Биохимия спиртового брожения: Основу технологии получения пива составляет спиртовое брожение, - при котором сахар превращается...
Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...
Топ:
Отражение на счетах бухгалтерского учета процесса приобретения: Процесс заготовления представляет систему экономических событий, включающих приобретение организацией у поставщиков сырья...
Когда производится ограждение поезда, остановившегося на перегоне: Во всех случаях немедленно должно быть ограждено место препятствия для движения поездов на смежном пути двухпутного...
Интересное:
Искусственное повышение поверхности территории: Варианты искусственного повышения поверхности территории необходимо выбирать на основе анализа следующих характеристик защищаемой территории...
Принципы управления денежными потоками: одним из методов контроля за состоянием денежной наличности является...
Подходы к решению темы фильма: Существует три основных типа исторического фильма, имеющих между собой много общего...
Дисциплины:
2017-11-16 | 405 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Электронная микроскопия использует для "просвечивания" морфологических объектов пучок электронов. Пучок электронов испускается электронной пушкой в условиях высокого вакуума и ускоряющего напряжения. Далее этот пучок фокусируется при помощи электромагнитов (электромагнитные линзы). Сфокусированный пучок направляется на изучаемый объект, имеющий структуры с различной электронной плотностью. Пройдя через объект, пучок электронов падает на люмииесцирующий экран, на котором и создает плоскостное изображение структур объекта. Это изображение может быть сфотографировано. Общий вид электронного микроскопа показан на рис. 2.4.
Разрешающая способность современных электронных микроскопов равна 0,1 нм (в 200 000 раз выше, чем световых микроскопов), а увеличение — 1 миллион раз. Описанная разновидность электронной микроскопии называется просвечивающей (трансмиссионной). Используя ее, можно изучить тонкое внутреннее строение клеток и межклеточных структур. Сканирующие, или растровые, микроскопы позволяют увидеть трехмерное изображение объекта, его поверхность. Принцип работы растрового электронного микроскопа заключается в том, что пучок электронов последовательно движется по поверхности гистологического объекта, на которую предварительно напылено твердое вещество. Под действием пучка электронов выбиваются вторичные электроны, которые регистрируются телевизионным экраном. Так последовательно "высвечивается" (сканируется) вся поверхность гистологического объекта. Рис. 2.5 демонстрирует изображения объектов, получаемые с помощью трансмиссионного и сканирующего электронных микроскопов.
|
Высоковольтная трансмиссионная электронная микроскопия за счет увеличения ускоряющего напряжения обеспечивает огромную скорость движения электронов. Благодаря этому они значительно глубже, чем при обычной трансмиссионной микроскопии, проникают в изучаемый объект. Высоковольтный микроскоп (рис. 2.6) дает высокую разрешающую способность и позволяет изучать срезы до нескольких микрометров толщиной.
ГИСТОХИМИЯ
В основе гистохимических методов исследования лежит использование химических реакций для изучения различных химических компонентов клеток и тканей. Современные гистохимические методы позволяют выявлять в клетках аминокислоты, белки, жиры, углеводы, минеральные вещества и другие продукты. Принцип гистохимических реакций состоит в том, что используются красители, которые избирательно связываются только с теми химическими соединениями клетки, которые необходимо изучить, и окрашивают их, делая видимыми. Важный раздел гистохимии — гистохимия ферментов. При помощи гистохимии ферментов можно определить активность многих ферментов, изучать обмен веществ в клетках и тканях. Активность ферментов при этом определяется по окрашиванию конечного продукта реакции. Поскольку гистохимические методы позволяют оценивать функции клеток и тканей, их относят к морфофункциоиальным методам (рис 2.7).
Разновидностью гистохимии является также иммуногистохимия (иммуноцитохимия). Иммуногистохимические методы основаны на реакциях антиген-антитело. Каждая клетка организма имеет свой разнообразный специфический антигенный состав. К любому антигену можно путем иммунизации выработать специфические (моноклональные) антитела, которые затем соединяются с флуорохромом (например, флуоресцеинизотиоциона-том, или сокращенно ФИТЦ). Нанесенные на гистологический объект, такие антитела специфически метят только клетки, несущие антигены, на которые они выработались. Методы иммуногистохимии используются для определения степени дифферепцировки клеток (в процессе дифференцировки происходит последовательная смена поверхностных клеточных антигенов), а также для выявления различных веществ в клетке. В последнее время принципы светомикроскопической гистохимии успешно перенесены в электронную микроскопию. Это привело к возникновение электронномикроскопической цито- и гистохимии и электронной им-муноцитохимии (иммуногистохимии). Эти методы основаны на получении высокоэлектронноплотных продуктов цито- (гисто)химических реакций. Светомикроскопическая и электронномикроскопическая цито- (гисто- иммунохимия также являются морфофункциональными методами, позволяющими изучать не только структуру, но и функции клеток и тканей.
|
ГИСТОАВТОРАДИОГРАФИЯ — метод, основанный на использовании радиоизотопов — веществ, излучающих поток электронов. Для этого изотопами метят различные предшественники синтеза веществ в клетке: нуклеотиды, аминокислоты и другие. Затем эти меченые вещества вводят в клетку (в организм), и они включаются в синтетические процессы. Далее из ткани делают срезы и наносят на них фотоэмульсию, которая под влиянием излучаемых электронов засвечивается. Чем больше засвечивание, тем интенсивнее идет процесс включения изотопов в ткани, тем интенсивнее обмен в клетке. В последнее время разработаны методы электронной цито-(гисто-) ауторадиографии. Так же, как и гистохимические методы, гистоавторадиог-рафия является морфофункциональным методом исследования.
ПРИЖИЗНЕННАЯ МИКРОСКОПИЯ КЛЕТОК И ТКАНЕЙ. Для прижизненной (витальной) микроскопии можно использовать метод культуры тканей, когда клетки помещаются на искусственную питательную среду и затем на ней культивируются. На такой среде они растут в виде монослоя. Эти клетки можно затем окрашивать и микроскопировать. Для прижизненного исследования клеток используются также методы витального (прижизненного) окрашивания клеток нетоксичными красителями (метиленовый синий, трипаповый синий, кармин). Эти красители дают не растворы, а эмульсии, которые активно фагоцитируются клетками и визу-
ализируют их. Суправитальная микроскопия основана на связывании красителя живыми тканями, изъятыми из организма. Например, так окрашивают нерные клетки при помощи метиленовОго синего. Таким образом, разница между витальной и суправиталыюй микроскопией заключается в том, что в первом случае окрашивание клеток и тканей идет в живом организме до изъятия из него органа или его части, тогда как во втором случае оно проводится в живом, но изъятом из организма органе (части органа, ткани).
|
Для изучения живых клеток используют также метод цейтраферной съемки (киносъемки). При этом клетки в культуре тканей фотографируют с интервалами в 5 минут. Снятый таким образом фильм демонстрируют с частотой 24 кадра в секунду. При этом за короткое время можно увидеть все изменения, произошедшие с клетками в течение длительного времени. Цейтраферная съемка позволяет, например, проследить изменения, происходящие в клетке при митотическом делении и др.
ЦИТОМИКРОХИРУРГИЯ — метод, позволяющий производить на клетке микрооперации — удаление частей клетки, пересадку ядра из одной клетки в другую и т.д. С этой целью используют специальный прибор микроманипулятор.
В гистологии широко используют также метод трансплантации тканей. Для этого кусочки органов или тканей пересаживают в различные участки тела животных-реципиентов. Далее изучают поведение трансплантатов, процессы жизнедеятельности в них и взаимоотношения их с тканями реципиента.
МЕТОД ГИБРИДИЗАЦИИ. Этот метод основывается на специфическом связывании участков ДНК с комплементарными им маркированными фрагментами РНК или ДНК (так называемые зонды). Метод позволяет выявлять последовательность нуклеотидов в РНК и ДНК и, следовательно, локализацию определенных генов и продуктов их деятельности.
|
|
Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого...
Биохимия спиртового брожения: Основу технологии получения пива составляет спиртовое брожение, - при котором сахар превращается...
Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой...
Археология об основании Рима: Новые раскопки проясняют и такой острый дискуссионный вопрос, как дата самого возникновения Рима...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!