Характеристика микоплазм птиц

Вид	Ферментация декстразы	Декарбоксилирование аргинина	ГА	Патогенность	Естественные хозяева
M. anatis	+	-	-	-	утки, гуси
M. gallisepticum	+	-	+	+	утки, куры, индейки
M. gallinarium	-	+	-	+	куры, утки
M. gallinaceum	+	-	-	E	куры
M. pullorum	+	-	-	+	куры
M. iners	-	+	-	E	куры, индейки
M. synovial	+	-	+	+S	индейки, утки
M. columbinasale	-	+	-	-	голуби
M. columbinuon	-	+	-	-	голуби
M. columborale	+	-	-	-	голуби
M. cloacale	?	?	?	?	утки
M. anseris	?	?	?	?	гуси

Примечание: а - гемагглютинация эритроцитов кур или индеек

в - символы патогенности

+ - обширный аэросаккулит у зараженных индеек

+ - слабый до умеренного аэросаккулит у зараженных индеек

 - - не патогенный для кур, индеек и уток

Е - перпатикулярные абсцессы у куриных эмбрионов

S - синовит у кур и индеек

? - неизвестно

Микоплазмы устойчивы к пенициллину (до концентрации 10000 ЕД/см³), ацетату таллия, но чувствительны к препаратам тетрациклинового ряда, мономицину (10-100 ЕД/см³), канамицину (400-2000 ЕД/см³), тилозину (0.004-1 мкг/см³) и другим антибиотикам.

Микоплазмы умеренно терморезистентны: в зависимости от видовой принадлежности могут развиваться при температуре от 180 до 42⁰С (оптимум - 38⁰С). При минус 20-65⁰С бульонные культуры сохраняют жизнеспособность до 12 месяцев, плюс 4-5⁰С - не более 95 суток. 10-минутная экспозиция при 60-70⁰С вызывает их гибель.

Микоплазмы сохраняются в лиофилизированном виде длительное время (до 5 лет).

Для микоплазм оптимальное значение рН варьирует в пределах 7,5-8,0. Они очень чувствительны к воздействию ультразвука – 30-минутная экспозиция при частоте в 9 кГц инактивирует до 90% клеток.

Гирин М.В., Борисов А.В. и др. (2002) изучали некоторые культуральные и антигенные свойства M. gollisepticum штаммов “R”, MGR“, A5969, “F и “S6”(ВГНКИ). Было установлено, что микоплазмы обладали характерными для них морфологическими и биохимическими свойствами, не требовали для роста НАД и цистеин, агглютинировали эритроциты кур. Наибольшая урожайность была отмечена у штамма “S6” в среде PPLO (основы –2,4%), глюкозы 0,5%, свиной сыворотки крови 12% и дрожжевого экстракта 10% при температуре 35-37⁰С и рН 7,4-8,2 с постоянным перемешиванием и аэрацией. M. gallisepticum чувствительны к растворам этиленимина и формальдегида; первый в концентрации 0,3, 0,15 и 0,08% устраняет жизнеспособность микоплазм к 8, 48 и 72 часу, тогда как формальдегид при 0,4, 0,2 и 0,1% - к 12, 20 и 72 часу, соответственно. Авторы определили, что для получения диагностического антигена необходимо применять формальдегид в концентрации 0,4%, а вакцинного антигена (иммуногена) - 0,3% этиленимин (АЭЭИ) при температуре 20-25⁰С в течение 12 и 8 часов, соответственно (2, 3, 6).

Микоплазмы подвержены действию вирусов. Вирионы имеют специфическую, полиэдрическую и палочковидную формы. Размер от 13 до 90 нм. ДНК-содержащие. Изолированные вирусы недостаточно изучены в плане патогенности для микоплазм уток.

По некоторым литературным данным, в организме утки могут персистировать и быть обнаружены сапрофитные микоплазмы.

Эпизоотологические данные. Болезнь наиболее распространена в странах с промышленным способом выращивания уток. К заболеванию восприимчивы утята до 3-недельного возраста. Источник возбудителя - больная птица и микоплазмоносители. Установлен трансовариальный путь передачи. Особенностью болезни является ее медленное распространение среди поголовья разновозрастных групп уток. Нередко этому способствуют повышенная плотность посадки, недостаточность воздухообмена в помещениях, некачественность кормления, наличие других инфекций. У уток маточного поголовья, особенно в начале яйцекладки, болезнь проявляется спорадически.

Естественными хозяевами M. synoviae и M. gallinarum признаны куры, индейки, гвинейские куры.

Серологические тесты (ИФА, фирмы KPL и СИНКО), проведенные во ВНИИЗЖ (2002 г.), показали высокий титр специфических антител (до 1:100) против M. synoviae в 58% пробах сывороток крови цесарок (гвинейских кур), обитающих в Башкортостане (личное сообщение Ирзы В.Н.).

Дополнительные исследования (авторы: Князев В.П., Ирза В.Н., Кременчугская С.Р. и др., 2002 г.) посредственно определили нахождение M. synoviae и M. gallinarum в организме уток 260-270-суточного возраста, принадлежащих ДППЗ «Благоварский», Республика Башкортостан РФ. С помощью непрямого ИФА (KPL, США) были выявлены специфические антитела в крови у 12% птицы в титрах от 1:1000 до 1:2500.

По другим сведениям M.anatis и M.gallisepticum, определены как наиболее постоянные представители микоплазм, выделяемые от уток. Bradbury et al. (1987) и Bencina D. et al. (1987) сообщили об изоляции от уток M.cloacale. Естественную (полевую) инфекцию, индуцированную M.gallisepticum, описали Jordan и Amin в 1980 году у взрослого поголовья уток (9, 10, 13, 14).

В экспериментальных условиях изоляты микоплазм, введенные в воздушные мешки 1-суточным утятам, провоцировали образование аэросаккулита без проявления внешних клинических признаков. Субклинически микоплазмоз протекает у 24- и 180-суточного возраста уток, инфицированных интраназально..

Bencina D. et al., 1988, впервые сообщили о природном инфицировании уток, содержащихся в прямом контакте с курами, и выделение от них M. gallisepticum, M. synoviae, M. anatis и M. cloacale. Эти возбудители также были выделены из утиных эмбрионов и неоплодотворенных утиных яиц, снесенных в первые четыре недели яйцекладки. У инфицированных уток отсутствовали клинические признаки, имеющие место у кур. В сыворотках крови уток, а также в двух желтках из 10 тестируемых утиных эмбрионов были обнаружены агглютинирующие антитела к M. gallinarum и M. synoviae. Титры антител в РЗГА в желтках утиных эмбрионов были выше (1:333), чем в утиных сыворотках (1:20) (9,10).

В гусиных стадах часто возникают болезни, вызываемые микоплазмозами. Инфекция, вызванная патогенными видами Mycoplasma, ведет к снижению продукции яиц, к гибели и серозитам эмбрионов. Было проведено 2 эксперимента. В первом 10 4-недельным утятам инокулировали смесь референтных штаммов M. anseris и M. sp. 1220. Десять неинфицированных птиц служили негативным контролем. Через 10 дней после начала эксперимента гусят вынужденно убили. Хотя клинические признаки болезни отсутствовали, при вскрытии у птиц обнаружили аэросаккулит и перитонит. От 8 из 10 инфицированных гусят были выделены микоплазмы. В сыворотках зараженных гусят обнаружены антитела методом Western блот. В отрицательном контроле микоплазмы не были выделены, а антитела отсутствовали(13, 16, 17).

Микоплазмоз нередко протекает в виде смешанной инфекции с колибактериозом, сальмонеллезом, гриппом, чумой, вирусным гепатитом и другими инфекциями. Результаты собственных исследований доказали возможность обнаружения микоплазм в утятах, павших от коронавирусной болезни (Московская область, 1992-1994 гг.).

Течение и симптомы болезни. Инкубационный период не установлен. Течение болезни хроническое. Больные утята могут проявлять признаки катарального ринита, синусита, конъюнктивита, присутствует затрудненное дыхание. У взрослых уток инфекция протекает бессимптомно, за исключением периода яйцекладки, когда у несушек наблюдают походку пингвина и увеличение нижней части брюшной полости (9, 11, 14).

Патологоанатомические изменения. Трупы могут быть истощены. У некоторых утят отмечают незначительную припухлость подглазничных синусов. В носовой полости содержится большое количество экссудата, слизистая оболочка покрасневшая. Стенки воздухоносных мешков помутневшие и утолщенные, в их полости находится серозный или серозно-фибринозный экссудат. Брюшная полость уток-несушек может содержать серозно-фибринозный экссудат. Фолликулы могут быть слабо связаны с яичником, в полости яйцевода фибринозная масса.

При смешанной инфекции с колибактериозом обнаруживают отложение фибринозных масс на перикарде, печени и брюшине (5, 11, 13).

При искусственном заражении взрослых yток некоторыми неидентифицированными изолятами микоплазм, а также M. anatis, возникает комплекс респираторных заболеваний с аналогичными патологоанатомическими изменениями, дополнительно отмечают гибель развивающихся эмбрионов с признаками аэросаккулита и катара респираторного тракта.

Патогенез. Сначала возбудитель локализуется на поверхности слизистых оболочек органов дыхания, затем проникает в клетки эпителия и подлежащие ткани, обуславливая, вероятно, дистрофические и воспалительные процессы. После деструктивных изменений в парабронхиальных тканях и кровеносных сосудах легких нарушается газовый обмен, и наступает некоторое общее расстройство организма утки.

Диагноз и дифференциальная диагностика. Диагноз на микоплазмоз устанавливают на основании результатов эпизоотологического обследования, проявления клинических признаков, патологоанатомических изменений и лабораторных исследований (6).

Для изоляции возбудителя используют пробы экссудатов органов больных, убитых уток в начальной стадии болезни не позднее 15 суток после заражения и не позднее 2-3 часов после их гибели, а также пробы желтка эмбрионов, предварительно инкубированных в течение 5 суток. Стерильно отобранные пробы материала хранят при температуре 4⁰С в течение 1-2 суток, минус 20-65°С - несколько недель. Желательно изоляцию микоплазм проводить из материалов уток, предварительно не обработанных антибиотиками и не содержащих в крови специфических антител к микоплазмам.

Для исключения контаминантов (бактерий, хламидий, грибов) надосадки 10-20% суспензий исследуемого материала фильтруют через фильтры с порами размером не более 450 нм (мембранные фильтры 3 и 4, Selas 02, Millipore HAWP 02500, 25, HA 045). Чтобы ограничить или полностью приостановить рост грамнегативных бактерий, в исследуемые пробы добавляют ацетат таллия, полимиксин В (100 ЕД/см³) или амфотерицин В (50мг/см³). Через 35-40 минут экспозиции при 18-20°С исследуемый материал, разведенный 1:10, вносят в специальные питательные среды, а также МПБ и МПА для контроля эффективности антибактериальной обработки. В связи с тем, что микоплазмы факультативные аэробы, посевы выдерживают в аэробных и анаэробных условиях, относительной влажности 70-80% и температуре 37-38°С в течение 5-20 суток. Для изоляции и культивирования используют многие питательные среды, в том числе среду из пептона Мартена, среду ВИЭВ, среду УНИИЭВ, среду Д. Эдварда, среду Турнер и другие, основой которых служит настой из сердечной мышцы животных, пептон Мартена, дрожжевой экстракт и сыворотка крови млекопитающих или птиц. После обнаружения типичных колоний их пересевают на жидкие или полужидкие питательные среды без ингибиторов. При отсутствии роста микоплазм на сывороточных средах проводят не менее восьми пассажей с 5-дневными интервалами на аналогичных средах, после чего дают заключение о результатах исследований.

Для изучения тинкториальных и морфологических свойств из культур микоплазм готовят отпечатки или мазки, которые после высушивания и фиксирования метиловым спиртом, ацетоном или спирт-эфиром в течение 10 минут окрашивают по методам Романовского-Гимзы или Грама. Они соответственно приобретают нежно-фиолетовый цвет или красный. Согласно другому методу, на вырезанные (под наблюдением в микроскоп) агаровые блоки с колониями микоплазм наносят несколько капель красителя Диенес, затем через несколько минут их промывают ЗФР рН 7,2-7,4 и просматривают под увеличением 7x40. Колонии микоплазм окрашиваются в синий цвет, тогда как колонии бактерий и грибов остаются бесцветными.

Микоплазмы уток обладают слабой ферментативной активностью. Большинство штаммов возбудителя не патогенно для белых мышей, кроликов, морских свинок и белых крыс. Поэтому для биологической пробы используют утят, утиные и куриные (СПФ) эмбрионы 6-9-суточной инкубации. У утят (разного возраста) после интратрахеального введения 0,2-0,3 см³ взвеси культуры микоплазм развивается болезнь хронического течения. Реизоляция возбудителя от больных и павших птиц подтверждает специфичность биологического теста.

Эмбрионы после заражения в желточный мешок, аллантоисную полость или на ХАО в объеме 0,2-0,3 см³ взвеси микоплазм обычно гибнут на 3-7 сутки после инфицирования. У них нередко отмечают карликовость и отечность, кровоизлияния под кожей шеи и головы, увеличение печени и селезенки, аэросаккулит. Видовую принадлежность выделенных культур микоплазм устанавливают серологическими реакциями: ингибицией роста, МФА, РЗГА, РДП и ПЦР.

Идентификацию микоплазм, выросших на агаре, проводят прямым ИФА с моноспецифическими иммуноглобулинами специфической антисыворотки кролика, конъюгированных тетраметилродаминизотиоционатом (TRITC). Конъюгат для распознавания Mycoplasma gallinarum и Mycoplasma synoviae применяют в разведении 1:10-1:20. Цвет светящихся колоний зеленый или красный, в зависимости от фильтров, используемых в световом микроскопе.

Для идентификации микоплазм других видов птиц пригодны как прямой, так и непрямой МФА.

Для определения микоплазм используют ПЦР с праймерами, комплементарными к геному 16S к РНК. Пара праймеров для выявления видов микоплазм человека и грызунов была способна определять наиболее важные микоплазмы птиц (M. iowae, M. meleagridis, M. synoviae). Для выявления M. gallisepticum необходимы специальные праймеры.

Диагностика. Для обнаружения специфических антител в сыворотке крови уток чаще используют пробирочный и пластинчатый варианты РГА, кровекапельную реакцию агглютинации, РЗГА и ИФА.

Выявление специфических антител в пробах сывороток крови уток и цыплят применяют реакцию задержки агглютинации на стекле с коммерческими антигенами микоплазм gallinarum или synoviae (фирм Nobilis и Intervet). РЗГА в микротесте выполняют с 4 ГАЕ M.gallinarum (штамм S6) и M. synovae (штамм WVU-1853).

Гирин М.В., Борисов А.В. (2002) разработали реакцию агглютинации для выявления антител к M. gallisepticum, которая по специфичности и чувствительности равнозначна РА других фирм, например, Intervet или ВНИВИП (1, 3, 5,, 6).

Микоплазмоз необходимо дифференцировать от хронических форм колибактериоза, пастереллеза, сальмонеллеза и гриппа.

Иммунитет. Не изучен.

Лечение. Информация о применении лекарственных веществ при микоплазмозе уток недостаточно полна. С лечебной целью при болезни кур и индеек используют антибиотики широкого спектра действия, которые назначают с водой и кормом. Нередко используют тилан (тартрат тилозина) в дозе 0,5 г на 1 литр воды, линкоспектин (0,5 г/л), галлимицин (содержащий эритромицин) в концентрации –0,125% (в воде) или 200 г на тонну корма, хлортетрациклин – 250-300 г/т или окситетрациклин – 250 мг/голову. Препараты задают в течение 3-5 суток. Фуразолидон в концентрации 0,03% в корме назначают в течение шести су­ток. Отмечено, что снижение дозы часто способствует появлению резистентных микоплазм.

Терапевтическую обработку необходимо проводить ежемесячно в период яйценоскости птицы. Установлено, что в конце яйценоскости инфицированность яиц микоплазмами снижается. Этот факт учитывают при сборе яиц для инкубации. Снижения зараженности яиц достигают путем их обработки растворами антибиотиков, как снаружи, так и путем введения в белок. Выведенный молодняк птицы выращивают изолированно и постоянно подвергают серологическому и микоплазмологическому исследованию. Применение некоторых методов с использованием антибиотиков позволяет получить поголовье птицы, во второй или третьей генерации свободных от возбудителя микоплазмоза.

Профилактика и меры борьбы. Профилактика включает недопущение ввоза уток и эмбрионов из хозяйств, неблагополучных по микоплазмозу. Затем, создание оптимальных условий содержания, полноценного кормления и размещения птицы в помещениях (8).

После выявления микоплазмоза в хозяйстве вводят ограничения, по условиям которых запрещается вывоз уток и эмбрионов в благополучные хозяйства, а также использование их для производства биологических препаратов. Разрешается убой уток для внутрихозяйственных целей или вывоз на мясоперерабатывающие комбинаты. Новые группы комплектуют здоровыми утятами, свободными от микоплазм.

В последние 30 лет во многих странах проведены разработки по получению вакцинных инактивированных препаратов для профилактики микоплазмоза многих видов птиц (кур, гусей, индеек, уток, цесарок и др.) против различных видов возбудителя (штаммов или изолятов) (1, 7).

Из смеси штаммов M. anseris и M. sp. 1220 были приготовлены 3 инактивированные вакцины с масляным адъювантом. Эти вакцины вводили 8-недельным гусятам, что индуцировало у них формирование иммунного ответа (17).

Гирин М.В., Борисов А.В. (2002) изготовили инактивированную вакцину на основе M. gallisepticum штамм S6, выращенной в модифицированной среде и инактивированной этиленимином с добавлением масляного адъюванта «Montanide ISA-70». Вакцина вызывала иммунный ответ на 28 сутки длительностью не менее 6 месяцев (срок наблюдения) и не уступала по эффективности зарубежному аналогу “MG-Vac” фирмы “Merial”, Франция (1, 4, 6,7, 8).

Во ВНИВИП и ФГУ ВНИИЗЖ выпускают вакцину, инактивированную сорбированную против респираторного микоплазмоза птиц (кур).

Профилактика. Специфическая прфилактика не разработана.

Перед размещением новых партий уток в помещениях проводят тщательную механическую очистку и дезинфекцию. Постоянно проводят диагностику микоплазмоза и других инфекций.

После прекращения регистрации болезни и получения отрицательных результатов лабораторных исследований хозяйство считается благополучным. НПП «АВИВАК» (2009г.) производит вакцину против респираторного микоплазмоза птиц (кур), инактивированную эмульсионную из штамма S 6 М. галлисептикум. Вакцина вызывает иммунитет через 21 – 28 суток, который сохраняется не менее 6 месяцев.

 

 Список литературы

1. Антигенные и реактогенные свойства инактивированной вакцины против респираторного микоплазмоза птиц с различными адъювантами / М.В. Гирин, А.В. Борисов, В.В. Борисов [и др.] // Соврем, вопр. вет. медицины и биологии: cб. науч. тр. по матер. 1 Междунар. конф. - Уфа, 2000. -С. 94-97.
2. Измерение роста Mycoplasma gallisepticum / М.В. Гирин, А.В. Борисов, В.Ю. Кулаков [и др.]  // Достижения молодых ученых - в вет. практику (Матер. конф. молодых ученых). - Владимир, 2000. - С. 38-42.
3. Изучение влияния на рост Mycoplasma gallisepticum свиной и лошадиной сыворотки крови / М.В. Гирин, А.В. Борисов, М.И. Сорокина, В.Н. Ирза // Достижения молодых ученых - в вет. практику (Матер. конф. молодых ученых). - Владимир, 2000. -С. 42-45.
4. Испытание в условиях птицехозяйства на цыплятах-бройлерах живой вакцины против респираторного микоплазмоза птиц "Intervet Nobilis 6/85" / М.В. Гирин, А.В. Борисов, В.Н. Ирза, О.Н. Алиева // Достижения молодых ученых - в вет. практику (Матер. конф. молодых ученых). - Владимир, 2000. - С. 101-105.
5. Микоплазмы в патологии животных / под ред. Коромыслова Г.Ф. [и др.]. - М.: Агропромиздат, 1987. – 236 с.
6. Некоторые сведения по эпизоотологии и диагностике микоплазмозов / А.В. Борисов, В.Н. Ирза, М.В. Гирин [и др.] // Матер. IVрегион. конф. «Золотое кольцо России». - Владимир, 2001. - С. 73.
7. Определение антигенной активности и безвредности экспериментальной инактивированной вакцины против респираторного микоплазмоза птиц / М.В. Гирин, А.В. Борисов, В.В. Борисов [и др.] // Соврем. вопр. вет. медицины и биологии: cб. науч. тр. по матер. 1 Междунар. конф. - Уфа, 2000. - С. 97-99.
8. Поиски подхода к борьбе с респираторными микоплазмозами в птицеводческих хозяйствах / В.Н. Ирза, А.В. Борисов, В.В. Борисов // Матер. IV регион. конф. «Золотое кольцо России». – Владимир, 2001. - С. 74-75.
9. Bencina, D. Natural infection of ducks with mycoplasma synoviae and mycoplasma gallisepticum and mycoplasma egg transmission / D. Bencina, Т. Tadina, D. Dorrer // Avian Pathol. - 1988. - Vol. 17, N 2. - P. 441-449.
10. Вепсinа, D. Natural infection of geese with Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae and egg transmission of the mycoplasmas / D. Вепсinа, Т. Tadina, D. Dorrer // Avian Pathol. - 1988. - Vol. 17, N 4. - P. 925 - 928.
11. Biochemical and serological study of two Mycoplasma strains isolated from geese / Z. Varga, L. Stipkovits, M. Dobos-Kovacs, G. Czifra // Arch. Exp. Veterinarmed. - 1989. - Vol. 43, N 5. - P. 733-736.
12. Detection and identification of avian mycoplasmas by polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism assay / I. Kiss, K. Matiz, E. Kaszanyitzky [et al.] // 11^th Int. Congr. World Vet. Poultry Assoc. - Budapest, Hungary, 1997. - P. 280.
13. Mycoplasma anseris sp. nov. found in geese / J.M. Bradbury, F.T.W. Jordan, T. Shimizu [et a.l] // Int. J. Syst. Bactreriol. - 1988. - Vol. 38. - P. 74-76.
14. Mycoplasma imitans sp. nov. is related to Mycoplasma gallisepticum and found in birds / J.M. Bradbury, O.M. Abdul-Wahab, C.A. Yavari [et al.] // Int. J. Syst. Bactreriol. – 1993.- Vol. 43. - P. 721-728.
15. Mycoplasma infection of ducks. 1. Incidence of mycoplasmas, acholeplasmas and associated E. coli and fungi in Upper Egypt / A.A. EI-Ebeedy, I. Sokar, A. Soliman [ et al.] // Israel J. Med. Sci. - 1987. - Vol. 23. - P. 529.
16. Onunkwo, O. Serological survey mycoplasmosis and pullorum disease in Plateau state of Nigeria / O. Onunkwo, О. Onoviran // Kenya Veterinarian. – 1978. - N 2. - P. 33-34.
17. Tomczyk, G. Occurrence of mycoplamas infection in polish geese flocks / G. Tomczyk, Z. Minta // 11^th Int. Congr. World Vet. Poultry Assoc. - Budapest, Hungary, 1997. - P. 284.
18. Western blot examination of sera from mycoplasma - infected and vaccinated goslings / F. Katalin, Н. Ellakany, I. Nemeth [e. a.] // 11^th Int. Congr. World Vet. Poultry Assoc. - Budapest, Hungary, 1997. - P. 279.

 

 

НЕЙССЕРИОЗ

Нейссериоз гусей - болезнь, характеризующаяся воспалением половых органов, снижением функций воспроизводства, оплодотворяемости яиц и жизнеспособности потомства.

Историческая справка. Болезнь впервые зарегистрирована в Венгрии в 1970 году (Раtау,1971; Szep, 1973; Pataky Nadu,1973), затем в Чехословакии в 1977 году. Латвийской ССР (Контримавичус Л.М., 1971-1973), Омской и Курганской областях СССР (Наливайко Л.И., 1978-1980). Наливайко Л.И. в 1978 году воспроизвел болезнь в экспериментальных условиях на утках (1, 2).

Экономический ущерб. Определен выбраковкой больных гусей, низким уровнем (до 20%) оплодотворяемости яиц, недополучением молодняка из-за снижения выводимости до 42%, а также затратами на мероприятия по оздоровлению поголовья птицы (1).

Возбудитель. Нейссерии относятся к роду Neisseria семейства Neisseriaceae. Бактерии имеют форму кокков, диплококков, объединеных нередко в тетрады. Капсул и спор не образуют, неподвижны. Нейссерии в пробах патологического материала морфологически не отличаются от таковых, выращенных в культуре. Окрашиваются 1% раствором метиленовой сини и отрицательно по Граму. В старых культурах некоторые клетки окрашиваются грамположительно (1, 2, 3).

Биохимические свойства. Бактерии из рода Neisseria каталазоположительные и, в основном, оксидазоположительные. Являются строгими аэробами. Редуцируют нитраты. Не продуцируют ни индол, ни сероводород. Некоторые штаммы являются гемолитиками.

Род Neisseria включает несколько видов патогенных для человека бактерий, в том числе:

N. gonorrhoeae и N. intracellularis;

N. gonorrhoeae (гонококк) - оксидазоположительная, глюкозоположительная с образованием газа, мальтозоотрицательная. Не деградирует ни нитраты, ни нитриты;

N. intracellularis (менингококк) – мальтозоположительный;

N. гусей. Выделенные на Украине изоляты Б-1 и Б-2; они образовывали сероводород и газ, редуцировали нитраты и нитриты, являлись католазо - и оксидазоположительными. Росли на питательных средах при 22 С, а также при 37 С без углекислого газа и в его присутствии.

Нейссерии растут на специальных плотных питательных средах, обогащенных кровью, асцитной жидкостью или сывороткой. В специальную среду Тайера и Мартина добавляют шоколад для сдерживания роста бактерий - комменсалов. Выделенные колонии нейссерии растут в атмосфере с 10% углекислого газа при рН 7,4-7,6 и температуре 35-37°С (не ниже З0 С).

Наливайко Л.И. на территории Украины для изоляции штаммов нейссерии Б-1 и Б-2 использовал твердые обогащенные сывороткой среды - агар Хоттингера и картофельный агар. Было отмечено образование крупных голубовато-серых колоний через 24-48 часов после высева проб слизи и соскобов со слизистой оболочки половых органов гусей. Через 24 часа некоторые колонии обесцвечивались и становились прозрачными. На кровяном агаре бактерии гемолиз не вызывали. Штаммы Б-1 и Б-2 размножались в КЭ 7-9-, ГЭ 10-12-, и УЭ 9-10- суточной инкубации с последующей индукцией 100% гибели. Активность обоих штаммов для эмбрионов различных видов птиц варьировала от 109.6 – 1010.6 ЭЛД50/О, 2 см³ Тело павших эмбрионов было гиперемировано, желток разжижен с образованием беловатых хлопьев (1, 2).

Гусиные эмбрионы 20-суточной инкубации не гибли от введения в аллантоисную полость 2 млрд. клеток нейссерий.

После введения прогретой при 80°С в течение 30 минут культуры выделенных бактерий гибель эмбрионов разных видов птиц не наблюдали, что свидетельствует об отсутствии эндо- и экзотоксинов нейссерий. Это подтверждает версию о гибели эмбрионов от активного размножения бактерий.

Наливайко Л.И. с помощью перекрестной РПГА с выделенными от гусей бактериями и сыворотками против N. gonorrhoeae и сапрофита N. perflava подтвердил принадлежность выделенного агента к семейству Neisseriaceae и его антигенное родство к вышеназванным штаммам.

Известно, что у нейссерий, в том числе N. gonorrhoeae, выявлены 4 групповые (А1, В1, В2 и С), а также типовые (Д, Е, F, G) антигены, обладающие комплементсвязывающей активностью.

Эпизоотологические данные. К нейссериозу восприимчивы гуси, но заболевание не имеет широкого распространения среди этого вида птицы. Куры, петухи и индейки устойчивы к заболеванию. В экспериментальных условиях болезнь воспроизведена на утках. Наливайко Л.И. выявил идентичность проявления болезни у гусей и уток. Переболевшая птица длительное время остается бактерионосителем.

Течение и симптомы. Инкубационный период продолжается до 20 суток. У гусей и уток болезнь протекает в острой и хронической формах. При острой форме птица угнетена, мало потребляет корм. У гусаков и селезней отмечают воспаление слизистой оболочки полового органа, отек, гиперемию и эрозии, а также наличие желтовато-зеленоватой слизи.

При хронической форме образуются фибринозные струпья, после удаления которых остаются кровоточащие язвы. В дальнейшем в патологический процесс вовлекаются окружающие ткани, развивается склероз стенок клоаки и полового органа с последующей их деформацией. 0т больных гусынь получают эмбрионы с 50%-ной неоплодотворенностью. Количество замерших эмбрионов составляет 20%, задохликов - до 10, а выводимость - до 19%. Из желтка в 3-17% случаев можно изолировать нейссерии.

Патогенез. Не изучен.

Патологоанатомические изменения. Происходит нарушение эпителия, отложения фибрина на слизистой оболочке, склероз тканей и деформация половых органов.

Диагноз и дифференциальная диагностика. Диагностика нейссериоза основывается на эпизоотологических данных, наличии клинических симптомов и патологоанатомических изменений, а также на результатах микробиологических исследований. Для микроскопических исследований отбирают пробы слизи и содержимое язв на слизистой оболочке половых органов, окраску фиксированных мазков-отпечатков проводят по Граму или 1% раствором метиленовой сини. Обнаружение грамотрицательных диплококков указывает на принадлежность микроорганизма к семейству Neisseriaceae.

Высев проб исследуемого материала на специальные плотные питательные среды, заражение эмбрионов птиц и лабораторных живитных позволяет определить степень патогенности выделенного агента. Следует отметить, что N. gonorrhoeae (гонококк), патогенная исключительно для человека, в экспериментальных условиях вызывает перитонит и часто гибель у морских свинок, мышей и кроликов. Патогенность нейссерий гусей для человека и лабораторных животных не установлена (1, 2, 3).

Нейссерии гусей необходимо дифференцировать от комменсалов - N. flava, N. perflava и N.subf lava, которые часто изолируют при ринофарингитах и поражениях слизистой оболочки гениталий человека. Последние образуют пигментированные колонии и обладают активностью к различным углеводам. Для серологической диагностики гонореи человека применяют РСК, РПГА и непрямой МФА. Вероятно данные методы могут быть применены для выявления специфического антигена нейссерий гусей(1, 2).

Иммунитет. Не изучен.

Лечение. Отдельно выделенный изолят нейссерий обладает индивидуальной чувствительностью к антибиотикам. Для выявления эффективных препаратов проводят антибиограмму на специальных плотных питательных средах с применением дисков, содержащих пенициллин, тетрациклин, канамицин, линкомицин, стрептомицин, тиофеникол, сульфадиазин и др. Результаты учитывают через 24-48 часов.

Профилактика и меры борьбы. Информация о специфической профилактике нейссериоза гусей и уток отсутствует. В хозяйствах проводят осмотр гусей-производителей. После подтверждения бактериологическими исследованиями птицу с клиническими признаками нейсериоза, а также бактерионосителей, выбраковывают.

Список литературы

1. Наливайко, Л.И. Нейcсериоз гусей / Л.И. Наливайко // Науч.-тех. бюл. Харьков - 1982. - С. 39-42.

2. Наливайко, Л.И. О некоторых свойствах микроорганизмов рода Нейссерия, выделенных у гусей / Л.И. Наливайко // Науч.-тех. бюл. Харьков.- № 9. - С. 40-43.

3. Protective activity of monoclonal antibodies to genome-derived neisserial antigen 1870, a Neisseria meningitidis candidate vaccine / J.A. Welch, R. Rossi, M. Comanducci, D.M. Granoff // J. Immunol. – 2004. – V. 172, N 9. – P. 5606-5615.

 

НЕКРОТИЧЕСКИЙ ЭНТЕРИТ

Некротический энтерит – болезнь, главным образом, племенных уток в период яйцекладки. Она поражает отдельных особей или группы птиц. Болезнь обычно протекает в острой форме, а уток-несушек нередко находят внезапно павшими.

При посмертном исследовании подкожный и внутренний жир по цвету имеет розоватый оттенок. Яичник внешне нормальный, а в яйцеводе может находиться яйцо. Кишечник выглядит атипично - розовый и раздутый, или, редко, в пределах нормы. В просвете тонкого кишечника можно обнаружить некротические хлопья коричневого цвета, особенно в месте перехода его в слепой отдел.

При поиске возбудителя, кроме постоянно присутствующих в кишечнике простейших, E. coli и других комменсалов, нередко изолируют Clostridium perfringes.

Предполагают, что основной причиной возникновения некротического энтерита является внезапное изменение качества и количества корма. Улучшение рациона заметно снижает количество заболевших и павших уток.

Дополнительно рекомендуется проводить антибактериальную обработку корма и воды, предназначенных для птицы данного возраста.

Список литератур ы

 

1. Leibovitz, L. Necrotic enteritis of breeder ducks / L. Leibovitz // Am. J. Vet. Res. – 1973. – Vol. 34, N 8. – P. 1053-1061.

2.

 

НЕОПЛАЗИЯ

Неоплазия вирусной или неизвестной этиологии встречается у уток чрезвычайно редко.

Список литературы

1. Rigdon, R.H. Spontaneous-occurring tumors in the duck: review of the literature and report of three cases / R.H. Rigdon, L. Leibovitz // Avian Dis. – 1970. – Vol. 14, N 3. – P. 431-444.

 

 

ПАРАМИКСОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ

 

Па­ра­мик­со­ви­рус­ная ин­фек­ция- кон­та­ги­оз­ная бо­лезнь, ха­рак­те­ри­зую­щая­ся дли­тель­ным ла­тент­ным ви­ру­со­но­си­тель­ст­вом и ин­дук­ци­ей спе­ци­фи­че­ских ан­ти­тел к воз­бу­ди­те­лю.

Ис­то­ри­че­ская справ­ка. Ин­фек­ция об­ла­да­ет гло­баль­ным рас­про­стра­не­ни­ем. Воз­бу­ди­тель - па­ра­мик­со­ви­рус (ПМВ) изо­ли­ро­ван от уток в раз­ных стра­нах ми­ра. На­при­мер, ПМВ 1 вы­де­лен от боль­шин­ст­ва ви­дов уток, в том чис­ле до­маш­него со­дер­жа­ния пти­цы, а так­же 50 ви­дов пе­ре­лет­ной ди­кой фау­ны, ПМВ 2 - то­же от раз­ных ви­дов птиц (СССР) и крякв в Из­раи­ле, ПМВ3 - от во­до­пла­ваю­щей пти­цы в Бал­тий­ском мо­ре, Ат­лан­ти­че­ском и Ти­хом океа­нах, ПМВ 4 - в Гон­кон­ге от уток, гу­сей и дру­гих ви­дов (1975), ПМВ 6 - из проб фе­ка­лий уток в Ка­на­де, Япо­нии, Че­хо­сло­ва­кии (1977) и Фран­ции (1987), ПМВ 8 - от ка­над­ских гу­сей в Ат­лан­ти­че­ском (1976) и Ти­хом океа­нах, а так­же се­рой ут­ки в Япо­нии (1981), ПМВ 9 - в 1978 го­ду изо­ли­ро­ван от до­маш­ней пе­кин­ской ут­ки в Лонг-Айленде (7, 11, 12, 13).

       Эко­но­ми­че­ский ущерб. Ут­ки оп­ре­де­ле­ны как ос­нов­ной ис­точ­ник ПМВ. Наи­бо­лее опа­сен и на­но­сит гро­мад­ный эко­но­ми­че­ский ущерб - ПМВ 1 - воз­бу­ди­тель нью­касл­ской бо­лез­ни. Он спо­со­бен вы­зы­вать мас­со­вую ги­бель кур, дру­гих птиц, но­рок, а так­же бо­лезнь лю­дей с при­зна­ка­ми конъ­юнк­ти­ви­та. ПМВ 2 то­же ин­ду­ци­ру­ет па­то­ло­гию в ор­га­низ­ме птиц, опи­сан­ную как бо­лезнь "Юкей­па" (3).

       Воз­бу­ди­тель. Па­ра­мик­со­ви­рус (Paramixovirus), от­но­сит­ся к ро­ду Paramixovirus, подсемейства Paramixovirinae семейства Paramixoviridae порядка Mononegavirales. В на­стоя­щее вре­мя из­вест­но де­вять се­ро­ло­ги­че­ских ти­пов па­ра­мик­со­ви­ру­са. По ак­тив­но­сти ге­магг­лю­ти­ни­на и ней­тра­ми­ни­да­зы раз­де­ле­ны на две груп­пы: к пер­вой от­но­сят­ся ПМВ 2 и 6, вто­рой - 1; 3; 4; 5; 7; 8 и 9. Ре­зуль­та­ты по РЗГА и ре­ак­ции ин­ги­би­ции ней­тра­ми­ни­даз­ной ак­тив­но­сти по­ка­за­ли взаи­мо­связь ме­ж­ду ПМВ 1 и 3, ПМВ 2 и 6, ПМВ 1 и 4, ПМВ 8 и 9, ПМВ 3 и 7, что свя­за­но с из­ме­не­ния­ми в ан­ти­ген­ных уча­ст­ках гли­ко­про­теи­да ви­ру­са. Чет­вер­тый, 6 и 9 се­ро­ти­пы ПМВ, впер­вые изо­ли­ро­ван­ные от уток, при­зна­ны эта­лон­ны­ми - ПМВ 4/ут­ка/Гон­конг/Д3/75, ПМВ 6/ут­ка/Гон­конг/199/77 и ПМВ 9/ут­ка/Нью-Йорк/22/78. Бо­лее тща­тель­но изу­чен ПМВ 1 - воз­бу­ди­тель бо­лез­ни Нью­кас­ла.

       Ви­рус - РНК-со­дер­жа­щий, об­ла­да­ет по­ли­мор­физ­мом. На по­верх­но­сти оболочки рас­по­ло­же­ны вы­сту­пы или ни­ти дли­ной 8 нм. Раз­мер ви­рио­нов от 120 до 300 нм. ПМВ со­дер­жит ге­магг­лю­ти­нин, ней­ра­ми­ни­да­зу, ге­мо­ли­зин, син­ти­ций­фор­ми­рую­щий фак­тор, РНК-за­ви­си­мую РНК-по­ли­ме­ра­зу. Об­ла­да­ет ге­мад­сор­би­рую­щим, ток­си­че­ским, ге­магг­лю­ти­ни­рую­щим, ге­мо­ли­ти­че­ским и ин­тер­фе­ро­нин­ду­ци­рую­щим свой­ст­ва­ми. Ус­та­нов­ле­на об­рат­ная кор­ре­ля­ция ме­ж­ду ви­ру­лент­но­стью и ней­ра­ми­ни­даз­ной ак­тив­но­стью штам­мов. Ус­той­чив к pH в диа­па­зо­не от 2 до 10. На­гре­ва­ние при 55-75^оС в те­че­ние 30 ми­нут уст­ра­ня­ет ин­фек­ци­он­ность ви­ру­са, его ге­магг­лю­ти­ни­рую­щие и им­му­но­ген­ные свой­ст­ва. Ви­ру­лент­ность штам­мов не кор­ре­ли­ру­ет с тер­мо­ста­биль­но­стью ге­магг­лю­ти­ни­на. Ки­пя­че­ние, ульт­ра­звук и ульт­ра­фио­ле­то­вый свет инак­ти­ви­ру­ют ПМВ че­рез не­сколь­ко се­кунд. Ус­та­нов­ле­но, что ге­магг­лю­ти­ни­рую­щие свой­ст­ва ви­ру­са по­сле воз­дей­ст­вия фи­зи­че­ских фак­то­ров со­хра­ня­ют­ся бо­лее дли­тель­ное вре­мя, чем ин­фек­ци­он­ные (9).

       Чув­ст­ви­те­лен к воз­дей­ст­вию эфи­ра и хло­ро­фор­ма. Де­зин­фек­тан­ты - 1-2% рас­тво­ры фор­ма­ли­на и гид­ро­оки­си на­трия, а так­же 3-4% рас­твор фе­но­ла - уст­ра­ня­ют его ин­фек­ци­он­ность в те­че­ние 3 ча­сов.

       Для куль­ти­ви­ро­ва­ния ви­ру­са ис­поль­зу­ют КЭ (СПФ) и чув­ст­ви­тель­ные, для кон­крет­но­го се­ро­ти­па (или штам­ма), ви­ды птиц.

       Мак­си­маль­ное на­ко­п­ле­ние ПМВ про­ис­хо­дит в ал­лан­то­ис­ной по­лос­ти эм­брио­на: по­сле нескольких пас­са­жей ин­фек­ци­он­ный титр может со­став­лять 4-11 lg ЭЛД₅₀/0,2 см³, ге­магг­лю­ти­ни­рую­щий - до 1:10240. При­ня­то счи­тать, что од­на ге­магг­лю­ти­ни­рую­щая еди­ни­ца рав­на 100­000 ин­фицирующих доз.

       У раз­ных ви­дов птиц, в том чис­ле уток, ПМВ ин­ду­ци­ру­ет вы­ра­бот­ку ан­ти­ге­магг­лю­ти­ни­рую­щих, ком­пле­мен­тс­вя­зы­ваю­щих, пре­ци­пи­ти­рую­щих, ви­рус­нейт­ра­ли­зую­щих, ин­ги­би­рую­щих ней­ра­ми­ни­даз­ную ак­тив­ность и вы­яв­ляе­мые им­мун­но­фер­мент­ным тес­том ан­ти­те­ла, со­дер­жа­щие­ся в сы­во­рот­ке кро­ви.

       Ут­ки ус­той­чи­вы к заболеванию па­ра­мик­со­ви­ру­са­ми. Од­на­ко воз­мож­ны еди­нич­ные слу­чаи за­бо­ле­ва­ния бо­лез­нью Нью­кас­ла при со­вме­ст­ном их со­дер­жа­нии с ку­ра­ми (в ли­те­ра­тур­ном ис­точ­ни­ке бо­лезнь уток не опи­са­на) (5). До­маш­ние и ди­кие ут­ки об­ла­да­ют по­сто­ян­ным ви­ру­со­но­си­тель­ст­вом мно­гих се­ро­ти­пов ПМВ, пер­ма­нент­но вы­де­ляе­мы