Произведите последовательное двукратное разведение сыворотки крови для серологической реакции.

Испытуемый материал (сыворотка крови или любая другая биологическая жидкость, содержащая антитела) предварительно инактивируют при 56°С в течение 30 мин. На изотоническом растворе хлорида натрия подготавливают двукратные разведения испытуемой сыворотки, начиная с 1:10 (1:20, 1:40 и т. д.), и свежую гемолитическую систему. Антиген разводят, чтобы одна его рабочая доза содержалась в 0,5 мл раствора. Затем в пробирки вносят по 0,5 мл разведенной сыворотки, добавляют по 0,5 мл антигена и по 0,5 мл комплемента. К каждому разведению сыворотки ставят контроль на антикомплементарность (0,5 мл сыворотки. + 0,5 мл изотонического раствора + 0,5 мл комплемента). Дополнительно ставят следующие контроли: контроль антигена 0,5 мл антигена+ 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия+0,5 мл комплемента), контроль комплемента (0,5 мл комплемента+1 мл изотонического раствора хлорида натрия) и контроль гемолитической системы (1,5 мл изотонического раствора хлорида натрия).

 

3. При посеве фибринозной пленки на поверхность питательной среды Клауберга выросли колонии, окрашенные в серо-черный цвет, с изрезанными краями.

Назовите возбудителя и вызванное им заболевание.

Среда Клауберга- плотная дифференциально-диагностическая питательная среда для дифтерийных палочек, содержащая теллурит калия, глицерин и дефибринированную кровь; позволяет дифференцировать биовары дифтерийных палочек по морфологическим особенностям колоний.

ВыделенCorynebacteriumdiphtheriaeбиовар gravis. Колонии R- формы, растут в виде крупных колоний 2-3 мм, серовато- чёрного цвета, имеют изрезанные края.

Возбудители дифтерии слегка изогнутые палочки, на концах имеют утолщения. В этих утолщениях имеются зерна валютина. Бактерии дифтерии неподвижны, не имеют спор и капсул. Грамположительны. В мазках обычно располагаются попарно под острым или тупым углом, в виде растопыренных пальцев.

БИЛЕТ 8

1. Приготовьте мазок из кислотоустойчивых бактерий и окрасьте.

Назовите цель, используемые красители, этапы окраски. Расскажите методику приготовления мазка из культуры, выращенной на плотной питательной среде.

Методика приготовления мазка из культуры, выращенной на плотной питательной среде.

1.        подготов предмет стекло;

2.        нанести каплю NaCl;

3.        обжечь петлю;

4.        перенести культуры с чашки или пробирки в каплю физ р-ра;

5.        обжечь петлю;

6.        зафиксироать мазок.

 

Циля-Нильсона (на кислото-устойчевые, карболовый фуксин Циля 5 мин подогревая, 5% серная кислота 5 сек, метил синий 1-2 мин, м/с с иммерсией, результат к/у бак рубиново-красные, не устой - синие);

2. Приготовьте микробную взвесь, произведите посев бактериальной петлей с ЖПС на ППС и посев в пробирку на плотную питательную среду и на ч. Петри.

 

3. В микробиологическую лабораторию поступил материал -проба крови больного. При посеве на одну из сред была обнаружена культура гемофилов через сутки после инкубирования.

Назовите среду для выделения чистой культуры гемофилов. Поясните ответ.

Перечислите условия необходимые для культивирования посевов и выделения гемофилов.

Среды- кровяной агар,шоколадныйагар.

пояснение: Лучше всего гемофилы растут на средах с нагретой кровью (шоколадном агаре и кровяной агар), так как при нагревании из крови высвобождаются необходимые им ростовые факторы.

БИЛЕТ 9

1. Приготовьте среду Гисса с сахарозой 50 мл.

Расскажите классификацию и требования, предъявляемые к питательным средам.

Требования, предъявляемые к питательным средам.

Любая питательная среда должна отвечать следующим тре­бованиям: содержать все необходимые для размножения микроорганизмов вещества в легкоусвояемой форме; иметь оптимальные влажность, вязкость, рН, быть изотоничной и по воз­можности прозрачной. Каждую питательную среду стерилизуют определенным способом в зависимости от ее состава.

 

2. Укажите колонии с ростом микроорганизмов, характерным для сальмонелл на ВСА.

Назовите исследования используемые для идентификации этого возбудителя.

На ВСА они образуют колонии черного цвета, оставляющие цвет после того, как их снимают петлей (кроме сальмонелл паратифа А).

 Бактериологический и серологический метод(реакция Видаля – серологическая диагностика брюшного тифа и паратифов).

3. У ребенка 6 лет отмечалась высокая температура, незначительные боли в горле, при осмотре обнаружена гиперемия зева, отек гортани, а так же налет на миндалинах в виде фибринозной пленки, предположительный диагноз дифтерия.

Перечислите материалы и методы исследования используемые для дифференциации этого возбудителя.

Метод исследования

Микробиологический метод.

Материалом для исследования служат дифтеритическая пленка или отделяемое из мест поражения, а также слизь из носа и глотки. Материал берут стерильным ватным тампоном и немедленно отправляют в лабораторию. Если материал не может быть засеян в течение ближайших 3—4 ч, то во избежание снижения высеваемости его берут тампоном, смоченным 5% раствором глицерина в изотоническом растворе хлорида натрия. С этой же целью материал забирают тампоном, смоченным 2% раствором теллурита калия.