Антитела против штамма ВИЧ Монтанье - мировой стандарт всех« тестов на ВИЧ »».

5,1 В статье 1983 г., озаглавленной «Выделение Т-лимфотропного ретровируса у пациента с риском развития синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД)» (20), где Монтанье и его коллеги сообщили об «выделении» своего штамма «ВИЧ», клетки получили из биопсии лимфатического узла гомосексуального мужчины с лимфаденопатией (лимфаденопатический синдром [LAS]) помещали в культуру с PHA, IL-2 и антисывороткой к человеческому интерферону. (Последнее, как ранее было показано на мышах, приводит к «увеличению продукции ретровируса в 10-50 раз»). Через 15 дней активность RT определяли с использованием синтетической праймер-матрицы A (n).dT15. Обратная транскрипция A (n) dT15 считалась доказательством присутствия ретровируса в клетках лимфатических узлов. Обнаружение такой же активности в супернатанте совместной культуры тех же клеток с лимфоцитами здорового человека считалось доказательством того, что ретровирус может передаваться. В другом эксперименте полибрен и супернатант от совместных культур добавляли к культурам лимфоцитов пуповины возрастом в два, три дня. Через семь дней был обнаружен «относительно высокий титр» транскрипции A (n.) DT15. Это считалось доказательством не только передачи, но и изоляции. «На то, что этот новый изолят был ретровирусом, дополнительно указывало его плотность в градиенте плотности сахарозы, которая составляла 1,16, и его мечение [3H] уридином (рис. 1)». На рисунке 1 было представлено доказательство того, что A (n) dT12-18 может транскрибироваться материалом из супернатанта культур пуповинных клеток, которые, в градиентах плотности сахарозы, с полосами 1,16 г / мл. «Инфицированные» лимфоциты пуповины, а также «продуцирующие HTLV» клетки лизировали. Белки из «клеточного экстракта», полученного из лизатов, реагировали с сывороткой от пациента с лимфаденопатией, другого пациента с «множественными аденопатиями», здорового человека, нормальной козьей и козьей антисыворотки «к HTLV-I p24». Многие белки из обоих типов клеток, но особенно из «инфицированной» пуповины, реагировали со ВСЕМИ сыворотками. Однако «инфицированные» клетки пуповины не реагировали с антисывороткой к «HTLV-I p24». Белки из культурального супернатанта с полосой 1. 16 мкг / мл также реагировали с сывороткой, но вместо козьей антисыворотки против p25 использовали сыворотку от другого здорового донора. В опубликованных полосках трудно, если вообще возможно, отличить какие-либо реактивные полосы с любой сывороткой. В тексте говорится, что «можно увидеть три основных белка: белок p25 и белки с молекулярной массой 80 000 и 45 000» в полоске с сывороткой от пациента с LAS. Montagnier et al. Также сообщили, что «электронная микроскопия инфицированных лимфоцитов пуповины показала характерные незрелые частицы с плотным серповидным (С-тип) зачатком на плазматической мембране». Они не предоставили данных электронной микроскопии (ЭМ) о полосчатости материала при 1,16 г / мл, но пришли к выводу: " Ретровирус, принадлежащий к семейству недавно обнаруженных вирусов Т-клеточного лейкоза человека (HTLV), но явно отличающийся от каждого предыдущего изолята, был выделен от пациента европеоидной расы с признаками и симптомами, которые часто предшествуют синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД). Этот вирус представляет собой типичный опухолевый вирус с РНК типа C, зародившийся на клеточной мембране, предпочитающий магний для активности обратной транскриптазы и имеющий внутренний антиген (p25), аналогичный HTLV p24»(20), (когда было обнаружено, что люди, которые имеют антитела, которые реагируют с этим «штаммом вируса», не быстро прогрессируют до СПИДа, без доказательств таксономически отдельный ретровирус «типичного типа C» стал таксономически отличным, типичным лентивирусом). был изолирован от пациента европеоидной расы с признаками и симптомами, которые часто предшествуют синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД). Этот вирус представляет собой типичный опухолевый вирус с РНК типа C, зародившийся на клеточной мембране, предпочитающий магний для активности обратной транскриптазы и имеющий внутренний антиген (p25), аналогичный HTLV p24»(20), (когда было обнаружено, что люди, которые имеют антитела, которые реагируют с этим «штаммом вируса», не быстро прогрессируют до СПИДа, без доказательств таксономически отдельный ретровирус «типичного типа C» стал таксономически отличным, типичным лентивирусом). был изолирован от пациента европеоидной расы с признаками и симптомами, которые часто предшествуют синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД). Этот вирус представляет собой типичный опухолевый вирус с РНК типа C, зародившийся на клеточной мембране, предпочитающий магний для активности обратной транскриптазы и имеющий внутренний антиген (p25), аналогичный HTLV p24»(20), (когда было обнаружено, что люди, которые имеют антитела, которые реагируют с этим «штаммом вируса», не быстро прогрессируют до СПИДа, без доказательств таксономически отдельный ретровирус «типичного типа C» стал таксономически отличным, типичным лентивирусом).

5.2 СЛОВО «ИЗОЛЯЦИЯ» ПРОИСХОДИТ ОТ ЛАТИНСКОГО Смысла «INSULATUS» «СДЕЛАНО НА ОСТРОВ». ЭТО ОТНОСИТСЯ К АКТУ ОБ ОТДЕЛЕНИИ ОБЪЕКТА ОТ ВСЕХ ВНЕШНИХ ВЕЩЕСТВ, КОТОРЫЕ НЕ ЯВЛЯЮТСЯ ЭТИМ ОБЪЕКТОМ. Интересующий объект - не белок и не фрагмент РНК (ДНК), а уникальный экзогенный ретровирус ВИЧ. Не больше, не меньше. Таких доказательств не было представлено Montagnier et al. Очевидно, что в лучшем случае обнаружение таких явлений, как вирусоподобные частицы в культурах клеток, реакции антитела / антигена и свидетельство обратной транскрипции A (n).dT15, можно считать доказательством только для обнаружения ретровируса, а затем тогда и только тогда, когда показано, что каждый из них специфичен для ретровируса. Это невозможно сделать, если сначала не изолировать ретровирус. Поэтому неудивительно, что Попович, Галло и их коллеги не считали данные Монтанье и др. Доказательством «истинной изоляции». (21) [В своих статьях 1984 года Галло и его коллеги определили изоляцию как обнаружение «более чем одного из следующих:», «повторное обнаружение Mg2 + -зависимая активность обратной транскриптазы в надосадочных жидкостях; вирус, наблюдаемый с помощью электронной микроскопии (ЭМ); внутриклеточная экспрессия связанных с вирусом антигенов, обнаруженная с помощью антител от серопозитивных доноров или кроличьей антисыворотки к HTLV-III; или передача частиц». (Под передачей частиц подразумевается обнаружение RT или частиц в культурах человеческой пуповинной крови, костного мозга или Т-лимфоцитов периферической крови, культивированных с супернатантами от «инфицированных» культур). Поскольку это ничем не отличается от экспериментов, которые проводили Монтанье и его коллеги, из этого следует, что Галло и его коллеги также не доказали «истинную изоляцию». Фактически, определение изоляции, данное Галло и др., Вызывает дополнительные вопросы, в том числе: как можно было получить кроличью антисыворотку «к HTLV-III» до выделения вируса и как было возможно до выделения вируса удостовериться, что оба вируса кроличья антисыворотка и сыворотки пациентов, использованные для тестирования материала из культур, специфически взаимодействовали с вирусом? Согласно их определению, можно выделить ВИЧ, даже если ОТ не обнаружено. Как это возможно, если ОТ является «отличительной чертой» ВИЧ? (22)]. Также важно, что в патентной заявке 1986 г., поданной им и его коллегами, «были широко изучены, поскольку считалось, что ретровирусы передаются вертикально (в линии зародышевых клеток) и потому, что считалось, что они играют важную роль в дифференцировке. К началу эры СПИДа в экспериментах с такими клетками было сообщено об одном или нескольких из следующих явлений: ретровирусоподобные частицы, активность обратной транскриптазы и ретровирусные антигены. (24-26) Таким образом, такие результаты не могут служить доказательством существования ВИЧ.,

Также присутствие антител у пациентов со СПИДом, но не у здоровых людей в контрольной группе, которые реагируют с белками с концентрацией 1,16 г / мл, не является доказательством того, что такие люди инфицированы экзогенным ретровирусом, ВИЧ. Например, в исследовании, опубликованном в этом году, один из самых известных ретровирологов Рейнхард Курт из Института Пауля-Эрлиха в Германии и его коллеги сообщили, что 70% «ВИЧ-положительных пациентов» по ​​сравнению с 3% доноров крови имели антитела, которые реагировали с ретровирусом HTDV / HERV-K. Однако HTDV / HERV-K не является ретровирусом, который присутствует только у пациентов со СПИДом, то есть экзогенным ретровирусом, каким считается ВИЧ, но HTDV / HERV-K - это эндогенный ретровирус или, как выразился Курт, ретровирус, присутствующий «во всех нас». Как тогда можно сказать: основанный только на тесте на антитела, этот «штамм Монтанье», если предположить, что Монтанье выделил такой вирус, не является ли еще одним эндогенным ретровирусом, порожденным условиями, присутствующими у этих пациентов? (см. 6.3.2).

5,3 Очевидно, группа Монтанье обнаружила реакции между сывороткой пациентов и тремя белками, p25 (p24), p45 (p41) и p80 в полосчатом материале, но только p24 считался белком ВИЧ. Однако в 1984 году группа Галло сообщила, что «ни один антиген из неинфицированных клонов не вступил в реакцию с сывороткой, за исключением белка с молекулярной массой 80,000 в H17, который связывал антитела из всех протестированных образцов человеческой сыворотки [включая нормальную сыворотку ] но не из кроличьей или козьей сыворотки ". Из-за этого белок p80 считался неспецифическим. «Антигены, вновь экспрессированные [вступающие в реакцию с сывороткой в ​​клеточных экстрактах] после вирусной инфекции и распознаваемые сывороткой человека, использованной для этого анализа, включали p65, p55, p41, p39, p32 и p24. Большой белок с молекулярной массой приблизительно 130, 000 и белок 48000». В отличие от Монтанье, группа Галло также сообщила, что«В нормальной сыворотке человека ни один из антигенов не был обнаружен (не показан)», и пришел к выводу:«Эти результаты ясно показывают, что обнаруженные антигены после заражения вирусом присутствуют либо кодируемые вирусом белки, либо клеточные антигены, специфически индуцированные инфекцией». (27) Галло и его коллеги также сообщили о том, что белки из супернатанта«инфицированных»культур, которые в градиентах плотности сахарозы имеют полосу 1,16 г / мл, только два белка, p41 и p24, вступили в реакцию с сывороткой пациентов и пришли к выводу, что «эти молекулы являются основными компонентами вирусного препарата. p24 и p41, следовательно, можно рассматривать как структурные белки вируса». В течение двух лет после открытия ВИЧ, хотя группа Монтанье, по всей видимости, предпринимала неоднократные попытки, в отличие от группы Галло, они не смогли обнаружить «высокомолекулярный» белок, который реагировал с разными сыворотками, но который «не присутствовал в супернатанте неинфицированных контрольных клеток.». В экспериментах, опубликованных в 1985 году, вместо лимфоцитов пуповины они использовали "инфицированные" клетки H9 и CEM, две лейкемические клеточные линии, и культивировали (помеченные) их радиоактивным цистеином, 35S цистеином (незаменимая аминокислота, составляющая человеческие белки).). Они сообщили, что в супернатанте «белок приблизительно 110-120K может быть специфически иммунопреципитирован сыворотками от пациентов с предрасположенностью к СПИДу или СПИДом, в дополнение к основным белкам, а не сыворотками нормальных, здоровые доноры крови или сотрудники лабораторий. Этот белок отсутствовал в супернатантах неинфицированных Т-лимфоцитов, линий Т- или В-клеток». Они также показали, что белок 110К был гликопротеином (gp110). По не указанным причинам они думали, что белок 110К имел клеточного предшественника. Чтобы продемонстрировать это, вместо использования клеточных линий CEM или H9 они сформировали «клеточный гибрид» между нормальными лимфоцитами Т4 и клеточной линией MOLT-4, которую затем «инфицировали» LAV и культивировали с радиоактивным цистеином. Полученные синцитии лизировали, и белки реагировали «с LAV-положительной сывороткой». «После 3 часов мечения была обнаружена полоса 150 КБ. При более длительном маркировке (12 ч) появилась другая полоса 135 К». Любопытно, что это было истолковано как " предполагая, что он [135] произошел от предшественника 150К «и что«либо в цитоплазме, либо на клеточной мембране gp150 превращается в форму gp135... Во время морфогенеза вируса gp135 превращается в gp110-120 посредством частичное ферментативное удаление углеводов без протеолитического расщепления. Связанный с вирусом [Ни одна часть их данных не была получена даже из вирусоподобной частицы или материала с полосами 1,16 г / мл. Все было либо из «инфицированных» клеток, либо из супернатанта культуры] gp110 сам может подвергаться дальнейшей обработке во время старения вируса... помимо основной полосы 110-120 КБ, наблюдаемой после мечения вируса, трех других тонких полос 70 К, 40 К и 34 К соответственно, может быть особым образом иммунопреципитирован сывороткой пациентов. Поскольку некоторые из этих сывороток не преципитировали какой-либо gag-белок, Градиенты плотности сахарозы 16 г / мл стали известны как белки ВИЧ. Другими словами, вопреки всем научным рассуждениям, было постулировано, что сыворотки СПИДа содержат специфические антитела к ВИЧ, а белки, с которыми эти антитела реагируют, были определены как специфические белки ВИЧ.