Археология об основании Рима: Новые раскопки проясняют и такой острый дискуссионный вопрос, как дата самого возникновения Рима...
Автоматическое растормаживание колес: Тормозные устройства колес предназначены для уменьшения длины пробега и улучшения маневрирования ВС при...
Топ:
Оценка эффективности инструментов коммуникационной политики: Внешние коммуникации - обмен информацией между организацией и её внешней средой...
Эволюция кровеносной системы позвоночных животных: Биологическая эволюция – необратимый процесс исторического развития живой природы...
Характеристика АТП и сварочно-жестяницкого участка: Транспорт в настоящее время является одной из важнейших отраслей народного...
Интересное:
Принципы управления денежными потоками: одним из методов контроля за состоянием денежной наличности является...
Искусственное повышение поверхности территории: Варианты искусственного повышения поверхности территории необходимо выбирать на основе анализа следующих характеристик защищаемой территории...
Финансовый рынок и его значение в управлении денежными потоками на современном этапе: любому предприятию для расширения производства и увеличения прибыли нужны...
Дисциплины:
2019-08-03 | 530 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Химическим методом.
Принцип метода:
Кальций образует с глиоксаль-бис-2-оксианилом в щелочной среде комплекс красного цвета, который определяют фотометрически.
Материал для исследования: сыворотка крови.
Реактивы:
1. Раствор едкого натра;
2. Метанол;
3. Глиоксаль-бис-2-оксианил;
4. Стандартный раствор кальция.
Приготовление реактива:
Глиоксаль-бис-2-оксианил растворяют в метаноле.
Ход определения:
Отмерить (мл) | Проба | Эталон | Контроль раствор |
Дистиллированная вода Сыворотка крови Калибровочный раствор Раствор едкого натра | 1,00 0,02 - 0,50 | 1,00 - 0,02 0,50 | 1,02 - - 0,50 |
Перемешивают и спустя 5-10 минут добавляют | |||
Раствор глиоксаль-бис-2-оксианила | 2,00 | 2,00 | 2,00 |
Перемешивают и между 5-ой и 15-ой минутой после добавления раствора глиоксаль-бис-2-оксианила измеряют оптическую плотность пробы (Dо) и эталона (Dст) против контрольного раствора. Длина волны 520-550 нм, кювета 1 см. |
Расчет результатов:
Dо
Кальций (ммоль/л) = ------ * Сст
Dст
Сст= 2,5 ммоль/л
Предупреждение:
Лабораторная посуда, применяемая при определении кальция, должна быть совершенно чистой и служить исключительно для данной цели. После обычного мытья посуду следует поместить на ночь в 2% раствор комплексона 3 в аммиачной воде 1+1, потом тщательно промыть бидистиллированной водой и высушить.
Меры предосторожности по ходу работы:
В реактиве 1 содержится хлористоводородная кислота, в реактиве 3 – натрия гидроокись, оба – едкие вещества. В реактиве 4 содержится метиловый спирт – особо опасный яд и горючее вещество.
Увеличение содержания кальция происходит при:
· Физиологической гиперкальциемии, наблюдается у новорожденных, а также у недоношенных детей;
|
· Избыточном введении в организм ребенка витамина Д
(передозировка);
· Злокачественных опухолях с метастазированием в кости и
без метастазирования;
· Гиперфункции паращитовидных и щитовидной желез;
· Акромегалии, гигантизме и т.д.
Уменьшение содержания кальция наблюдается при:
· Спазмофилии у детей;
· Рахите;
· Гипопаратиреоидизме (обычно после случайного удаления во
время операции на щитовидной железе);
· Хронической почечной недостаточности.
ЖЕЛЕЗО.
Железо в организме входит в состав порфириновых соединений, главным образом, гемоглобина и миоглобина, в небольших количествах оно включается в состав цитохромов, некоторых ферментов. Железо в сыворотке связывается белком трансферрином. Концентрация железа в сыворотке зависит от резорбции в желудочно-кишечном тракте, накопления в кишечнике, селезенке и костном мозге, от синтеза и распада гемоглобина и его потери организмом. Средние показатели железа ниже у женщин, чем у мужчин, но у тех и у других с возрастом показатель железа падает. Концентрация железа имеет суточный ритм, а у женщин - связь с менструальным циклом. При беременности содержание железа в организме уменьшается, особенно во второй половине беременности.
Нормальное содержание железа:
у женщин - 14-21,5 мкмоль\л,
у мужчин - 14-26,0 мкмоль\л.
Методы определение железа.
1. Батофенантролиновый метод;
2. Определение с феррозином.
Батофенантролиновый метод определения
Содержания железа в сыворотке крови.
Принцип метода:
Определение содержания сывороточного железа основана на его предварительном освобождении из белкового комплекса и последующем проведении цветной реакции с батофенантролином.
Материал для исследования: сыворотка крови.
Реактивы:
1. Стандартный раствор железа;
2. Батофенантролин;
3. Тиогликолевая кислота;
4. Раствор для осаждения белков.
Приготовление реактива:
|
Для приготовления раствора для осаждения белков в мерную колбу на 100 мл отмеряют 3 м тиогликолевой кислоты и добавляют до метки раствором для осаждения белков.
Ход определения:
№ | Реактивы (мл) | Проба | Стандарт | Контроль |
1. 2. 3. 4. | Сыворотка Стандартный раствор железа Раствор для осаждения белков Бидистиллированная вода | 1,0 - 1,0 - | - 0,5 0,5 - | - - 0,5 0,5 |
Перемешивают пробу и через 5 минут центрифугируют при 3000 об/мин. | ||||
5. 6. | Надосадочная жидкость Батофенантролин | 1,0 2,0 | - 2,0 | - 2,0 |
В пределе от 5 до 60 минут измеряют оптическую плотность опытной пробы и стандарта против контроля при длине волны 540 нм в кювете 5 мм.
Расчет результатов:
Dо | ||
Железо в пробе мкмоль/л = | ------------ | * Cст |
Dст |
Определение с феррозином.
Принцип метода:
Железо, связанное в крови с трансферрином, освобождается хлоргидратом изанидина и восстанавливается аскорбиновой кислотой до ионов Fe2+. Ионы Fe2+ вступают в реакцию с хромогеном, образуя окрашенный комплекс. Интенсивность окраски образовавшегося соединения пропорциональна концентрации железа в пробе.
Материал для исследования: сыворотка крови.
Реактивы:
1. Буфер;
2. Хромоген;
3. Таблетки, содержащие аскорбинат натрия и тиомочевину;
4. Стандартный раствор железа.
Приготовление реактивов:
Реагент А: во флакон с буфером добавить 1 таблетку реагента.
Реагент В: во флакон с буфером добавить 1 таблетку реагента, 1 мл хромогена.
Ход определения:
№ | Реагенты | Контроль | Опыт | Стандарт | Холостая проба |
1. 2. 3. 4. 5. | Реагент А Реагент В Сыворотка Стандартный раствор железа Дистиллированная вода | - 2,00 - - 0,04 | - 2,00 0,04 - - | - 2,00 - 0,04 - | 2,00 - - 0,04 - |
Содержимое пробирок тщательно перемешать. Инкубировать 5 минут при температуре 37ºС. Измеряют оптическую плотность опытной пробы и стандарта против контроля и холостой пробы против реагента А в течение 30 минут.
Расчет результатов:
Δ Dпробы = Dпробы – Dхолостой пробы
Δ Dст = Dст – Dхолостой пробы
Δ Dпробы | ||
Концентрация железа = | ------------ | * Cст |
Δ Dст |
Сст = 17,9 ммоль/л
|
|
Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой...
Состав сооружений: решетки и песколовки: Решетки – это первое устройство в схеме очистных сооружений. Они представляют...
Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...
Индивидуальные очистные сооружения: К классу индивидуальных очистных сооружений относят сооружения, пропускная способность которых...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!