Дифференциация бактерий, принадлежащих к роду Р seudomonas

	Группа «А»						Группа «В»			Группа «С»	Группа «D»
	Группа fluorescens			Группа stutzeri		Группа alcali-genes	Группа pseudomallei			Группа acidovo-rans	P. malto-philia
	P. aeruginosa	Р. fluores-cens	P. putida	P. stutzeri	P. mento-cina		P. pseudo-mallei	P. mallei	P. cepacia (multivo-rans)
Кол-во ресничек	1	>1	>1	1	1	>1	>1	0	>1	>1	>1
Культивирование при 4ºС	-	+	d	-	-	-	-	-	-	-	-
Культивирование при 41ºС	+	-	-	+(40ºС)	+	+	+	+	+(40ºС)	+	+
Пиовердин	+	+	+	-	-	-	-	-	-	-	-
Пиоцианин	+	d	-	-	-	-	-	-	-	-
Оксидаза	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+	-
Утилизация нитратов	+	d	-	+	+	-	+	d	-	-	-
Использование в метаболизме глюкозы	+	+	+	+	+	d	+	+	+	-	+
Аргининдигидро-лаза	+	+	+	-	+	+	+	+	-	-	-
Желатина	+	+	-	-	-	d	+	+	d	-	+
Гидролазы: амидон	-	-	-	+	-	-	+	d	-	-	-
лецитин	-	+	-	-	-	-	+	d	d	-	-

Обозначения: + - положительно

                     - - отрицательно

                    d - и то, и другое.

Эпизоотологические данные. БактерииPseudomonas aeruginosa довольно широко распространены в природе, и как условно патогенные организмы могут персистировать в организме взрослой утки (чаще желудочно-кишечном тракте), не вызывая явных патогенных изменений.

Higgins D. (1993) отметил широкое распространение псевдомоноза в странах Юго-Восточной Азии, где по-прежнему сохраняется максимальная плотность уток (5).

Вспышка болезни в частном хозяйстве совхоза «17 МЮД» Владимирской области (2001г.) показала, что источником возбудителя оказалась взрослая птица (утки и гуси). Исследования, проведённые Бурайкиной И.И. и Шагуриной И.В. (июль 2001), уточнили, что возбудитель можно изолировать из кишечника, а также костного мозга и крови павшей птицы. Массовое заболевание и гибель наблюдали среди мускусных утят до 20-суточного и гусят до 25-суточного возраста. Летальность среди утят составляла 72%, а гусят – 85%.

В этом же году, по сообщению Рисований В.I., в Полтавской области Рs. aeruginosa была изолирована от павших перепелят двух ферм, ранее благополучных по данной болезни [4].

Кроме птиц, болезнь возможно отметить и у других видов животных: млекопитающие, например, болеют с признаками гастроэнтерита, септицемии, мастита и эндометрита (2).

Течение и симптомы болезни. Инкубационный период составляет от нескольких часов до 25 суток. Чаще отмечают угнетение, паралич ног («птица сидит»), активную диарею с присутствием газа. После регистрации клинической картины в течение 4-25 суток погибает от 20 до 60% заболевших. В последующем, к 20-30-суточному возрасту, птица становится истощённой, малоподвижной и мало принимающей корм. По весу она в 1,5-3 раза меньше здоровой (контрольной).

Утята-реконвалесценты старше 35-40 суток остаются малорослыми, гибель среди них не отмечают (1, 2).

Патогенез. Воздействие синегнойной палочки обусловлено высокой активностью экзо - и эндотоксинов на организм утят.

Патологоанатомические изменения характерны для токсического воздействия; отмечают воспаление кишечника, дряблость консистенции, кровенаполненность и отёчность паренхиматозных органов.

Диагноз и дифференциальная диагностика. Постановка диагноза на псевдомоноз по эпизоотологическим данным, симптомам проявления и патологоанатомическим изменениям затруднительна. В связи с этим большее предпочтение отдаётся бактериологическим тестам.

Из проб органов (костного мозга, содержимого воздухоносных мешков, печени) высевают на селективные питательные среды (ЦПХ с ацетамидом, Кинг А – для образования пиоцианина, Кинг Е – для флуоресцида). Необходимо учитывать, что радужный лизис является характерным признаком для Рs. aeruginosa.

Для дальнейшей индикации культур чаще применяют тесты по определению циоцианина, разжижения желатины, роста при плюс 42ºС и др. (1, 2, 6).

Иммунитет. Не изучен.

Лечение. Назначается после получения результатов антибиограммы, учитывая, что антибиотики пенициллинового и тетрациклинового рядов угнетают антагонистов Рs. aeruginosa – бифидумбактерии, лактобациллы и энтерококки (2, 6).

Профилактика и меры борьбы. Специфическая профилактика отсутствует. Общие меры профилактики заключены в создании необходимых санитарных условий по ограничению возникновения псевдомоноза.

    При регистрации болезни птица подлежит лечению или убою.

НПП «АВИВАК» (2009г.) производит инактивированную вакцину против пастереллеза, колибактериоза и сальмонеллёза птиц, включительно водплавающих.

Список литературы

1. Байдевлятов, А.Б. Псевдомоноз / А.Б. Байдевлятов // Справочник по болезням сельскохозяйственной птицы. – Киев: Урожай, 1992. – С. 96-97.
2. Мишанин, Ю.Ф. Справочник по инфекционным болезням животных / Ю.Ф. Мишанин. – Ростов-н/Д.: МарТ, 2002. – 576 с.
3. Рисований, В.I. Випарки псевдомонозу перепелiв на фермах окремих областей Украiни / В.I. Рисований // Птахiвництво: мiжвiд. тем. наук. зб. Вип. 51. – Борки, 2001. - С. 571-573.
4. Супотницкий, М.В. Микроорганизмы, токсины и эпидемии / М.В. Супотницкий. – М., 2000. – 376 с.
5. Higgins, D. Asia in perspective. Infectious disease of ducks – 1 / D. Higgins // Poultry International. – 1993. – Vol. 32, N 10. - P. 29-60.
6. Pilet, Ch. Bacteriologie medicale et veterinaire. Systematiqye bacterienne / Ch. Pilet, I.-L. Bourdon, B. Toma. – Doin ed. – Paris, 1980.

 

 

ПСЕВДОТУБЕРКУЛЁЗ

 

Псевдотуберкулёз – редко регистрируемая латентная или острой формы болезнь многих видов птиц, характеризующаяся истощением, одышкой, параличами и гибелью.

Историческая справка. Higgins D. (1993) сообщает о регистрации псевдотуберкулёза в странах Юго-Восточной Азии, что неоднократно подтверждалось изоляцией Yersinia pseudotuberculosis. Информация о наличии псевдотуберкулёза уток в России за последние годы отсутствует (2).

Возбудитель. Мишанин Ю.Ф. (2002) при описании болезни уточняет, что паратуберкулёз животных вызывают два вида бактерий – коринобактерии и иерсинии. Утки чувствительны ко вторым. Y. рaratuberculosis – мелкие (2х1 мкм) полиморфные, грамотрицательные, биполярные бактерии, не образующие капсулу. Растут на обычных питательных средах – на МПА через 24 часа образуются красноватые колонии. Они содержат антигены, активные в РДП, РСК и РА. Все представители рода Yersinia содержат общий R-антиген (1).

Экономический ущерб. Неизвестен.

Эпизоотологические данные. К Y. рseudotuberculosis наиболее восприимчивы куры, утки, индейки, голуби, фазаны, зайцы, морские свинки, крысы, обезьяны и другие животные. Болезнь проявляется спорадически. Резервуаром источника болезни признана дикая птица и другие животные.

Течение и симптомы болезни Для водоплавающих и околоводных птиц не описаны..

Патогенез. Не изучен.

Патологоанатомические изменения. Не изучены.

Диагноз и дифференциальная диагностика. Диагностика псевдотуберкулёза основывается на результатах бактериологических тестов. Вероятно, его необходимо отличать от туберкулёза, стрептококкоза и спирохетоза.

Иммунитет. Не изучен.

Профилактика и меры борьбы. Не разработаны.

 

Список литературы

1. Мишанин, Ю.Ф. Справочник по инфекционным болезням животных / Ю.Ф. Мишанин. – Ростов-н/Дону: МарТ, 2002. – 576 с.
2. Higgins, D. Asia in perspective. Infectious disease of ducks – 1 / D. Higgins // Poultry International. – 1993. – Vol. 32, N 10. - P. 29-60.

 

РЕОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ

Реовирусная инфекция уток (инфекционная бурсальная болезнь птиц) – довольно широко распространенная инфекция уток, характеризующаяся поражением сумки Фабрициуса и гибелью птицы до 20%.

Историческая справка. В 1972 году во Франции был изолирован реовирус К (вирус Барбари), широко распространенный в специализированных утиных хозяйствах. У больных уток отмечали отказ от корма, жажду и расстройство движения. Гибель наступала внезапно (2).

МсFerran J.B. (1980) описал хроническую болезнь утят 3-5-недельного возраста на крупных фермах Австралии. Гистологические изменения в органах павших птиц показали сходство с инфекционной бурсальной болезнью (ИББ) кур (7).

McFerran J.B. (1980), Wilcox et al. (1983) выявили специфические антитела у черных уток к реовирусу типа 1, а также у гусей к реовирусу типа 2. Jackwood и др. (1982) обнаружили специфические антитела у индеек к бирнавирусу типа 2, дополнительно у них регистрировали и ринотрахеит. Реовирус изолировали от мускусных уток с 30% заболеваемостью и 20% гибелью. Болезнь характеризовалась некрозами в печени. В дальнейшем она была воспроизведена в экспериментальных условиях на мускусных утятах путем внутримышечного введения вирусной суспензии бурсы.

В США Olson N.O. (1993) сообщил, что Yamada et al. (1979) установили высокую чувствительность уток к реовирусу цыплят, а Calnek (1982) изолировал реовирус от клинически здоровых утят. Изоляты реовируса не отличались от «куриных» аналогов по своим основным морфологическим признакам.

Контримавичус Л.М. в период с 1963 по 1972 год от гусят, больных парвовирусной инфекцией, выделила штаммы «Csoz» «Ю», «БС» и неклассифицированный штамм «КЛ» реовируса, которые способны были репродуцироваться также в УЭ и КЭ (2).

Реовирус, как свидетельствуют McFerran J.B. et al. (1976), был неоднократно изолирован от гусей с признаками парвовирусной инфекции и с поражением кишечного тракта и диареей, а также от клинически здоровых уток-малардов (7).

Gough (1988) сообщил об изоляции реовируса от голубей, фазанов, орнаментальных декоративных уток и других экзотических птиц. Патогенность выделенных изолятов не уточнена.

В 70-е годы в США и Израиле реовирус выделяли от индеек с признаками рвоты, депрессии и 30% гибелью заболевших (6)..

Основываясь на вышеизложенных фактах, многие исследователи пришли к выводу, что водоплавающие птицы болеют реовирусной инфекцией, подобной ИББ кур. Выделение большого количества изолятов бирнавируса типов 1 и 2, а также выявление к ним специфических антител у разных видов (подвидов) птиц, в том числе уток, говорит о широком распространении в разной степени патогенных форм возбудителя во многих странах, в том числе в России.

В связи с неоднократным упоминанием о сходстве реовирусной инфекции уток с подобной кур и индеек, предлогается краткая отличительная информация об ИББ и теносиновите кур.

ИББ - высококонтагиозная болезнь кур, характеризующаяся поражением лимфоидной ткани, в частности, разрушением лимфоцитов в фабрициевой сумке, селезенке, тимусе и железах кишечника, что в целом приводит к смерти до 70% особей. Утки и индейки являются резервуаром вирулентного вируса, который дополнительно распространяется и клещами.

Теносиновит кур тоже обладает высокой контагиозностью, в основном для молодняка кур. Характеризуется задержкой роста и развития, гастритом, энтеритом, поражением респираторного тракта, теносиновитом, артритами и летальностью до 30%.

Экономический ущерб от реовирусной инфекции уток не изучен, тогда как при ИББ и теносиновите кур он значителен.

Возбудитель. С учетом данных Mс Ferran J.B. (1993) о регистрации ИББ у уток, вероятно, для сравнительной оценки следует охарактеризовать изоляты реовируса не только уток, но и других видов птиц, при этом отразить его основные морфологические и биологические свойства.

Вирусы, выделенные от коммерческих уток и индеек в США и Великобритании, идентифицированы в РН и отнесены к серотипам 1 и 2 бирнавируса.

Вирусные частицы реовируса уток, выделенного в США (1984), обладали икосаэдрической формой, размером от 70 до 80 нм. Они высокорезистентны; выдерживают воздействие эфира в принятых режимах, температуры 60⁰С в течение 8-10 часов и 56⁰С –22-24 часов. Вирус не обладает гемагглютинирующей активностью и гемадсорбирующим свойством. Удовлетворительно репродуцируется в первичных культурах клеток почки и печени КЭ: через 3-4 пассажа вызывает ЦПД. Вирус размножается в культурах клеток Vero, BHK-21/13 и 1ТТ. Для изоляции вируса используют наслоение на ХАО и введение материала в желточный мешок КЭ. Гибель эмбрионов наступает на 7-8 сутки, с признаками недоразвития тела, увеличения печени, образования в селезенке некротических очагов.

Заражение в желточный мешок КЭ по эффективности равнозначно выделению реовируса на культуре гепатоцитов эмбрионов кур.

Известны два серотипа бирнавируса ИББ: первый включает большое количество подтипов, которые патогенны для кур и индеек, тогда как второй, чаще изолируемый от индеек, апатогенен. Вирулентность штаммов первого серотипа далеко не равнозначная – некоторые безвредны для птиц, тогда как другие вызывают болезнь с летальностью до 70%, а в ассоциации с колибактериозом или сальмонеллезом - до 90%. В настоящее время предположительно насчитывается 11 серотипов, которые можно выявить в РН, РДП, ИФА и других тестах.

Вирионы вируса кур имеют размер около 75 нм, из них на оболочку приходится до 15 нм.

Вирус ИББ устойчив к эфиру, хлороформу, рН 2,0 и инкубации при 56°С в течение 5 часов или 60°С – 30 минут, а также инактивируется от воздействия рН 12.0 или нагревания до 70°С – 30 минут.

Вирус репродуцируется в первичных культурах клеток фибробластов КЭ, почек, легких, печени и тестикулов кур. Наиболее подходящей является культура клеток почки 2-6-недельных цыплят кур. В клетках печени адаптированный вирус через 24-48 часов образует бляшки.

Бирнавирус репродуцирует в КЭ после введения в аллантоисную пролость, желточный мешок и наслоения на ХАО. Пик максимального накопления вируса - на третьи сутки, а гибель - на седьмые.

Некоторые изоляты вируса ИББ размножаются в культурах клеток: фибробластов КЭ, РК-13 (кролика), МДВК (КРС), BSC-1 и Vero (почка зеленой мартышки). Бляшки образуются в фибробластах под агарозным покрытием и PK-13. Вирус ИББ тип 1 развивается в фибробластах кур, в то время как вирус тип 2 размножается в культуре клеток почки цыпленка и фибробластах УЭ или индеек. При этом клетки почек индеек менее чувствительны, где вирус также индуцирует ЦПД, как и в фибробластах эмбрионов уток и индеек.

McNalty M.S. (1979) сообщил, что культуры клеток КЭ более чувствительны к реовирусу, чем культуры из эмбрионов индеек и уток.

Реовирусы индеек, уток и клинохвостых орлов обладают инфекционностью для КЭ.

Для адаптации изолятов вируса в системах, как правило, необходимо более 4-5 пассажей. Подобное количество пересевов требуется и перевиваемых культур клеток – Vero и ВНК-21/13.

Контримавичус Л.М. (1963-1972) установила, что штаммы реовируса гусей обладали широким спектром патогенности и вызывали гибель утиных, куриных и гусиных эмбрионов. Титр вируса штамм «БС» в КЭ составлял 6,13 lg ЭЛД₅₀/0,3см³ «Ю» - 4,84, а «КЛ» - 6,11 ЭЛД₅₀/0,2см³ .

У павших КЭ выявляли гиперемию, отек тельца, кровоизлияния в виде гематом на лапках ног. Штаммы «Б», «Ю» и «КЛ» были менее резистентны, чем парвовирус – они инактивировались при температуре плюс 60°С в течение 15 минут (а не 60 минут), штаммы вируса были устойчивы к эфиру, хлороформу и трипсину, не агглютинировали эритроциты многих животных.

Bumstead N. (1998) дополняет, что бирнавирус ИББ содержит двухцепочечную РНК с двухсегментированным геномом. Вирус высокоспецифичен для созревающих В-лимфоцитов и вызывает их цитолиз, в частности, и в фабрициевой сумке цыплят 3-5-недельного возраста.

Эпизоотологические данные. Реовирусная инфекция уток зарегистрирована во многих странах мира, на трех континентах – в Америке, Европе и Австралии. Скорее всего, реовирусы, в данном случае, бирнавирусы, широко распространены среди уток, индеек, кур, гусей, орлов и других видов птиц. Вероятно, вирус длительное время персистирует в организме птиц, сохраняя свою вирулентность. Бирнавирус ИББ распространяется дополнительно дикой птицей и клещами. В объектах внешней среды сохраняется более 4 месяцев. Передача возбудителя происходит алиментарным или трансовариальным путем. Отмечена перекрестная контагиозность реовирусов разных видов птиц: передача возбудителя от индеек курам и наоборот. У индеек находят те же патологоанатомические изменения, что и у цыплят. Вирус изолирован из кишечника и связок мышц павших индюшат и цыплят.

Бирнавирус тип 1, который в основном инфицирует кур, можно изолировать от уток и индеек. Известно, что бирнавирус тип 2 широко распространен среди индеек в Великобритании и США. Как подтверждение этому, специфические антитела находят во многих стадах индеек и уток указанных стран. Часто, используя РДП, антитела к вирусу находили у гусей и уток в Австралии. Здесь к бирнавирусу тип 2 были обнаружены вируснейтрализующие антитела у гусей.

Неоднократные тесты по идентификации изолятов реовируса уток, проведенные в разных странах, показали не только их морфологическую и антигенную идентичность с возбудителем ИББ, но и адекватное воздействие на птицу.

Течение и симптомы. Отмечены разные формы болезни: сверхострая во Франции (1972), острая в США и Ирландии (1997), хроническая в Австралии (1993) и бессимптомная у водоплавающих в СССР (1972) (1, 5, 6, 7).

При сверхострой форме болезни птиц регистрировали расстройство движения, жажду, отказ от корма и внезапную гибель. Информация о летальности отсутствует.

Острую форму наблюдали в США у индеек и уток. Клинические признаки при острой и хронической формах были близки тому, что отмечают у цыплят кур: исхудание и гибель заболевших до 10%, а по некоторым сведениям – до 30% птицы. Постоянно выявляют специфические антитела к бирнавирусу тип 2 и аналогичные гистологические изменения в бурсе (McFerran J.B., 1993) (7). 

Инкубационный период при ИББ кур в зависимости от способа заражения составляет от 1 до 15 суток.

При острой форме отмечают неожиданный белый водянистый понос, депрессию, взъерошенность и перемежающий тремор. Через 2-3 суток после проявления симптомов наступает гибель. Болезнь продолжается 7-9 суток с летальностью до 70%.

Подострая и субклиническая формы характеризуются медленным ростом птицы. Летальность составляет не более 5%.

При теносиновите кур чаще отмечают задержку в росте и развитии цыплят, закупорку клоаки, гастрит, энтерит, нарушение костной ткани, диарею, теносиновит, артрит и слабое оперение. При 100% заболеваемости гибель может достигать 30%.

Патогенез. Не изучен.

Патологоанатомические изменения. McFerran J.B. (1993) определил, что гистологические изменения в бурсах цыплят кур и уток аналогичны. Информация об изменениях в органах утят весьма ограничена (7). Smyth I.A. (1997) показал повреждения бурсы большинства уток до 7-суточного возраста и старше, содержащихся в неудовлетворительных условиях. Идентичные изменения воспроизведены на односуточных утятах, но не цыплятах кур, путем парентерального введения гомогената пораженной бурсы. Тестирование пораженной бурсы уток методом МФА (для ИББ кур) было отрицательным (6).

Структурное изучение некротических фолликул показало большое количество реовирусоподобных частиц. Реовирус был изолирован из пораженной бурсы и в экспериментальных условиях вызывал поражения, подобные наблюдаемым в естественных условиях.

Во Франции (1972) Гудри и др. у экспериментально зараженных утят находили перикардит, перигепатит, фокусы некроза в печени, фибринозные наложения на ней и аэросаккулит. Гистологически выявлены обширные поражения миокарда, множественные зоны отеков и очаги некроза под эндокардом (1).

У цыплят кур, больных ИББ, в отличие от утят, чаще наблюдают истощение, тусклый и взъерошенный перьевой покров, точечные и полосчатые кровоизлияния в бедренных мышцах и на слизистой оболочке желудка. Стенки кишечника утолщены. Печень увеличена. Сумка Фабрициуса воспалена и увеличена в 2-2,5 раза. Внутри неё кровоизлияния, наличие фибрина и/или кровянистого сгустка. В почках содержится большое количество уратов, канальцы белого цвета (для дифференциальной диагностики необходимо учитывать проявление гепатита кур энтеровирусной этиологии).

В КЭ высоковирулентные штаммы возбудителя индуцируют гиперемию кожи, кровоизлияния во внутренних органах и гибель на 4-15 сутки после инокуляции.

Диагноз и дифференциальная диагностика. Постановка диагноза основывается на эпизоотологических данных, результатах выявления основных признаков болезни, изоляции возбудителя инфекции и его идентификации.

При установлении диагноза на реовирусную инфекцию уток необходимо обратить внимание на следующие аргументы:

· болезнь утят может сопровождаться одновременным заболеванием индеек, гусей, цыплят кур и орлов; реовирусы уток репродуцируются в бурсе Фабрициуса утят до 3-5-недельного возраста, содержащихся в неблагоприятных условиях;

· реовирусы (бирнавирусы) тип 1 и 2 индуцируют в организме уток выработку вируснейтрализующих антител, вероятно, выявляемых методом ИФА, предназначенном для исследования сывороток крови кур;

· реовирусы вызывают патологоанатомические изменения в эмбрионах кур, уток и гусей, а также цитопатическое действие в первичных культурах клеток печени, почек, и других органов эмбрионов и молодняка птиц;

· в экспериментальных условиях болезнь можно воспроизвести на утятах односуточного возраста после внутримышечного введения 10-20% суспензии бурсы больных и павших утят;

· в связи с достаточно крупным размером вирионов реовируса его легко обнаружить электронно-микроскопическим методом, что часто используется за рубежом.

При диагностировании ИББ и теносиновита применяют следующие методы:

· РН, РДП, непрямой МФА и ИФА для выявления специфических антител;

· РДП, МФА, ПЦР, непрямой ИФА для обнаружения компонентов вирионов бирнавируса;

· РН, РДП, непрямой МФА, ИФА и ПЦР для идентификации изолятов бирнавируса после вирусовыделения на цыплятах, КЭ и первичных культурах клеток почки и печени эмбрионов кур или цыплят.

У цыплят специфический антиген возможно обнаружить в сумке Фабрициуса через 24 часа после инъекции вируса. Максимальное накопление его происходит на 3-5 сутки, тогда как через 2 недели антиген уже не выявляют. Для определения уровня специфических антител используют РНГА, ИФА, РДП и РН. Вируснейтрализующие антитела сохраняются в сыворотке крови до 15 месяцев.

Для выявления специфических антител к птичьему бирнавирусу ИББ применяют РДП, РН методом редукции бляшек в микрокультуре, РСК, ИФА и непрямой ИФА, Типоспецифические антитела выявляют в РН, а групповые – в остальных серологических тестах. РДП – легко воспроизводимый метод, но менее чувствительный, чем РН; преципитирующие антитела обладают активностью более короткое время, чем нейтрализующие. Трансовариальные (желточные) антитела защищают цыплят от орального заражения.

Диагностику теносиновита кур проводят следующим способом. Из пораженной ткани связок готовят стерильную 10% суспензию, которую после осветления вводят в желточный мешок 5-7-суточных КЭ. В 1 пассаже гибель эмбрионов наступает на 4-15 сутки. Вместо эмбрионов (или одновременно) могут быть использованы первичная культура клеток печени КЭ, а также 1-2-недельные цыплята кур, которым инокулируют исходный материал в лапу. Идентификацию выделенного агента проводят в РДП, РН, ИФА, ПЦР и другими методами.

Известно, что при парентеральном заражении преципитирующие антитела возможно выявить в сыворотке крови спустя 2-3 недели, а при контактном – на 30-40 сутки. После естественного заражения в РДП реагируют от 10 до 85% проб сывороток крови переболевших кур. Затем процент реагирующих птиц заметно снижается. РДП ставят в 1% агаре, приготовленном на 0,01М ФБР рН 7,2 с добавлением 8% NaCl и 7,5% аминоуксусной кислоты (глицина). Специфический антиген для реакции готовят из суспензии ХАО эмбрионов, а специфические сыворотки - путем гипериммунизации птицы или лабораторных животных.

Нейтрализующие антитела персистируют в крови более длительное время. Сыворотки в разведениях 1:80 и выше считают положительными, 1:40 - сомнительными и 1:20 – отрицательными. В ФГУ ВНИИЗЖ разработан и применяется метод ИФА для тестирования сывороток (2009г.). Для анализа используют: полистироловые планшеты; специфический антиген, иммобилизированный в лунках планшеты; исследуемые пробы сывороток кур в разведениях не менее 1:800; антивидовой пероксидазный конъюгат; субстрат, содержащий ABTS или OFD.

Сыворотки в разведении менее 1:400 считаются отрицательными.

Hlinak A., Muller T., Kramer M. et al. (1998) исследовали сыворотки гусей на наличие антител с целью отбора вирусных патогенов, присутствующих у диких водоплавающих в Германии. Образцы сывороток гусей пород Anser fabalis и Anser albifrons – белогрудые гуси, были отобраны в октябре 1991 года и исследованы рутинными методами диагностики болезней домашней птицы. В 130 образцах исследуемых сывороток были найдены антитела к следующим инфекционным агентам: вирусу болезни Ньюкасла (45%), парвовирусу гусей (48%), реовирусу (29%) и аденовирусу птиц или вирусу ССЯ-76 (6%) (5).

Не были выявлены антитела к ентеровирусу гепатита уток. Таким образом, определена роль и значение диких гусей в эпизоотологии болезней птиц; возможно, они являются резервуаром и вирусоносителями определённых вирусных болезней домашней птицы.

Реовирусные инфекции уток необходимо отличать от сальмонеллеза, колибактериоза, коронавирусной болезни и микоплазмоза, часто диагностируемые как сопутствующие инфекции.

Иммунитет. Иммунный ответ, происходящий в организме уток, не изучен. Присутствие реовируса в организме утки сопровождается индукцией специфических антител, обладающих нейтрализующей активностью. Надо полагать, что при определенном уровне они существенно влияют на повторное заболевание (подобное наблюдают у кур). Взрослая птица передает антитела трансовариально.

Отмечено, что вирус негативно влияет на иммунную систему, что способствует секундарному инфицированию птицы другими микроорганизмами разной патогенности.

Лечение. Не проводится.

Профилактика и меры борьбы. Известно, что условия содержания, не соответствующие установленным нормам, способствуют заметному повышению заболеваемости уток и других видов птиц реовирусной инфекцией. Таким образом, соблюдение зоогигиенических требований остается одним из приоритетных условий ограничения распространения реовируса. Сообщения о применении специфических биопрепаратов для профилактики реовирусной инфекции уток отсутствуют.

Реовирусы уток и гусей антигенно вариабельны: - это одна из причин отсутствия номенклатуры выделенных изолятов, пригодных для производства вакцин и диагностических препаратов.

На примере теносиновита кур, где для профилактики болезни часто применяют вакцины на основе реовируса штамм “S-1133”, установлена прямая зависимость между кратностью и схемой очерёдности инъекций живыми и инактивированными биопрепаратами, что необходимо учитывать при разработке спецпрофилактики реовирусной инфекции уток. Эффективность профилактики заметно возрастает после однократного введения живой вакцины с последующим двукратным введением инактивированной. Препараты, приготовленные из вируса штамм “S-1133”, признаны более эффективными против известных гетерологичных вирулентных штаммов реовируса птиц.

В России (ФГУ ВНИИЗЖ) с 1997 г. производят вакцину против реовирусного теносиновита кур из вируса штамм “1133”, инактивированную с масляным адъювантом Монтанид ИЗА 70 (Франция). Препараты вводят внутримышечно цыплятам, у которых напряжённый иммунитет наступает спустя 14 суток и сохраняется в течение 3-4 месяцев.

Другую вакцину, сухую, живую, тоже из штамма “1133”, вводят цыплятам в первые 3 дня после вывода. Ревакцинацию, в зависимости от эпизоотической ситуации, проводят в 30-40-суточном возрасте живой или инактивированной вакциной. Последнюю применяют для любого возраста, начиная с односуточного, и не позднее, чем за 30 суток до начала яйцекладки.

Контроль эффективности вакцинации проводят через 21 сутки после инъекций вакцин, исследуя пробы сывороток крови методом ИФА.

В комплексе профилактики ИББ иммунизация птиц имеет первостепенное значение. Для практического применения используют вакцины разных фирм, приготовленные на основе бирнавируса серотипа 1. Во ВНИИЗЖ, например, выпускают вирусвакцину против ИББ кур сухую из штаммов «БГ» или «Винтерфильд-2512». Вакцинацию проводят в неблагополучных или угрожаемых хозяйствах с субклиническим течением болезни. Вакцину применяют методом выпаивания цыплятам 7-10-суточного возраста дважды с интервалом 10-14 дней.

Иммунитет у птиц наступает на 10-14 сутки после второй вакцинации и сохраняется в течение всего периода восприимчивости к болезни.

Срок годности вакцины 12 месяцев. В России вакцина используется повсеместно и эффективно.

В настоящее время ведутся исследования по разработке других вариантов биопрепаратов; например, создание рекомбинантной вакцины путём внедрения части гена в вектор вируса осповакцины или в форме комплекса «вирус-антитело», где вакцинный вирус объединён с определённым количеством гипериммунной сыворотки. Комплекс вводят в аллантоисную полость КЭ. Иммунохимические тесты срезов тканей птицы показали, что комплекс «вирус-антитело» проникает в селезёнку, бурсу Фабрициуса и исполняет там функции того комплекса, который образуется после введения вирусвакины. На 42 сутки после вывода цыплят отмечали более высокий уровень антител относительно индивидуального использования вирусвакцины. Применяемая в полевых условиях комплексная вакцина была дешевле на 0,08 доллара/одну голову, по сравнению с вирусвакциной.

Доступные литературные сообщения о применении подобных вакцин для профилактики реовирусной инфекции уток отсутствуют.

Алиев А.С. и др. (2003) сообщают о проявлении ИББ на фоне применения вакцин из промежуточных штаммов (D-78, ВНИВиП, Бюр S-76, Винтерфильд 2512 и др.) в тех случаях, когда пассивный иммунитет высокий. Напряжённость иммунитета оценивали по результатам ИФА, РДП и контрольного заражения 100 ИД₅₀/см³ вирулентным вирусом штамм 52/70-М. При 20% пассивном иммунитете после однократной подкожной инъекции 2,0 lg ЭИД₅₀/см³ вируса штамма КБК среднеарифметические титры составляли 1:2214 (ИФА) и 3,4 lоg₂ (РДП), а защита была на 90-100%.

Список литературы

1. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьёв, Н.В. Фомина. – М.: ВНИТИБП, 1998. – 928 с.
2. Контримавичус, Л.М. Вирусный энтерит гусей: автореф. дис. … докт. вет. наук / Контримавичус Л.М. – М., 1978. – 26 с.
3. Коровин, Р.Н. Лабораторная диагностика болезней птиц: справочник / Р.Н. Коровин, В.П. Зеленский, Г.А. Грошева. – М., 1989. - 256 с.
4. Ogasavara Kazumasa. Synthetic peptide vaccines effective in preventing virus infection / Ogasavara Kazumasa // Microbiol. Immunol. – 1999. – Vol. 10. – P. 915-923.
5. Serological survey of viral pathogens in bean and white-fronted geese from Germany / A. Hlinak, T. Muller, M. Kramer [et al.]; Institute of Virology // Berlin, Germany.
6. Studies on a transmissible disease of the bursa of Fabricius of ducks – evidence for reoviral involvement / J.A. Smyth, F. Forster, T.J. Forster, M.S. McNulty // XI^th Int. Congr. World Vet. Poultry Assoc., 18-22 Aug. 1997, Budapest, Hungary: Abstr. - Budapest, 1997. – P. 15.
7. Virus Infections of Birds / ed. J.B. McFerran, M.S. McNulty. – Amsterdam etc.: Elsevier Sci. Publ., 1993. – P. 177-316. – (Virus Infections of Vertebrates. Vol. 4).

 

 

РИЕМЕРЕЛЛЁЗ

 

Риемереллёз (гусиная септицемия, септицемия утят) – спорадическая контагиозная болезнь гусей, уток и других видов птиц, характеризующаяся расстройством центральной нервной системы, септицемией, воспалением органов дыхательной системы и желудочно—кишечного тракта, полисерозитом, а также летальностью до 95%.

Историческая справка. Ранее во всём мире риемереллёз был известен под названием гусиная септицемия; предполагалось, что болезнь вызывают бактерии Pasteurella anatipestifer или Moraxella anatipestifer. После 1993 года было установлено, что возбудителем риемереллёза является Riemerella anatipestifer, а болезнь, одна из самых опасных инфекций для уток, названа септицемия утят.

В разное время болезнь изучали Leibovitz et Sandhu (1976), Segers (1993), Tripathy (1983), Floren (1987), Dean (1980), Turbahn A. (2004) и другие (5, 6).

Экономический ущерб складывается из потерь от снижения веса больных особей, гибели птицы, затрат на замену больных и павших уток на здоровых, проведение лечебно-профилактических и ликвидационных мер по ограничению распространения болезни.

Возбудитель Riemerella anatipestifer. Морфологические, культуральные и биохимические свойства R. anatipestifer кратко описаны в разделе «Пастереллёз». Возбудитель входит в группу микроорганизмов, обладающих максимальной патогенностью для утят. R. anatipestifer может индуцировать у мускусных и пекинских утят гибель до 97%.

Риемереллы растут на обычных питательных средах; например, на кровяном агаре, где накопление их происходит за 12 часов. Бактерии не чувствительны к гентамицину в концентрации 5 мкг/см³, что используется для селекции от других микрооганизмов. Риемереллы ингибируются энрофлоксацином (0,015 мг/см³)(2, 5).

Эпизоотологические данные. Болезнь регистрировали во многих странах мира; чаще всего в Азии. Она входит в группу особо опасных болезней уток, которая включает, наряду с риемереллёзом, вирусный гепатит утят, чуму уток, пастереллёз и колисептицемию.

Высоковирулентные полевые изоляты R. аnatipestifer (например, серотип G, штамм PAG-1/4-91) могут вызвать болезнь у 7-14-суточных утят мускусной и пекинской породы с летальностью до 45-90%. В экспериментальных условиях болезнь легко воспроизвести внутримышечным введением 0,1 см³ взвеси бактерий в концентрации 3,2х10⁹ колониеобразующих единиц. Источником инфекции является переболевшая или клинически здоровая инфицированная птица. После заболевания болезнь может протекать в острой, подострой и хронической формах с охватом всего поголовья (4, 5, 6).

Течение и симптомы болезни. В естественных и экспериментальных условиях течение и признаки проявления риемереллёза отличаются незначительно. Инкубационный период составляет от нескольких часов до 4-5 суток; высокопатогенные бактерии индуцируют первые симптомы на следующий день. У молодняка уток отмечают прогрессирующее угнетение, шаткость походки, дрожание головы, общую заторможенность реакции, конъюнктивит и ринит. После 24 часов при острой и подострой формах, особенно после искусственного введения агента, наблюдают водянистую зеленоватого цвета диарею, слизистые жёлтые носовые истечения и расстройство нервной системы – дрожание головы, скручивание шеи и нарушение координации движения. В это время живой вес у 7-10-суточных утят снижается на 52-60г. в сутки. В зависимости от дозы антибиотиков течение и симптомы болезни могут быть более стёртыми. При этом мускусные утки, обладающие большей резистентностью, выздоравливают быстрее, чем утки пекинские, смертность у них менее выражена (2, 3).

Хроническая форма болезни более свойственна мускусным уткам; продолжается до двух недель, чаще без летального исхода и с длительным риемереллоносительством.

Патогенез. Не изучен.

Патологоанатомические изменения. После острой и подострой форм часто регистрируют воспаление носовых ходов, трахеи лёгких с отёком, кровоизлияниями и нередко, гноем. Постоянно отмечают аэросакк