки, которая входит в горлышко пробирки.

· Погрузить тампон в биоматериал до дна пробирки и тщательно суспензировать его

· Приподнять тампон над поверхностью жидкости и слегка отжать тампон о стенки пробирки

· Вынуть тампон из пробирки

· Пронести через пламя край пробирки и ту часть пробки, которая входит в горлышко пробирки

· Закрыть пробирку

· Левой рукой поставить пробирку с биоматериалом в штатив

· Левой рукой взять дно ч. Петри

· Развернуть дно в сторону горения спиртовки

· Засеять инокулюм «газоном».(так же как бак. петлей) (рис.1)

· Тупфер вставить в пробирку. Сбросить в отходы класса Б

· Чашку с посевом поставить слева дном вверх

 

НАЛОЖЕНИЕ ДИСКОВ

1. В правую руку взять пинцет и пронести бранши через пламя 2-3 раза

2. Флакон с дисками удерживают в левой руке 3,4,5 плацами, а указательным и большим пальцами этой же руки открывают пробку на флаконе

3. После изъятия пинцетом диска открытый флакон проносят через пламя и закрывают пробку

4. В левую руку берут дно ч.Петри с засеянным газоном накладывают диск и слегка прижимают его пинцетом. Диски накладывать на 2 см от ребра чашки на равном расстоянии друг от друга

5. Дно ставят на место. Повторяют процедуру

6. Перед каждым наложением диска пинцет фламбируют

На одну чашки накладывают 4 диска (рис.2)

 

3. Завершение работы:

- убрать посев в термостат дном вверх

- пробирку с ростом на скосе или инокулюм убрать для дальнейшей утилизации

- штатив поместить в емкость для дезинфекции

- флаконы с антибиотиками поставить на место

- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на столе.

- Снять перчатки и сбросить их в контейнер

- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран закрыть этим же полотенцем

 

 

Рис. 1 Ход бак. петли или тампона

 

 

Рис. 2 наложение дисков с антибиотиками

 

Окраска по Граму

· На фиксированный мазок, наложить фильтровальную бумагу

· на фильтровальную бумагу наносят карболовый раствор генцианвиолета на 2—минуты.

· аккуратно удаляют фильтровальную бумагу пинцетом. Избыток краски стряхнуть

· Мазок заливают раствором Люголя на 1минуту до почернения препарата

· Раствор сливают,

· На мазок наносят  96° этиловый спирт. Стекло покачивают в горизонтальной плоскости, до отхождения фиолетовых струй (приблизительно 15—40 секунд).

· Тщательно промывают водой, держа стекло наклонно 1—2 мин.

· Воду как следует стряхнуть

· Дополнительно окрашивают фуксином (2—5 мин)

· Промыть в проточной воде

· Высушить фильтровальной бумагой.

5. Завершение работы:

- убрать на общий стол ч.П. с ростом

- стекло с мазком положить в ванночку на общем столе

- ч.Петри на которой готовили мазок поместить в емкость для дезинфекции

- жидкость после окраски слить в спец. контейнер.

- убрать ёмкость с «салазками» в емкость для дезинфекции

- убрать красители

- продезинфицировать рабочую поверхность: Нанести на рабочую поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все что стоит на столе

- ветошь (вату) сбросить в контейнер для отходов класса Б

- снять перчатки (правильно) и сбросить в контейнер для отходов класса Б

- гигиеническим методом обработать руки

- руки вытереть полотенцем и полотенцем закрыть кран.

Завершение работы

1. Выключить микроскоп и отключить от сети питания.

 2. Опустить столик, снять препарат, перевести револьвер на малое увеличение и очистить иммерсионный объектив от масла (сухой салфеткой, потом спиртовой и вновь сухой);

3. Протереть спиртовой салфеткой предметный столик. Салфетку (ветошь) сбросить в контейнер для отходов класса Б.

4. Надеть на микроскоп чехол

3. Стекло вытереть от иммерсии и отдать преподавателю

5. Обработать рабочее место

6. Снять перчатки и сбросить их в контейнер

7. Гигиеническим методом обработать руки

8. Высушить полотенцем

9. Кран закрыть этим же полотенцем

АЛГОРИТМЫ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ