Реакция получения эритрохинина.

Несколько капель хлороформного раствора исследуемого вещества помещают в сухую пробирку и органический растворитель испаряют; остаток растворяют в 5 мл воды, добавляют 1-2 капли 1% раствора серной кислоты, а затем 1-2 капли бромной воды, 3-4 капли 10% раствора жёлтой кровяной соли,1-2 капли 25% раствора гидроксида аммония и тотчас же 0,5 мл хлороформа. Взбалтывают. Хлороформный слой при наличии хинина окрашивается в розовый или красный цвет.

Реакция в раствором роданида аммония.

Несколько капель хлороформного исследуемого раствора испаряют на предметном стекле. К сухому остатку добавляют каплю 0,1н раствора НСI и каплю раствора роданида аммония. Через 10-15 минут под микроскопом наблюдают игольчатые бесцветные кристаллы, собранные в сростки в виде пучков.

2. НИКОТИН

2.1. Реакция образования пикрата никотина.

Несколько капель хлороформного исследуемого раствора испаряют на предметном стекле. К сухому остатку добавляют каплю 0,1н раствора HCI и каплю 0,5% раствора пикриновой кислоты. Через несколько минут выделяются кристаллические осадки, состоящие из удлиненных призматических кристаллов, как отдельных, так и собранных в сростки.

2.2. Реакция образования рейнеката никотина.

Несколько капель хлороформного исследуемого раствора испаряют на предметном стекле.К сухому остатку добавляют каплю 0,1н раствора HCI и 1 каплю свежеприготовленного 1% раствора соли Рейнеке, тотчас выпадает осадок, кристаллизующийся через несколько минут в виде сростков из призматических кристаллов.

2.3.Реакция образования йодвисмутата никотина.

На предметное стекло наслаивают 2-3 капли исследуемого хлороформного раствора, хлороформ испаряют при комнатной температуре, остаток растворяют в одной капле 0,1н раствора соляной кислоты и наносят каплю реактива Драгендорфа. Предметное стекло помещают во влажную камеру, через 10-15 минут под микроскопом наблюдают характерные для никотина сростки кристаллов в виде летящих птиц, буквы Х или К.

3. УИРС. ТСХ –анализ алкалоидов.

Условия проведения ТСХ-анализа:

хроматографическая пластинка «Сорбфил»

хроматографическая система: метанол-аммиак (100: 0,1)

исследуемые вещества: хлороформный раствор хинина и спиртовой раствор никотина.

Обработка пластинки:

1) исследование в УФ свете

2) опрыскивание реактивом Драгендорфа по Мунье.

После проведения исследования зарисовать полученную хроматограмму и рассчитать значение Rf.

ЗАНЯТИЕ № 7

 

ТЕМА:	Свойства и ХТА алкалоидов, производных пурина и тропана.
ЦЕЛЬ:	Сформировать знания и практические навыки проведения ХТА кофеина, атропина, скополамина, кокаина.

 

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА СТУДЕНТА К ЗАНЯТИЮ:

Основные термины и понятия:

Кофеин, атропин, скополамин, кокаин. Кокаинизм. Наркомания.

Логическая структура темы:

Алкалоиды – производные ПУРИНА
КОФЕИН
Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм.	Возбуждающее действие на ЦНС, стимулирующее действие на сердечно-сосудистую систему, дыхательный центр, повышение двигательной активности, сосудорасширяющее действие,гипертермия, фибрилляция мышц лица, боль в эпигастрии, рвота, падение артеритального давления, эпилептоидные и клонико-тонические судороги
Изолирование	Экстракция
Химико-токсикологический анализ.
Качественный	Мурексидная проба Реактив Несслера Ртути хлорид Золотобромоводородная кислота Общеалкалоидные Реактивы, ТСХ УФ и ИК спектроскопия ГЖХ, ВЭЖХ
Количественный	СФМ,ГЖХ, ВЭЖХ
Алкалоиды- производные ТРОПАНА
АТРОПИН
Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм.	Возбуждение, галлюцинации, бред, повышенная подвижность, расширение зрачков, головокружение, тошнота,рвота, одышка,паралич аккомодации, сухость слизистой носа, ротовой полости и кожных покровов, расстройство глотания и речи, светобоязнь, покраснение лица, эпилептиформные судороги, потеря сознания, цианоз, тахикардия, понижение давления, кома.
Изолирование	Экстракция
Химико-токсикологический анализ.
Качественный	Реакция Витали-Морена Общеалкалоидные реактивы п-Диметиламино-бензальдегид Соль Рейнеке Пикриновая кислота Стифниновая кислота Бромная вода Фармакологическая проба ТСХ, УФ и ИК спектроскопия ГЖХ,ВЭЖХ
Количественный	СФМ, ФЭК,ГЖХ,ВЭЖХ
СКОПОЛАМИН
Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм	Расширение зрачков. паралич аккомодации, расслабление гладкой мускулатуры, уменьшение секреции потовых и пищеварительных желёз, амнезия, потеря сознания, кома.
Изолирование	Экстракция
Химико-токсикологический анализ
Качественный	Реакция Витали-Морена п-Диметиламино-бензальдегид Соль Рейнеке Общеалкалоидные реактивы Золотобромисто- водородная кислота Молибдат аммония ТСХ УФ и ИК спектроскопия
Количественный	СФМ, ФЭК,ГЖХ,ВЭЖХ
КОКАИН
Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм	Стимулятор ЦНС. Наркотическое средство. Местноанестезирующее и сосудосуживающее действие. Эйфория, галлюцинации, бред, понижение слуха, вкуса, зрения, паралич аккомодации, расширение зрачков конвульсии, паралич дыхательного центра. Смертельная доза-0,05 г.
Изолирование	Экстракция
Химико-токсикологический анализ
Качественный	Общеалкалоидные реактивы (Драгендорфа, Майера, Шейблера) Реакция Скотта Образование бензойно-этилового эфира Платинохлористо- водородная кислота KMnO4 Фосфорно-модибденовая кислота- на экгонин ТСХ,ИХА ИК и УФ спектроскопия ГЖХ,ВЭЖХ,ГХ/МС
Количественный	СФМ,ИХА,ГЖХ,ВЭЖХ,ГХ/МС

Литература для самоподготовки:

1.Лужников Е.А. Клиническая токсикология[Текст] / Е.А.Лужников.- Изд. 3-е, перераб.и доп.- М.: Медицина, 1999.-С. 267.

2.Крамаренко,В. Ф. Токсикологическая химия[Текст]/ В.Ф.Крамаренко. – Киев: Выща школа, 1989.-С. 215-217, 259-265

3.Швайкова, М.Д. Токсикологическая химия [Текст] / М.Д.Швайкова. – М.: Медицина, 1975.-С.190-198, 228-231

4.Белова, А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии [Текст] / А.В.Белова. - Изд. 2-е, исправ.-М.:-Медицина,1976.-С. 92-98, 77-79.

5.Якушева Н.Ю., Минаева Н.Н. Сборник вопросов и задач по токсикологической химии. [Текст] Учебное пособие / Н.Ю.Якушева, Н.Н.Минаева – Х: ДВГМУ, 2007.-С.118-126.

6. Токсикологическая химия [Текст] / Под ред. Т.В.Плетенёвой.- М.:ГОЭТАР-МЕД, 2005.-С.280-288.

7.Токсикологическая химия. Метаболизм и анализ токсикантов в биосредах человека [Текст] / Под ред. Н.И.Калетиной.-М.: ГОЭТАР-МЕД,2007 –C.586-596.

8.Материалы лекций.

Вопросы для самоподготовки:

1. Как выполняется мурексидная проба на кофеин?

2. Какие микрокристаллоскопические реакции используются для обнаружения кокаина?

3. При каком значении рН экстрагируются производные тропана?

4. Какой реактив применяется в качестве проявителя в ТСХ определении кокаина?

5. С помощью каких реакций можно обнаружить атропин и скополамин? Как их отличить друг от друга?

6. Какой метод анализа является подтверждающим на кокаин?

7. Назовите основные метаболиты атропина, скополамина и кокаина.

8. Какой реактив применяется в качестве проявителя в ТСХ определении кофеина?

9. Назовите характерные симптомы отравления атропином и кокаином.

10. Решите задачу:

При прямой экстракции 50 мл мочи хлороформом при рН 12 получено извлечение объемом 20 мл. С помощью ТСХ-скрининга и качественных химических реакций обнаружен кофеин. Часть хлороформного извлечения (2 мл) упарили до сухого остатка и растворили в 5 мл 0,1 М кислоты хлористоводородной. Оптическая плотность полученного раствора при аналитической длине волны 273 нм и толщине поглощающего слоя 1см составила 0,850. Определить количественное содержание вещества в моче (мкг/мл), если удельный показатель поглощения кофеина равен 504.

Тестовый контроль по теме:

ТЗ 1-2.Установите соответствие:

Вещество: Группа алкалоидов:

1. Кофеин. А.Производные пурина

2. Скополамин. Б.Производные хинолина

В.Производные пиридина

Г.Производные тропана

Д.Производные изохинолина

ТЗ 3. Максимальное количество атропина экстрагируется хлороформом из ………….. водных вытяжек.

ТЗ 4. Вещество, обладающее местноанестезирующим действием

1. Атропин.

2. Кофеин.

3. Кокаин.

4. Скополамин.

5. Никотин.

ТЗ 5. Алкалоид, определяемый с помощью реактива Несслера и мурексидной пробы:

1. Кофеин

2. Скополамин

3. Атропин

4. Морфин

5. Кокаин

ТЗ 6. Название реакции определения кокаина в порошке -….

ТЗ 7. Реактив, используемый для качественного определения атропина

1. Серная кислота конц.

2. Прочный синий ВВ

3. Соль Рейнеке

4. Хлорид железа

5. Реактив Марки

ТЗ 8. Название соединения скополамина, по реакции образования которого можно отличить скополамин и атропин -….

ТЗ 9. Реактив, используемый для качественного обнаружения кокаина в хлороформных вытяжках

1. Хлорид железа(III)

2. Перманганат калия

3. Бихромат калия

4. Бромная вода

5. Ванилин в соляной кислоте

ТЗ 10. Судебно-химическое значение реакции Витали-Морена на атропин-….

ТЗ 11. Реактив, используемый для качественного определения скополамина в хлороформных вытяжках

1. Реактив Форреста

2. Азотная кислота конц., ацетон, спиртовой раствор калия гидроксида

3. Нингидрин

4. Хлорид железа

5. Сульфат аммония

ТЗ 12.Алкалоид, образующий характерные микрокристаллы с перманганатом калия

1. Кофеин

2. Кокаин

3. Атропин

4. Промедол

5.Морфин

ТЗ 13. Алкалоид, определяемый реакцией Витали-Морена:

1. Кофеин

2. Анабазин

3. Атропин

4. Никотин

5. Кокаин

ТЗ 14. Реакция, являющаяся общегрупповой на алкалоиды, производные пурина

1. Витали-Морена

2. Цвиккера

3. Образование азокрасителя

4. Браттона-Маршалла

5. Мурексидная проба

ТЗ 15. Основной метаболит кокаина

1. Рубазоновая кислота

2. Тропин

3. Экгонин

4. Норкодеин

5. Фенетидин

СОДЕРЖАНИЕ АУДИТОРНОГО ЗАНЯТИЯ

1. Семинар по теме занятия.

2. Практикум.

3. Оформление протокола практического занятия.

4. Тестовый контроль усвоения темы.

ПРАКТИКУМ

1. КОФЕИН.

Мурексидная проба.

5-6 капель хлороформного раствора исследуемого вещества помещают в фарфоровую чашку и растворитель испаряют без нагревания. К сухому остатку прибавляют 1 мл концентрированной азотной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. К окрашенному в буроватый цвет остатку подносят на стеклянной палочке одну каплю 25% раствора аммиака. Остаток в чашке при наличии кофеина приобретает пурпурно-фиолетовое окрашивание.