История развития пистолетов-пулеметов: Предпосылкой для возникновения пистолетов-пулеметов послужила давняя тенденция тяготения винтовок...
Историки об Елизавете Петровне: Елизавета попала между двумя встречными культурными течениями, воспитывалась среди новых европейских веяний и преданий...
Топ:
Когда производится ограждение поезда, остановившегося на перегоне: Во всех случаях немедленно должно быть ограждено место препятствия для движения поездов на смежном пути двухпутного...
Комплексной системы оценки состояния охраны труда на производственном объекте (КСОТ-П): Цели и задачи Комплексной системы оценки состояния охраны труда и определению факторов рисков по охране труда...
Интересное:
Распространение рака на другие отдаленные от желудка органы: Характерных симптомов рака желудка не существует. Выраженные симптомы появляются, когда опухоль...
Как мы говорим и как мы слушаем: общение можно сравнить с огромным зонтиком, под которым скрыто все...
Влияние предпринимательской среды на эффективное функционирование предприятия: Предпринимательская среда – это совокупность внешних и внутренних факторов, оказывающих влияние на функционирование фирмы...
Дисциплины:
2019-08-03 | 484 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Принцип метода:
Холестерин в присутствии смеси уксусной и серной кислот, а также уксусного ангидрида дает зеленое окрашивание.
Ферментативный метод определения холестерина.
Принцип метода:
Принцип основан на действии фермента холестериноксидазы, в результате чего образуется холестенол и Н2О2.
ХЭ
Эфиры холестерина + Н2О холестерин + RCOOH
ХО
Холестерин + О2 ∆4 холестенон + Н2О2
ПОД
2 Н2О2 + 4-аминофеназон + фенол 4(п-бензохинономоноимино)- феназон + 2 Н2О
(красная окраска)
Интенсивность окраски пропорциональна концентрации общего холестерина в сыворотке крови.
Материал для исследования:
1. Сыворотка крови;
2. Плазма (антикоагулянт – ЭДТА).
Реактивы:
1. Реагент № 1 буфер;
2. Реагент № 2 лиофилизат;
3. Реагент № 3 стандартный раствор холестерина.
Приготовление рабочего реагента:
Растворить содержимое одного флакона № 2 в 50 мл реагента № 1.
Ход определения:
Реактивы (мл) | Холостая проба | Проба | Стандартная проба |
Рабочий реагент | 2,00 мл | 2,00 мл | 2,00 мл |
Бидистиллированная вода | 0,02 мл | - | - |
Стандарт | - | - | 0,02 мл |
Сыворотка крови | - | 0,02 мл | - |
Смешать инкубировать 10 мин. при температуре 37ºС. Считывать значение абсорбции пробы (Dо) и стандартной пробы (Dст) против холостой пробы при длине волны 500 нм.
Расчет результатов:
Dо | ||
С = | -------------- | * концентрацию стандарта |
Dст |
Клинико-диагностическое значение:
Содержание ХС в значительной степени зависит от пола, возраста, состава пищи (меньше у вегетарианцев).
Повышение содержания ХС может быть физиологическим при эмоциональном возбуждении, беременности и патологическим:
|
1. первичным – семейная гиперхолестеринемия
2. вторичным при:
· атеросклерозе;
· болезнях печени: желтухи при застое желчи, гепатите, билиарном циррозе;
· болезнях почек: нефротическом синдроме, ХПН;
· болезнях поджелудочной железы: хроническом панкреатите, злокачественных опухолях;
· сахарном диабете;
· гипофункции щитовидной железы;
· ожирении и т.д.
Снижение концентрации ХС наблюдается при:
· болезнях печени: циррозе в поздней стадии заболевания, острой инфекции печени; инфекциях, связанных с повреждением печени (при синдроме печеночной недостаточности);
· гиперфункции щитовидной железы;
· голодании;
· сепсисе;
· лихорадочных состояниях;
· злоупотреблении алкоголем и т.д.
Исследование содержания ХС целесообразно у пациентов с ранними факторами риска атеросклероза, с заболеваниями сосудов и сердца, ксантомами, гипертонией, ожирением; людей, злоупотребляющих курением; а также при лечении бета-блокаторами, мочегонными и кортикостероидами.
Если в лаборатории исследуют эфирсвязанный ХС, то соотношение эХС/общий ХС = 0,6-0,7. Уменьшение количества эХС происходит параллельно степени нарушения функции печени и резкое снижение эХС является плохим прогностическим признаком, свидетельствующим о глубоком поражении печени.
ХОЛЕСТЕРИН - ЛПВП
ХС-ЛПВП – холестерин липопротеидов высокой плотности или α-холестерин. Его содержание коррелирует с уровнем неатерогенных липопротеидов крови. В организме осуществляет защитную, антиатерогенную функцию и является «тонким» критерием, отражающим состояние липидного обмена.
Особенностью функционирования ЛПВП является то, что они осуществляют транспорт ХС от клеток сосудистой стенки, периферических органов в печень, где ХС превращается в желчные кислоты и выводится из организма. Снижениеконцентрации ХС-ЛПВПниже 0,9 ммоль/л связывается с повышенным риском атеросклероза. Повышенный уровень ХС-ЛПВП рассматривается как антиатерогенный фактор.
|
Методы определения ХС-ЛПВП.
Метод с осаждением.
Принцип метода:
Липопротеины сыворотки человеческой крови низкой и очень плотности (ЛПНП, ЛПОНП) осаждаются под влиянием фосфовольфрамовой кислоты в присутствии ионов магния после центрифугирования. Фракции ЛПВП остаются в растворе. Холестерин, содержащийся в этих фракциях, определяют ферментативным методом.
ЛПВП-иммуно.
Это прямой иммунологический метод определения ХС-ЛПВП без центрифугирования. Антитела против человеческих липопротеинов используются для того, чтобы связать ЛПНП, ЛПОНП и хиломикроны в комплексы антиген-антитело, в то время как ХС-ЛПВП определяется ферментативным измерением холестерина.
Принцип определения:
антитела к
ЛПВП, ЛПНП, ЛПОНП, ХМ ЛПВП + комплексы
человеческим β-ЛП антиген-антитело
ХЭ, ХО
ХС-ЛПВП + Н2О + О2 холестенон + жирная кислота + Н2О2
Н2О2 + F-DAOS + 4-аминопирин комплекс синего цвета + Н2О
Норма: 0,9-1,9 ммоль/л (не менее 25% от общего холестерина)
Повышение концентрации:
· большая и регулярная физическая активность;
· некоторые лекарства, понижающие липиды;
· цирроз печени;
· алкоголизм.
Снижение концентрации наблюдается при:
· атеросклерозе (ИБС);
· инфаркте миокарда;
· сахарном диабете.
Снижение уровня ХС-ЛПВП сопровождает факторы риска ИБС, к числу которых относят малоподвижный образ жизни, курение, ожирение, гипертензию.
ФОСФОЛИПИДЫ
В норме около 1/3 общих липидов плазмы приходится на долю ФЛ. ФЛ плазмы включены в липопротеиды, за исключением лизолецитина, который транспортируется альбумином. Более 90% плазменных ФЛ печеночного происхождения, они поступают в циркулирующую кровь в составе ЛП. ФЛ входят в состав хиломикронов, которые формируются в энтероцитах из липидов, реабсорбированных в тонкой кишке. Молекулы ФЛ имеют гидрофильные и гидрофобные участки, тем самым оказывают стабилизирующий эффект по поддержанию ХС в растворенном состоянии. При уменьшении молекулярного соотношения ФЛ/ХС менее 3/2 рекомендуются липотропные диеты. Богатые ФЛ.
Нормальное содержание ФЛ – 1,5-3,6 г/л.
|
Повышение содержания наблюдается при:
· алкогольном и билиарном циррозе печени;
· сахарном диабете;
· вирусном гепатите (легкого течения)
· нефротическом синдроме;
· беременности.
Снижение содержания ФЛ в плазме крови отмечается при:
· гипертиреозе;
· тяжелом поражении паренхимы печени;
· атеросклерозе.
|
|
Типы оградительных сооружений в морском порту: По расположению оградительных сооружений в плане различают волноломы, обе оконечности...
Кормораздатчик мобильный электрифицированный: схема и процесс работы устройства...
История развития пистолетов-пулеметов: Предпосылкой для возникновения пистолетов-пулеметов послужила давняя тенденция тяготения винтовок...
Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!