Возбудители ОРВИ. Характеристика вируса гриппа, методы диагностики, иммунопрофилактика, этиотропная терапия заболевания

Семейство ортомиксовирусов – это РНК-содержащие вирусы со спиральным типом симметрии нуклеокапсида, имеющие суперкапсидную оболочку, содержащую липиды, в связи с чем они чувствительны к эфиру. Белки суперкапсидной оболочки имеют сродство к муцину.К этому семейству относится вирус гриппа. У него одноцепочечная фрагментированная РНК, состоящая из 8 фрагментов, что обуславливает дрейф генов и большую антигенную вариабельность вируса. РНК представлена “минус-нитью”, поэтому у вируса есть особый геномный белок - РНК-зависимая РНК-полимераза, которая нужна для построения репликативной формой РНК “плюс-нити”, выполняющей функцию и-РНК. Это необходимо для синтеза вирусных белков в клетке. С нуклеопротеидом вируса связаны еще 2 геномных фермента – эндонуклеаза и репликаза, участвующие в репродукции вируса в

клетке.Форма вириона вариабельна, чаще сферическая (могут быть нитевые формы), размеры 80-120 нм. Капсидная оболочка построена из простых белков, способных к самосборке. В ее состав входит M-белок, который сверху покрывает двухслойная липидная мембрана с гликопротеидными шипами суперкапсидной оболочки. Эти гликопротеидные шипы - ферменты гемагглютинин и нейраминидаза, связанные с суперкапсидной оболочкой. Гемагглютинин распознает мукопептидные рецепторы чувствительных клеток, содержащие N-ацетилнейраминовую кислоту, обеспечивает адсорбцию вируса на клетке. Нейраминидаза обуславливает проникновение вируса в клетку, отщепляя сиаловые кислоты, входящие в мембрану клетки.Антигены вируса гриппа. Глубокий антиген капсидной оболочки связан с белком рибонуклеопротеида и M-белком. По строению этого антигена различают вирус гриппа типа А, В и С. Поверхностные антигены суперкапсидной оболочки - антигены гемагглютинина (H) и нейраминидазы (N) - вариантспецифические. Они более вариабельны: у вируса гриппа А различают 13 сероваров по антигену гемагглютинина /H-АГ/ и 10 сероваров по антигену нейраминидазы /N-АГ/. Так, у вируса гриппа А наибольшее распространение имеют гемагглютинины H1-3 и нейраминидазы N1-2. H-антиген вируса гриппа рассматривают как протективный антиген.Вирус гриппа В имеет сходное строение с вирусом гриппа А, отличаясь только глубоким антигеном. Его геном также содержит минус-нитевую РНК, состоящую из 8 фрагментов, кодирующих 3 неструктурных белка (геномные ферменты) и 7 структурных оболочечных белков.Различают несколько сероваров по H- и N-антигенам, но антигенный дрейф выражен слабее.Вирус гриппа С отличается не только антигенами, но и некоторыми другими признаками: у него 7 фрагментов РНК, нуклеотидные последовательности в которых отличаются от таковых у вируса гриппа А и B; в геноме закодировано 2 неструктурных белка и 6 структурных, отсутствует нейраминидаза. Клеточные мукопептидные рецепторы к вирусу С имеют иное строение, чем клеточные рецепторы к вирусам А и B. Антигенный дрейф не выражен.Вирус гриппа хорошо размножается в культурах тканей и курином эмбрионе (амниотической и аллантоисной оболочках). Из культур тканей оптимальной для репродукции вируса является культура клеток почек эмбриона человека. Цитопатическое действие выражено слабо и не во всех культурах тканей. Вирус гриппа С труднее адаптируется к куриному эмбриону, лучше культивируется при температуре 32-33С.

Эпидемиология и патогенез гриппа.

Грипп - это острая респираторная вирусная инфекция, имеющая тенденции к распространению в человеческой популяции в виде эпидемий с характерной сезонностью и даже пандемий.Вирус гриппа А поражает человека и некоторые виды животных (лошадей, свиней, птиц), а вирусы гриппа B и C только людей. Источником инфекции для человека являются больные люди, путь заражения - воздушно-капельный. Эпидемические вспышки наблюдаются в зимнее время и каждые 10 лет могут перерастать в пандемии. Особенно это характерно для вируса гриппа А, в то время как вирус гриппа B чаще вызывает эндемические, локальные вспышки, а для вируса гриппа С регистрируются лишь спорадические случаи заболевания.Одна из самых тяжелых пандемий гриппа, получившая название «испанки», разразилась в 1918г. и унесла 20 млн. жизней. Ответственен за нее был вирус гриппа А (HsN1). Азиатская пандемия 1957 г. была вызвана вирусом гриппа А (H2N2) и охватила 2 млрд. человек, а тяжелая эпидемия, начавшаяся в Гонконге в 1968г., - вирусом гриппа А (H3N2).В организме человека основное место локализации вируса - дыхательный

эпителий трахеи, бронхов, бронхиол и альвеолы. За счет гемагглютинина вирус гриппа адсорбируется на гликопротеиновых рецепторах эпителиальных клеток нижних отделов дыхательного тракта и с помощью нейраминидазы проникает в клетку путем эндоцитоза. В фагосоме идет частичное раздевание вируса, а окончательное происходит у ядра пораженной клетки. В ядре клетки идут процессы репликации и транскрипции вирусных нуклеиновых кислот с участием геномных ферментов самого вируса, т.к. его РНК, являясь минус-нитевой молекулой, служит лишь матрицей для построения и-РНК за счет вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразы. Вирусная эндонуклеаза, формируя модифицированный конец вирусной и-РНК - шапочку (сap), откусывает его от клеточной и-РНК, после чего происходит транскрипция и становится возможным синтез вирусных белков в рибосомах клетки. Окончательное формирование вириона идет на внутренней клеточной мембране после трансляции вирусных белков. Углеводные и липидные компоненты своей суперкапсидной оболочки вирус захватывает из мембраны клетки, когда выходит из нее путем почкования. Из-за повреждения мембран эпителиоцитов под действием нейраминидазы вируса гриппа образуются эрозии на слизистой дыхательных путей. Через эрозированную поверхность вирус попадает в кровь, развивается вирусемия, сопровождающаяся высокой температурой, болями в мышцах и костях, явлениями интоксикации, обусловленными попаданием в кровь продуктов клеточного распада. Инкубационный период короткий - 1-2 суток.Возможны очень тяжелые формы гриппа (“токсические”) с развитием отека легкого при нарушении проницаемости сосудов под действием нейраминидазы. Часто присоединяются бактериальные инфекции, что связано с повреждающим действием вируса на лимфоциты в лимфоузлах и созданием условий развития вторичных иммунодефицитов.Иммунитет переболевших вариантспецифический.

Методы микробиологической диагностики гриппа.

Материалом для исследования чаще всего служит носоглоточный и бронхиальный смывы, иногда кровь. Могут быть использованы следующие методы:

--вирусологический - из исследуемого материала вирус выделяют при заражении куриного эмбриона и культуры ткани почек эмбрионов человека с последующей идентификацией в РТГА сероваров и в РСК типов вируса гриппа;

-- иммуноиндикация - антигены вируса обнаруживают в исследуемом материале - носоглоточном, бронхиальном смывах - с помощью РТГА и ИФА или РИФ в мазках-отпечатках из эпителиальных клеток слизистой оболочки носоглотки;

-- серологический - методом РТГА, РСК, ИФА определяют наличие инфекционных антител в парных сыворотках больного по нарастанию их титра. С помощью ИФА определяют и титр секреторных иммуноглобулинов А в носоглоточных смывах; - методы генетического анализа - разработаны РНК-зонды, использование которых позволяет обнаружить нуклеотидные последовательности вируса в исследуемом материале.

Этиотропная терапия гриппа

В терапии гриппа используют противовирусные средства этиотропной химиотерапии, а также препараты интерферона и иммунотерапии. Антибиотики используют только для профилактики бактериальных осложнений, т.к. сами вирусы не являются мишенями для действия этих химиопрепаратов.Среди химиотерапевтических средств с противовирусной активностью в лечении гриппа используют ремантадин и его аналоги, арбидол. Эти препараты препятствуют попаданию вируса гриппа в клетку и его депротеинизации.В первые дни болезни можно назначить противогриппозный гамма-глобулин, в более поздние сроки он не действует, т.к. все вирусы находятся внутри клеток.В начале заболевания и в более поздние сроки можно назначать препараты интерферона, который действует и на внутриклеточный вирус, препятствуя синтезу нуклеиновых кислот и белков вирусов. На практике используют лейкоцитарный интерферон и интерфероногены, например неовир, а также препараты генноинженерных интерферонов, например, реальдерон.

Иммунопрофилактика гриппа.

Разработаны средства активной и пассивной иммунопрофилактики гриппа.Активная иммунопрофилактика проводится живыми, убитыми и химическими гриппозными вакцинами. Предпочтение отдают живым вакцинам, т.к. они активируют не только гуморальный, но и клеточный иммунный ответ, синтез интерферона, а также обеспечивают развитие механизма вирусной интерференции. В настоящее время в России используются живая аттенуированная вакцина, убитая цельновирионная и химические (субвирионные и субъединичные), приготовленные из H- и N-антигенов вируса гриппа. Последние обладают наименьшей реактогенностью и рекомендуются для вакцинации по эпидемиологическим показаниям детей в возрасте от 6 месяцев до 12 лет.Пассивная иммунопрофилактика гриппа возможна в очагах инфекции. Для ее целей могут использовать противогриппозный гамма-глобулин, противогриппозную сыворотку типа А1, А2. В с сульфаниламидами (вводят в носовые ходы, чтобы местно создать высокий титр антител). Пассивная иммунопрофилактика донорским иммуноглобулином назначается контактным лицам не позднее 7-го дня.