Брюшнотифозный О-диагностикум

Диагностикумы

Диагностикумы – это антигенные диагностические препараты, представляющие взвесь микроорганизмов типичных штаммов в физиологическом растворе, убитых любым физическим (нагреванием, ультразвуком) или химическим воздействием (формалином, этанолом), но сохранившие при этом свои характерные антигенные свойства. Растворимые, мелкодисперсные антигены предварительно адсорбируют на инертных монодисперсных частицах (чаще латексных сферах) или клетках, например, на эритроцитах. Таким образом получают диагностикумы, используемые в реакции латекс-агглютинации и эритроцитарныедиагностикумы. Препараты используются в реакции агглютинации по типу Видаля, в следующих реакциях: РСК (реакция связывания комплемента), РТГА (реакция торможения гемагглютинации), РНГА (непрямой (пассивной) гемагглютинации), латекс-агглютинации.

Диагностикумы не вводят внутрь организма человека для выработки иммунитета! Это препараты только диагностической направленности в использовании.

Брюшнотифозный О-диагностикум

Представляет собой трѐхмиллиардную взвесь в физиологическом растворе сальмонелл, убитых нагреванием. Действующим началом данного О-диагностикума являются О-антигены сальмонелл, дающие с соответствующими О-антителами реакцию агглютинации. В качестве консерванта препарат содержит 15% глицерина. Препарат предназначен для серологической диагностики брюшного тифа в реакции агглютинации по типу Видаля.

Брюшнотифозный H- диагностикум

Содержит трѐхмиллиардную взвесь в физиологическом растворе сальмонелл, убитых выдержкой в формалине. Действующим началом Н-диагностикумов являются Н-антигены 1 и 2 фазы сальмонелл, дающие со специфическими Н-антителами реакцию агглютинации. В качестве консерванта содержит 0,5 % раствор формалина. Препарат используется для серологической диагностики брюшного тифа в реакции агглютинации по типу Видаля

Бруцеллѐзный единый диагностикум

Диагностикум предназначен для постановки реакции агглютинации Райта, являющейся одной из основных иммунологических реакций, применяемых в диагностике бруцеллѐза, а также ориентировочной реакции агглютинации на стекле.

Препарат представляет собой взвесь бруцелл в физиологическом растворе, содержащем в 1 мл 10 млрд микробных тел, убитых 0,5% формалином или нагреванием, с последущим добавлением в качестве консерванта карболовой кислоты.

Штаммы для изготовления диагностикума должны обладать всеми присущими бруцеллам свойствами. Дня постановки реакции Райта диагностикум разводят в десять раз (до конечной концентрации в 1 мл 1 млрд микробных тел), для реакции агглютинации на стекле используют цельный диагностикум.

Туляремийныйдиагностикум

Туляремийныйдиагностикум состоит из культуры туляремийных микробов, убитых формалином. Используется при серологической диагностике туляремии в реакции развернутой агглютинации и в кровяно-капельной реакции на стекле.

Концентрированный антиген из риккетсий Провачека, культивированных в кишечниках заражѐнных вшей, для диагностики сыпного тифа

Препарат применяется для специфической серологической диагностики сыпного тифа в реакциях макроагглютинации и РСК. Дeйcтвующим началом диагностикума являются инактивированные формалином (0,5%) риккетсии Провачека, выделенные от больных сыпным тифом и культивированные на взрослых вшах, свободных от посторонней микрофлоры. Препарат содержит в 1 мл 50–60 кишечников заражѐнных вшей, что соответствует 3–5 млрд риккетсий Провачека: он безвреден для морских свинок и вшей, поскольку не содержит живых риккетсий. В качестве консерванта в диагностикум добавляется 0,5% фенол.

 

СЫВОРОТОЧНЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ

 

Преципитирующие сыворотки

Преципитирующие сыворотки применяются для постановки реакций преципитации с целями диагностики некоторых инфекционных заболеваний, для определения природы неизвестного белка при условии, если его можно получить в коллоидном состоянии, в судебно-медицинской практике для распознавания видовой принадлежности крови, в санитарии, химии и др. Реакция преципитации характеризуется чрезвычайно высокой чувствительностью и специфичностью. Она позволяет обнаружить ничтожные малые следы антигена (до разведения 1:100.000 и выше). Титром преципитирующей сыворотки является максимальное разведение антигена, которое дает устойчивую реакцию преципитации с неразведенной (цельной) преципитирующей сывороткой. Действие преципитирующих сывороток на антиген сходно с действием агглютинирующих. Преципитирующие сыворотки получаются путем искусственной иммунизации животного убитыми или живыми микробами, а также разнообразными лизатами и экстрактами микробных клеток. Путѐм искусственной иммунизации можно получить преципитирующие сыворотки к любому чужеродному белку растительного и животного происхождения, а также к гептенам при иммунизации животного полноценным антигеном, содержащим данный гаптен.

Назначение Используется с диагностической целью при исследовании кож и другого патологического материала на сибирскую язву. Характеристика Сыворотку получают из крови иммунизированных сибиреязвенным антигеном лошадей-продуцентов. Препарат содержит специфические антитела для выявления термостабильного сибиреязвенного антигена в реакции преципитации Применение Препарат используют согласно наставлению (инструкции) по применению. В реакции преципитации со стандартным сибиреязвенным бактерийным антигеном сыворотка должна давать четкое кольцо не позднее, чем через 1 минуту, с экстрактами из органов и кож животных, павших от сибирской язвы – не позднее, чем через 2 мин. Сыворотка не должна давать реакции преципитации с антигенами из кожздоровых животных в течение 15 минут.

Люминесцирующие сыворотки

Люминесцирующие сыворотки применяются для микробиологической диагностики ряда инфекционных заболеваний, а именно для обнаружения бактерий, вирусов, риккетсий и простейших, для определения локализации антигенов в организме, тканевых срезах и пр. Во многих микробиологических исследованиях широко используется метод люминесцирующих антител. Этот метод, основанный на сочетании иммунологической специфичности реакции между антигеном и антителом и люминесцентной микроскопии, позволяет обнаружить и идентифицировать бактерии, вирусы, риккетсии, грибки, простейшие и растворѐнные антигены в микроскопическом препарате. Люминесцентно-серологический метод обладает высокой чувствительностью, достаточно специфичен, отличается простотой проведения и позволяет быстро получить ответ. Именно поэтому данный метод используется для экспресс-индикации микроорганизмов. Люминесцирующие сыворотки готовят из специфических иммунных сывороток, которые, в свою очередь, получают подобно агглютинирующим и прециптирующим сывороткам. Из них извлекают глобулиновую фракцию методом высаливания сернокислым аммонием. Полученные глобулины обрабатываются флюорохромами. Обработанные таким образом белки-антитела обладают способностью люминесцировать (светиться) в ультрафиолетовых или фиолетово-синих лучах. Такие люминесцирующие антитела используются для обнаружения соответствующего микроба (антигена). Наличие и локализация микробов (антигена) в микроскопическом препарате выявляются в результате реакции антиген– антитело. Продукт этой реакции ярко люминесцирует и может быть открыт даже в отдельных участках клеток в единичных бактериях. Единичные клетки возбудителей могут быть идентифицированы в мазках на фоне обильной посторонней микрофлоры. Помимо специфических люминесцирующих сывороток в микробиологической практике широко применяются люминесцирующие нормальные сыворотки разных видов животных и человека. Эти сыворотки используются при непрямом методе определения антигенов и антител. Они служат для обнаружения комплексов «антиген+антитело» и являются антисыворотками против глобулинов сыворотки того вида животного, которое иммунизировалось для получения специфической сыворотки. В основном применяется люминесцирующая противокроличья сыворотка, иногда люминесцирующие лошадиная и противочеловеческая сыворотки.

Непрямой метод использования люминесцирующих антител заключается в том, что на препарат, содержащий микроб (антиген), наносят специфическую иммунную сыворотку. Молекулы гамма-глобулинов из примененной сыворотки взаимодействуют с гомологичным антигеном, специфически адсорбируются в местах локализации его и обнаруживаются с помощью люминесцирующей антигамма-глобулиновой сыворотки.

Люминесцирующие холерные антитела представляют собой меченные флюоресцеинизотиоцианатом глобулиновые фракции холерной агглютинирующей О-сыворотки и предназначены для быстрого обнаружения и идентификации холерных вибрионов в S-форме в мазках из чистых культур и из различных материалов от больных, трупов и объектов внешней среды с помощью люминесцентной микроскопии.

Для идентификации микробов, наряду с определением морфологических, культуральных и биохимических свойств, широко используется диагностические агглютинирующие сыворотки. Агглютинацией называется склеивание микробов, скучивание их под влиянием специфических антител – агглютининов, содержащихся в иммунной сыворотке.

Сыворотки получаются путѐм иммунизации животных. Для иммунизации животных можно применять убитые и живые культуры. После иммунизации животного у него забирают кровь, получают сыворотку и устанавливают титр агглютинирующей сыворотки. Титром агглютинирующей сыворотки называется максимальное разведение сыворотки, которое дает устойчивую реакцию агглютинации с соответствующим антигеном. Микробная клетка является сложным комплексом антигенов, что является причиной так называемой групповой агглютинацией, выражающейся в том, что иммунная сыворотка агглютинирует не только гомологичный микроб, но и другие бактерии из той же группы. Групповая агглютинация затрудняет определение вида выделенного микроба и серологическую диагностику заболевания. Устранить групповую агглютинацию можно, удалив из сыворотки антитела в отношении антигенов, являющихся общими для гомологичного микроба и родственных с ним. Это достигается путѐм постановки реакции Кастелляни (истощения групповых антител). Институтами вакцин и сывороток выпускаются неадсорбированные и адсорбированные агглютинирующие сыворотки. Специфические адсорбированные агглютинирующие сыворотки получают путѐм удаления методом адсорбции неспецифических групповых антител из нативных сывороток. Использование адсорбированных сывороток даѐт возможность определения выделенного микроба в пределах вида или типа при помощи реакции агглютинации на стекле без дополнительной постановки развѐрнутой агглютинации.

Антитоксические сыворотки

Лечебно-профилактические антитоксические сыворотки

Для получения лечебно-профилактических сывороток применяется метод гипериммунизации животных, т.е. введение им нарастающих доз соответствующих антигенов с тем, чтобы добиться максимального нарастания в крови животного такого количества специфических антител, которое обеспечило бы способность сыворотки оказывать профилактический и лечебный эффект. Антитоксические сыворотки выпускаются после предварительной очистки от балластных белков. Это позволяет сконцентрировать содержащиеся в них антитела и снизить сенсибилизирующие свойства. Кроме антитоксических сывороток очистке подвергаются и антивирусные. Очистка и концентрация антитоксических лошадиных сывороток осуществляется по методу Диаферм-III, который включает стадии ферментативного гидролиза сывороточных белков пепсином, термоденатурации (580 0 0C), высаливания активных глобулинов сульфатом аммония, диализа и дополнительной очистки диализата от балластных белков. Каждая сыворотка контролируется также на физические свойства, стерильность, специфическую активность, безвредность. Лечебное действие антитоксических сывороток зависит не только от их активности, количества международных единиц в 1 мл, но и от явления авидности («жадности») – быстроты, полноты и прочности соединения между токсином и антитоксином.

Вакцины

Вакцины – это препараты, получаемые из бактерий, вирусов и других микроорганизмов или продуктов их жизнедеятельности для специфической профилактики и лечения инфекционных заболеваний. 

Классификация вакцин: I. Инактивированные (убитые): 1) корпускулярные (цельновирионные); 2) химические; 3) рекомбинантные. II. Живые. III. Комбинированные (комплексные). IV. Инновационные (перспективные вакцины будущего): 1) вакцины для лечения онкозаболеваний; 2) синтетические пептидные вакцины; 3) вакцины с искусственными адъювантами; 

4) ДНК-вакцины; 5) антиидиотипические вакцины; 6) вакцины, содержащие продукты генов гистосовместимости; 7) растительные вакцины; 8) мукозальные вакцины; 9)микрокапсулированные вакцины/

 

Инактивированные (убитые) вакцины готовятся из вирулентных штаммов бактерий и вирусов, обладающих полным набором необходимых антигенов. Для инактивации возбудителей применяют нагревание, обработку формалином, ацетоном, спиртом, которые обеспечивают надежную инактивацию и минимальное повреждение структуры антигенов. Высушивание вакцин обеспечивает высокую стабильность препаратов и снижает концентрацию некоторых примесей (формалина, фенола). Храниться вакцины должны при температуре 4–8°С, замораживание жидких убитых вакцин ведет к уменьшению активности препаратов и повышению их реактогенности за счет выхода отдельных компонентов в жидкую фазу. Убитые вакцины обладают в целом более низкой эффективностью по сравнению с живыми вакцинами, но при повторном введении создают достаточно стойкий иммунитет, предохраняя привитых от заболевания или уменьшая его тяжесть. Наиболее частый способ применения — парентеральный. Трудности производства инактивированных вакцин заключаются в необходимости строгого контроля за полнотой инактивации вакцин. Инактивированные вакцины включают следующие подгруппы: корпускулярные (цельновирионные), химические и рекомбинантные вакцины.

Корпускулярные вакцины (цельновирионные) представляют собой вирулентные штаммы бактерий и вирусов, инактивированные путем химического (формалин, спирт, фенол) или физического (тепло, ультрафиолетовое облучение) воздействия. Для их изготовления применяют, как правило, вирулентные штаммы микроорганизмов, поскольку они обладают наиболее полным набором антигенов, а для изготовления отдельных вакцин (например, антирабической культуральной вакцины) – аттенуированные штаммы. Корпускулярные бактериальные вакцины обладают высокой реактогенностью. Примерами корпускулярных вакцин являются коклюшная (компонент АКДС), антирабическая, лептоспирозная, гриппозная, цельновирионные инактивированные вакцины, вакцины клещевого и японского энцефалита, а также ряд других препаратов.

 

Вакцина антирабическая культуральная инактивированная сухая для иммунизации человека (КАВ)

Препарат представляет собой вакцинный штамм вируса бешенства Внуково-32, выращенный в первичной культуре почек сирийских хомяков, инактивированный ультрафиолетовыми лучами. Препарат – пористая масса в виде таблетки светло-желтого цвета с розовым оттенком. Стабилизаторы – желатоза и сахароза. Курс антирабических прививок назначает врач-рабиолог при укусах, царапинах, ослюнении кожных покровов или слизистых оболочек явно бешеным, подозрительным на бешенство или неизвестным животным. Препарат вводят в подкожную клетчатку живота, отступив от средней линии на 2-3 пальца или ниже пупка, в разные участки. В исключительных случаях препарат может быть введен в межлопаточную область. Растворенная вакцина представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость красновато-розового цвета без осадка и взвешенных частиц. Хранение разведенной вакцины не допускается Иммунитет, развивающийся в результате иммунизации, основан на явлении интерференции вирусов. Фиксированный вирус бешенства, имея более короткий инкубационный период, быстрее достигает клеток центральной нервной системы, но заболевания не вызывает. В ответ на внедрение вируса в клетках вырабатывается интерферон и ингибиторы, которые не дают возможности проникнуть в клетки мозга «дикому» вирусу.

ВАКЦИНА ЧУМНАЯ ЖИВАЯ СУХАЯ

 

Вакцина чумная живая сухая представляет собой взвесь живых бактерий вакцинного штамма чумного микроба ЕВ НИИЭГ, лиофилизированного в сахарозо-желатиновой среде с тиомочевиной или в сахарозо-желатиновой среде с глютаминовокислым натрием, тиомочевиной и пептоном или в лактозодекстриновой среде с тиомочевиной и аскорбиновой кислотой. Сухой препарат при осмотре невооруженным глазом должен иметь вид серовато-белой или желтоватой пористой массы и не содержать посторонних примесей. После добавления 0,9 %-ного (изотонического) раствора NaCl или 10 %-ного раствора лактозы препарат должен растворяться в течение 3 мин. с образованием гомогенной взвеси. Вакцина предназначается для предохранительных прививок против чумы.

Показания:

Показанием к проведению профилактических прививок является наличие эпизоотий чумы среди грызунов или возможность завоза инфекции больным человеком.

Режим дозирования:

Способы введения — вакцину применяют подкожно игольным или безыгольным методом, внутрикожно — безыгольным способом или накожно.

 

Вакцина БЦЖ

Представляет собой белую пористую массу, содержащую живые аттенуированные микобактерии туберкулѐза, впервые полученные Кальметтом и Жереном (отсюда и название – Бактерии (В) Кальметта (Calmett - С) и Жерена (Geren - G), сокращенная аббревиатура – ВСG – русская – БЦЖ), выращивают сначала на твѐрдой картофельной среде, а затем в жидких синтетических средах. С поверхности жидкой среды микробную плѐнку снимают, отмывают, гомогенизируют, разводят 1,5% раствором глютамината натрия, разливают в ампулы и сушат в вакууме из замороженного состояния.

Вакцину применяют для вакцинации новорожденных и для ревакцинации детей, подростков и взрослых, у которых наблюдается отрицательная проба на туберкулин. Первичную вакцинацию проводят в родильном доме всем детям на 5–7 день жизни. Перед применением вакцину растворяют стерильным изотоническим раствором хлористого натрия. Препарат вводят строго внутрикожно на наружную поверхность плеча, предварительно обработав 70 % спиртом. Ревакцинацию проводят в 7, 12 и 17 лет. Последующие ревакцинации взрослых до 30-летнего возраста проводят с интервалом в 5–7 лет. В результате прививки развивается искусственный, нестерильный иммунитет против туберкулѐза.

Инактивированная гриппозная вакцина (ИГВ)

Вакцина гриппозная инактивированная жидкая центрифужная А/H1N1/, А/H3N2/ и типа В представляет собой очищенный и концентрированный вирус гриппа, выращенный на 10-11-дневных куриных эмбрионах, инактивированный формалином и ультрафиолетовым облучением. Предназначена для профилактики гриппа у людей старше 18 лет при парэнтеральном введении. Вводят вакцину однократно подкожно в объеме 0,5 мл в область наружной поверхности плеча. Вакцинация проводится ежегодно в осенне-зимний период. Возможно интраназальное введение данной вакцины детям старше 7 лет и взрослым. В результате вакцинации развивается искусственный активный противомикробный иммунитет.

Наряду с достоинствами убитых (инактивированных) корпускулярных вакцин (безвредность, простота получения, транспортировки и хранения) существуют также и недостатки. В первую очередь это касается введения в организм большого количества веществ, не несущих специфичной антигенной нагрузки. Происходит отвлечение защитных сил организма от образования специфического иммунного ответа и, как следствие этого, достаточно большое количество побочных реакций и осложнений. Инактивированные вакцины обладают более низкой активностью, чем живые вакцины.

Живая паротитная вакцина

Живая паротитная вакцина на основе аттенуированного штамма вируса паротита, выращенного в культуре клеток эмбрионов японских перепелов. Массовая вакцинация в рамках календаря обязательных профилактических прививок (см. Приложение 1). Вакцину вводят подкожно. Вакцинация против паротита проводится также комбинированными вакцина- миMMRII или Приорикс (см. живую коревую вакцину) В России нет отечественной краснушной вакцины. Для профилактики заболевания применяются зарубежные препараты: 1) краснушная вакцина Рудивакс – представляет собой лиофилизат (Фран- ция); 2)краснушно-паротитно-коревые вакцины (MMRII и Приорикс). Краснушный компонент в этих вакцинах представляет собой живой аттенуи- рованный вирус, выращенный на культуре диплоидных клетках человека Массовая вакцинация в рамках национального календаря обязательных про- филактических прививок. Кроме того, рекомендуется прививать не болев- 13 ших краснухой женщин фертильного возраста. Вакцину вводят подкожно, допускается внутримышечное применение препарата. Поствакцинальный им- мунитет сохраняется на протяжении 20 лет.

Полиомиелитная живая вакцина Сейбина для приѐма внутрь

Представляет собой красно-оранжевую прозрачную жидкость, содержащую аттенуированные штаммы вируса полиомиелита I, II, III иммунологических типов. Вакцинные штаммы вируса полиомиелита каждого типа выращивают в первичных культурах клеток почечной ткани африканских зеленых мартышек. После накопления вируса клеточный детрит удаляют, а жидкость, содержащую вирус, фильтруют и разливают в инсулиновые флаконы и герметически закрывают. Вакцину используют для иммунизации людей против полиомиелита. Прививки проводят начиная с двух месячного возраста. Вакцину принимают внутрь в любое время. Одна прививочная доза жидкой моновакцины составляет 0,1 мл (2 капли), тривакцины – 0,2 мл (4 капли). Капли отмеряют шприцом или глазной пипеткой. Прививки детям первых трех лет жизни поводят ежегодно тривакциной троекратно с трехмесячными интервалами. В результате иммунизации живой вакциной Сейбина развивается искусственный, активный противовирусный иммунитет, а также и местный иммунитет.

 

Коревая живая сухая вакцина

Вакцина представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую, розовую или бесцветную жидкость, содержащую живой аттенуированный штамм вируса кори. Для изготовления вакцины используют вакцинный штамм вируса кори Л-16, полученный в Ленинградском институте им. Пастера. Вакцинный штамм вируса кори культивируют в первичной тканевой культуре почек новорожденных морских свинок, почек собак и др. После накопления вируса жидкость собирают, освобождают от тканевых элементов, разливают в ампулы и сушат в вакууме из замороженного состояния (лиофильная сушка). Для профилактики кори вакцинируют детей в возрасте от 10 месяцев до 8 лет. Перед употреблением вакцину разводят прилагаемым к каждой капсуле растворителем. Прививку проводят однократно путѐм подкожного введения 0,5 мл разведѐнной вакцины в область плеча или нижнего угла лопатки. Вакцину можно вводить внутрикожно с помощью безыгольногоинъектора. В этом случае вакцину разводят в 5 раз меньше. В результате введения вакцины развивается искусственный активный противовирусный иммунитет.

Холерная вакцина

Представляет собой беловатую или темноватую пористую массу, состоящую из убитых холерных вибрионов. Для приготовления вакцины штаммы классических и Эль-Тор холерных вибрионов серотипа Инаба и Огава выращивают на плотной среде, смывают физиологическим раствором и убивают нагреванием или формалином, разливают в ампулы и сушат в вакууме из замороженного состояния или выпускают в жидком виде. Вакцину применяют для профилактики холеры. Прививают против холеры взрослых и детей старше 2-х лет два раза с 7-10-дневным интервалом. Дозы препарата вводят соответственно возрасту прививаемого. При первой прививке детям от 2 до 5 лет вводят 0,3 мл вакцины, при второй – 0,5 мл, от 5 до 10 лет, соответственно – 0,5 и 0,7 мл, от 10 до 15 лет – 0,6 и 1 мл и старшим детям – 1 – 1,5 мл. Ревакцинацию проводят через 6 месяцев однократно. В результате вакцинации развивается искусственный активный антимикробный иммунитет.

 

Токсин для реакции Шика

Дифтерийный токсин Шика применяется для выявления восприимчивости детей к дифтерии. Для постановки реакции Шика применяют разведенный дифтерийный токсин, содержащий 1/40 ДLМ для морской свинки в 0,2 мл. Токсин вводят внутрикожно в количестве 0,2 мл в среднюю часть ладонной поверхности предплечья. Реакция Шика в настоящее время – это единственная реакция флокуляции, которая выполняется на людях.

У неимунных детей на месте введения токсина появляется положительная кожная реакция в виде инфильтрата и гиперемии. Сырьѐм для изготовления токсина для реакции Шика служит очищенный дифтерийный токсин, который готовят из нативного токсина, выдержанного не менее двух лет, с точно установленной на морских свинках минимальной смертельной дозой. В 1 мл нативного токсина должно заключаться от 250 до 1000 Dlm. Дифтерийный токсин готовят так же, как и при получении анатоксина. Очистка токсина осуществляется с помощью стерильного насыщенного раствора сернокислого аммония, добавляемого из расчета 240 мл на 100 мл токсина. Выпавший при этом осадок отделяют с помощью центрифугирования, растворяют 0,4% раствором двууглекислого натрия и диализуют через целлофановую плѐнку в проточной водопроводной воде при температуре не выше 15°С в течение 48 часов, а затем в дистиллированной воде на холоде около 18 часов. По окончании диализа токсин стерильно фильтруют через бумагу, добавляют стерильного двууглекислого натрия до pH=7,6, определяют содержание антигенных единиц в 1 мл, разводят боратно-буферным раствором до содержания 40-45 Dlm/мл и стерилизуют фильтрованием через свечи типа Шамберлена.

АНАТОКСИНЫ

Анатоксин – экзотоксин, лишенный токсических свойств и обладающий антигенной и иммуногенной активностью. Анатоксины готовятся из экзотоксинов различных видов микробов. Токсины обезвреживают путем длительной обработки их формалином 0,3–0,8% концентрации в нейтральной среде при температуре 35–400С в течение 3-4 недель, при этом они не теряют иммуногенные свойства и способность вызывать образование антител (антитоксинов). Очищенный oт балластных веществ и концентрированный анатоксин сорбируют на гидроксиде алюминия. В случае недостаточной инактивации анатоксина могут возникать признаки интоксикации, характерные для данного заболевания. Готовые препараты используются для активной иммунопрофилактики токсинемических инфекций. Анатоксины обеспечивают формирование антитоксического иммунитета, который, естественно, уступает иммунитету, образующемуся после перенесенного заболевания, и не предотвращают появление бактерионосительства. В связи с этим не прекращаются попытки создания более сложных вакцин, содержащих, кроме анатоксина, другие антигены бактерий. В настоящее время для практических целей выпускают анатоксины дифтерийный, столбнячный, стафилококковый, ботулинический А, В, Е и газовой гангрены.

Дифтерийный анатоксин

Для получения дифтерийного анатоксина применяют метод кислотносолевого осаждения обезвреженного формальдегидом и нагреванием токсина, полученного при культивировании возбудителей дифтерии. В России производится адсорбированный дифтерийный анатоксин с уменьшенным содержанием анатоксина (АД-М-анатоксин). Уменьшение количества дифтерийного анатоксина в препарате рассчитано на предупреждение развития аллергических реакций, которые иногда появляются при бустериммунизации. АД-М-анатоксин представляет собой дифтерийный анатоксин, сорбированный на гидроокиси алюминия. Консервант – мертиолят в концентрации 0,01%. Данный препарат – это гомогенная суспензия белого или слегка желтоватого цвета. Препарат вводят внутримышечно в верхний наружный квадрант ягодицы или передне-наружную область бедра в дозе 0,5 мл. АД-М-анатоксин предназначен для профилактики дифтерии у детей с 6-летнего возраста, подростков и взрослых. Полный курс вакцинации (две вакцинации АД-М-анатоксином с интервалом в 30 дней и ревакцинация через 6–9 месяцев) создает стойкий иммунитет у 95% привитых на протяжении 7–10 лет.

Столбнячный анатоксин

Препарат представляет собой фильтрат бульонной культуры столбнячной палочки, обезвреженный длительным сочетанным воздействием формалина и тепла. Для этого к стерильному токсину добавляют 0,3-0,4% формалина и обезвреживают при температуре 37-38С в течение 21–25 дней. Очистка столбнячного анатоксина производится методом осаждения соляной кислотой. Осадок антигена растворяется в физиологическом растворе и фильтруется через бактериальные фильтры, а затем адсорбируется на геле гидроокиси алюминия. Консервант – мертиолят в концентрации 0,01%. АС-анатоксин применяется с целью активной иммунизации против столбняка, проводимой в рамках плановых прививок и для экстренной профилактики столбняка: при ранениях или хирургических оперативных вмешательствах, связанных с тяжелой травмой, при обморожениях и ожогах второй, третьей и четвертой степеней, внебольничных абортах, родах вне медицинских учреждений, гангрене или некрозе тканей любого рода, абсцессах, укусах животными, проникающих повреждениях желудочно-кишечного тракта. Полный курс иммунизации АС-анатоксином, включающий первичную вакцинацию и ревакцинацию, создает у привитых надежную защиту против столбняка. Препарат вводят подкожно в подлопаточную область. Полный курс вакцинации АС-анатоксином (для лиц, ранее не привитых против столбняка) состоит из двух прививок по 0,5 мл каждая с интервалом 30–40 суток и ревакцинации через 6–12 месяцев той же дозой. Последующие ревакцинации проводят каждые десять лет однократно дозой 0,5 мл. Столбнячный анатоксин (АС-анатоксин), используемый в виде моновакцины или в качестве одного из компонентов комплексной вакцины, вызывает образование нейтрализующих антител класса IgG

АЛЛЕРГЕНЫ

 

Аллерген – разновидность антигена, индуцирующая аллергические реакции в сенсибилизированном организме. Аллергены подразделяют на две основные группы: неинфекционные и инфекционные, которые в свою очередь подразделяются на ряд подгрупп: 1. Инфекционные аллергены: а) бактериальные; б) грибковые. 2. Неинфекционные аллергены: а) ингаляционные – растительного (компоненты пыльцы, спор) и животного (перхоть животных, фрагменты клещей как главный аллергенный компонент пыли) происхождения; б) пищевые (компоненты яиц, молока, рыбы, мяса, ягод, а также пищевые добавки); в) лекарственные (антибиотики, прежде всего пенициллин, салицилаты, сульфаниламиды, витамины и др.); г) промышленные (полимеры, пестициды и др.).

 

Препараты аллергенов применяют для диагностики и (или) лечения аллергических заболеваний, вызванных агентами инфекционной и неинфекционной природы. В настоящее время промышленность выпускает стерильные водно-солевые экстракты аллергенов; экстракты аллергенов, содержащие глицерин; экстракты аллергенов, сорбированные на частицах гидроокиси алюминия. Экстракты могут содержать один или несколько аллергенов. Так, с диагностическими целями для выявления сенсибилизации к неинфекционным аллергическим агентам выполняют кожные пробы, а также проводят провокационные пробы. Аллергены с целью диагностики (для выявления сенсибилизации организма к бактериальным и грибковым аллергенам) вводят строго внутрикожно. С лечебными целями при проведении специфической иммунотерапии аллергены вводят подкожно. АСИТ - аллергенспецифическая иммунотерапия (десенсибилизация) – метод лечения аллергических заболеваний, заключающийся во введении возрастающих доз аллергена с целью снижения иммунологической реактивности. Впервые этот метод лечения был предложен Нуном в 1911 г. Установлено, что десенсибилизация эффективна при сезонном аллергическом рините, при аллергии на яды перепончатокрылых, менее эффективна при бронхиальной астме и почти неэффективна при атопическом дерматите, пищевой аллергии и крапивнице. Эффект АСИТ обусловлен следующими механизмами: 1) образованием блокирующих антител – IgG, связывающих аллерген (антиген), но не вызывающих аллергических реакций; 2) снижением уровня антител класса IgЕ; 3) снижением способности базофилов и тучных клеток высвобождать гистамин и др. медиаторы под действием аллергена. В последние десятилетия во многих странах мира получили распространение и специально разработанные формы аллергенов для постановки диагностических тестов invitro. К этим тестам относятся такие методы, как RAST (радиоаллергосорбентный тест), MAST (радиоиммунный тест), иммуноблотинг, различные варианты иммуноферментного анализа (ИФА). В качестве лечебных форм за рубежом, особенно в детской практике, широкое применение нашли пероральные аллергены. В качестве консервантов в этих препаратах применяются различные носители, такие, как глицерин, метил- ипропилпарабен и даже медленно растворяющийся сахар-рафинад. Особую форму лечебных аллергенов представляют аллергоиды, которые, несмотря на полное сохранение иммуногенности, реже вызывают местные реакции, т.к. их аллергенная активность значительно снижается (до 10 и более раз). Для получения аллергоидов экстракты аллергенов обрабатывают формалином, в качестве адъюванта добавляют лизин. Аллергоиды более активно стимулируют выработку блокирующих антител, чем водные экстракты аллергенов. Несомненный интерес представляют аллергены конъюгированные с иммуномодуляторами (в частности, с полиоксидонием) В данном пособии наиболее подробно рассмотрена группа инфекционных аллергенов.

Гонококковая вакцина

Несмотря на то что данный препарат относится к вакцинам и предназначен для лечебных целей при затяжных и хронических формах гонореи, он может быть использован также и как аллерген при затрудненной диагностике гонореи. При постановке аллергической реакции его используют внутрикожно. Препарат поливалентен, приготовлен из штаммов, свежевыделенных от больных с различными формами гонореи. Действующее начало препарата – антигенный комплекс убитых гонококков.

Антраксин

Для выявления аллергического состояния у больных сибирской язвой, переболевших, привитых, применяется препарат, приготовленный путѐм слабого гидролиза культуры вакцинного штамма СТИ–1 (санитарно-технический институт) в вегетативной фазе после предварительной термической денатурации балластных белков. Действующим началом антраксина является белково– полисахаридно–нуклеиновый комплекс. Аллерген вводят внутрикожно однократно в дозе 0,1 мл в среднюю часть сгибательной поверхности предплечья. У людей, инфицированных сибиреязвенным микробом или иммунизированных сибиреязвенной вакциной, в месте введения антраксина через сутки после введения возникает гиперемия и инфильтрация кожи и подкожной клетчатки, интенсивность которой зависит от степени сенсибилизации и тяжести заболевания. Общая реакция на введение антраксина, как правило, отсутствует.

Дизентерин

Препарат, содержащий раствор белков дизентерийных бактерий Флекснера или Зоне, полученных путем гидролиза бактериальных клеток в кислой среде при 120С. Используется для клинического подтверждения диагноза дизентерии у взрослых и детей в комплексе с другими методами исследования. Вводится строго внутрикожно. Результат учитывается по общепринятой методике.

Туберкулин

Очищенный порошок туберкулина представляет собой препарат, полученный путѐм ультрафильтрации или суперцентрифугирования с трихлоруксусной кислотой, при обработке спирто