Методы паразитологического анализа.

Дляобнаружениягельминтов,ихфрагментов(проглоттид,сколексов),личинок и яиц исследуют кал, мочу, мокроту, дуоденальное содержимое, кровь. Большая часть гельминтов паразитирует у человека в кишечнике или органах, связанных с ним протоками, поэтому наиболее распространенным является исследование испражнений (копрологическое исследование). Существуют макроскопические и микроскопические методыобнаруженияпаразитических червейилиихчастей(гельминтоскопия)ияицгельминтов(гельминтоовоскопия).Прикопрологическом анализенеобходимособлюдатьправилаличнойгигиены,обжигатьпетлиистеклянныепалочки, стерилизоватьпосуду,стеклаиинструментарий,содержатьвчистотерабочееместо. Макроскопические методы. Осмотр испражнений. Испражнениядолжны быть доставлены не позже суток после их выделения.При нарушенииэтогоправиладиагнозпоставитьневозможнов связисразрушениемяициличинок. Дляповышениядостоверностиисследования анализы нужно повторять несколько раз ежедневно или с промежуткамив1-3дня. Испражнениядоставляютвлабораториювчистойстекляннойпосудеили в спичечных коробках. На каждой коробке должна быть этикетка суказанием фамилии,имени,возрастаиместажительстваобследуемого. Небольшие порции испражнений перемешиваю сводой в плоской ванночке или в чашке Петри. Их просматривают при хорошем освещении на темном фоне, при необходимости пользуясь лупой. Пинцетом или пипеткой извлекают все подозрительные образования, переносят на предметное стекло в каплюразведенногоглицеринаилиизотоническогорастворахлорида натрия. Метод отстаивания. Всю исследуемую порцию испражнений размешиваютсводойидаютотстоятьсявстеклянномцилиндре,затемосторожно сливают верхнийслойжидкости.Так повторяютнесколько раз.После того, как жидкость станет прозрачной, ее сливают, а осадокпросматриваютвстекляннойванночкеили чашкеПетри. Метод позволяет обнаружитьгельминтов, их сколексы, обрывки стробилы, проглоттидыи диагностировать энтеробиоз,тениозитениаринхоз. Микроскопические методы. Нативный мазок. Небольшойкусочекиспражненийпереносятпалочкой на предметное стекло в каплю 50% водного раствора глицерина ирастираютдополученияравномерногопрозрачногомазка.Наодномстеклеготовят 2 мазка. Принебольшомколичествеяицвиспражненияхихневсегдаудаетсявыявить,поэтомуприменениетолькоэтогометоданеявляетсяполноценными достоверным. Толстый мазок с целлофаном (метод Като). Принципметода:яйцагельминтов обнаруживают в толстом мазке испражнений, просветленномглицериноми подкрашенноммалахитовойзеленью. Ходисследования. 100 мгиспражнений наносят на предметное стекло, покрывают обработаннойсмесью(6мл3%водногорастворамалахитовойзелени,500млглицеринаи 500мл6%водногорастворафенола)пластинкойцеллофанаипридавливаютрезиновой пробкой так, чтобы испражнения не растекалисьиз-под целлофана.Черезчаспроводятмикроскопированиепрималомилибольшомувеличении. Методвыявляетяйцааскариды,власоглава,лентеца,трематод,тениид. Метод закручивания по Шульману.. Круговыми движениями, не касаясьстеноксосуда, стекляннойпалочкойтщательноразмешивают2-3гиспражненийс5-тикратнымобъемомфизиологическогораствораиливоды. Яйца и личинки гельминтов скапливаются в центре. После окончанияперемешиваниякаплюнаконцепалочкибыстропереносятнапредметноестекло,закрывают еепокровнымстекломиисследуютподмикроскопом.Этим методомвыявляютсяличинкианкилостомы,некатора,угрицы. Методлипкой ленты используется для диагностики энтеробиоза. Кусочеклипкой прозрачнойполиэтиленовойлентыдлиной4-5смлипкимслоем прикладываютчерезанальноеотверстиек перианальнымскладкам,сразуже снимают и приклеивают на предметное стекло. Полученныепрепараты изучаютподмикроскопом.Исследованияпроводятвранниеутренниечасы. Методы обогащения основаны на разности удельного веса яиц и применяемого раствора. Методыосаждения(седиментации): еслиудельныйвесяицбольшеудельного веса жидкости, то яйца концентрируются в осадке, которыйисследуют подмикроскопом.Применяютдля обнаруженияяицтрематод. Метод Горячева используется для диагностики описторхоза. В цилиндр диаметром 2-3 см наливают 70-100 мл насыщенного раствора хлориданатрия.Отдельнотщательноразмешивают0,5гиспражненийв20-25млводыиосторожнофильтруютчерезворонкусдвумяслоямимарливцилиндр на солевой раствор, избегая перемешивания. Яйца кошачьегососальщикамедленнооседаютнадноцилиндра. Через2-3часаверхнийслойс каломотсасывают пипеткой, а оставшийся солевой растворцентрифугируют. Осадок пипеткой переносят на предметноестекло, покрываютпокровнымстекломирассматриваютподмикроскопом.Методприменимидлядиагностикидругихтрематодозов. МетодКрасильникова. Поддействиемповерхностно-активныхвеществ,входящихвсоставмоющихсредств(детергентов),яйцагельминтовконцентрируютсяв осадке. Готовят1%растворстирального порошка"Лотос".10гвысушенноговсушильномшкафупри100оСвтечение1-2часовпорошкарастворяютв1лводопроводнойводы.Встеклянныйсосуд,емкостью30-50мл,наливают20-30млприготовленногорастворадетергента,тудажепомещаютнебольшуюпорцию испражнений и перемешивают. Соотношение испражнений ирастворадолжнобытьпримерно1:20. Испражнениядолжнынаходитьсяв растворенеменеесуток.Наднеобразуетсяосадокиз2-3-хслоев. Нижнийслойсостоитизгрубых тяжелых частиц,всреднемслоенаходятся яйцагельминтов, верхний слой представляетсобой беловато-серые хлопья.Пастеровскойилиглазнойпипеткойнабирают2-3каплижидкостиизсреднегослояипереносятнапредметноестекло.Наодномстеклеготовят2препарата, накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом. Методпозволяет обнаружитьяйца всех видов гельминтов, выделяемые сиспражнениями. Методывсплывания(флотации): еслиудельныйвесяицменьшеудельноговеса жидкости,тояйцавсплываютнаповерхностьжидкости,и тогдаисследуютпленку.Применяютсядляобнаруженияяицанкилостомид,власоглава икарликовогоцепня. Метод Фюллеборна. Используют насыщенный раствор NaCl (растворяют400гNaClв1лводыприкипячении).Относительнаяплотностьраствора1,18-1,22. Вбанку объемом 30-50 мл помещают 2-3 г испражнений и припомешивании палочкой доливают почти доверху насыщенный растворхлорида натрия. Полоской бумаги быстро удаляют всплывшие крупныечастицы. Через 45-60 мин. отстаивания проволочной петлей снимаютповерхностнуюпленкуипереносятеенапредметноестекловкаплю50% водногораствораглицерина.Таккакяйцатрематод итениидвсплываютплохоимогутостатьсяв осадке,дополнительнопросматриваютнесколько препаратовизосадка,набираяегоглазнойпипеткойна2предметныхстекла.Хорошовсплываютяйцанематод(заисключениемнеоплодотворенныхяицаскарид),карликовогоцепняилентеца. Достоинства метода: дешевизна и доступность; недостатки – необходимостьпросмотрапрепаратовизповерхностнойпленкииосадка,атакже длительность отстаивания. Метод Калантарян. Испражнения смешивают с насыщенным раствором азотнокислого натрия (1 кг селитры заливают 1 литром дистиллированнойводыикипятятдополногорастворения)всоотношении 1:20.Удельныйвесраствораоколо1,4. Достоинстваметода: быстровсплываютиобнаруживаютсявповерх-ностнойпленкеяйцабольшинствагельминтов,чтоисключаетнеобходимость исследованияосадка.Невсплываютонкосферы тениидияйцатрематод. Длядиагностикитканевыхгельминтозов(трихинеллез,цистицеркозидр.)применяются иммунологическиеметоды: реакциякольцепреципитации(РКП), реакция связывания комплемента (РСК), реакция непрямойгемагглютинации(РНГА),реакцияпрямойгемагглютинации(РПГА),реакция энзимомеченных антител(РЭМА),реакцияпреципитациивагареидр. Длядиагностики паразитарных заболеваний берут 3-5 мл крови.Получаютсывороткуиразводятееизотоническимрастворомхлориданатрияот 1: 50 – 1: 100 до 1:800 – 1: 1600. В качестве антигенов используютдиагностикумы, с которыми безопасно работать. В пробирки с разными разведениями сыворотки добавляют диагностикумы (антигены). Если в сыворотке кровиимеетсядостаточноеколичествоантител(диагностическоезначение имеют титры 1:100–1:200 и выше), то они взаимодействуютсантигенамисобразованиемкомплексаантиген-антитело,который виденввиде осадка,кольцапомутненияидр.,чтоиподтверждаетклиническийдиагноз. Серологическиереакции(serum–сыворотка)становятсяположительнымина3-4неделяхзаболевания. Методбиопсиимышц длядиагностикитрихинеллеза.Дляанализа чаще берут кусочек (несколько граммов) дельтовидной или икроножноймышцы в асептических условиях. Мышцу измельчают ножницами ипомещают междудвумя толстымистеклами (компрессорий), слегкараздавливаютипросматриваютнамаломувеличениимикроскопа. Внутримышечных волокон обнаруживаются спирально свернутые личинкитрихинелл в округлыхилилимонообразныхкапсулах. Метод переваривания мышц для диагностики трихинеллезаявляется более эффективным.Мелконарезанные мышцы заливают искусственным желудочнымсоком(1%растворпепсинав 0,7%растворесолянойкислоты)ипомещаютвтермостатпри37оСна12-16часов.Объем желудочного сока должен превышать навеску мышц в 15-20 раз. Послеперевариванияна предметноестекло пипеткой переносят осадок ирассматриваютегоподмикроскопом.Восадкеобнаруживаютсясвободныеот капсулличинкитрихинелл. Методмазкакровиитолстойкапли длядиагностикифиляриатозов. Кровьберутвасептическихусловияхизпальцапреимущественноночью. Дляприготовления мазка каплю крови помещают на предметное стеклоикраемвторого стекларазмазываютпостеклу.МазокфиксируютметиловымспиртомиокрашиваютпоРомановскому-Гимза. Дляприготовлениятолстойкаплиберутнесколькокапелькровинапредметное стекло и углом другого стекла круговыми движениямиразмазывают до получения пятна, диаметром около 1,5 см. Послевысушивания эритроциты гемолизируют дистиллированной водой иокрашивают по Романовскому-Гимза. Микрофилярии выявляются в виде тонкихизвитыхнитей,окрашенныхвголубойцвет.

125. Тип "Членистоногие". Классификация. Характерные черты организации. Медицинское значение.
Членистоно́гие (лат. Arthropoda) — тип первичноротых животных, включающий насекомых, ракообразных, паукообразных и многоножек.. Количество видов членистоногих превышает количество видов всех остальных животных вместе взятых.

Характерные черты организации: Основная особенность представителей данной группы животных организмов — наличие хитинового наружного скелета.
Тело членистоногих сегментировано и разделено на голову, грудь и брюшко. Полностью или частично покрыто хитином. Растут только во время линьки. Конечности членистые; выполняют функции передвижения, дыхания, защиты, захвата и пр. Голова и грудь у некоторых сливается в головогрудь. Пищеварительная система дифференцирована. Ротовой аппарат образован видоизменёнными конечностями. Дыхание жаберное (у ракообразных), лёгочное или трахейное (у паукообразных и насекомых). Кровеносная система незамкнута. Нервная система состоит из головного мозга и брюшной нервной цепочки. Многие членистоногие имеют хорошо развитые органы чувств. Органы выделения представлены метанефридиями и мальпигиевыми сосудами. В основном раздельнополы. Случаи гермафродитизма редки. Развитие протекает с полным или неполным превращением. При неполном метаморфозе у насекомых нет стадии куколки.

Классификация: кольчатые черви — ближайшие родственники как членистоногих, так и онихофоров, основываясь на одинаковом количестве сегментов.
Основана на гипотезе о полифилетическом происхождении членистоногих. В связи с этим, тип членистоногих здесь разбивается на три самостоятельных типа.

Тип Хелицеровые
Тип Ракообразные
Тип Трахейные

Подтип Онихофоры

Подтип Неполноусые

126.Класс Паукообразные. Классификация. Характерные черты организации. Медицинское значение. Ядовитые паукообразные.

Паукообра́зные (лат. Arachnida) — класс членистоногих из подтипа хелицеровых (Chelicerata). Наиболее известные представители:пауки, скорпионы, клещи́.

Размеры паукообразных варьируют от сотен микрон (некоторые клещи) до нескольких сантиметров. Длина тела аранеоморфных паукови сенокосцев обычно не превышает 2—3 см. Наиболее крупные представители класса (скорпионы, сольпуги и жгутоногие) могут достигать 20 см в длину. Ещё большими размерами обладают некоторые пауки-птицееды.

Традиционно в теле паукообразных выделяют два отдела — просому (головогрудь) и опистосому (брюшко) Просома состоит из 6 сегментов, несущих по паре конечностей: хелицеры, педипальпы и четыре пары ходных ног. У представителей разных отрядов строение, развитие и функции конечностей просомы отличаются. В частности, педипальпы могут использоваться как чувствительные придатки, служить для захвата добычи (скорпионы), выступать в качестве копулятивных органов (пауки). У ряда представителей одна из пар ходных ног не используется для передвижения и берёт на себя функции органов осязания. Сегменты просомы плотно соединены друг с другом, у некоторых представителей их спинные стенки (тергиты) сливаются между собой образуя карапакс. Усольпуг слившиеся тергиты сегментов образуют три щитка: пропельтидий, мезопельтидий и метапельтидий.

Опистосома исходно состоит из 13 сегментов, первые семь из которых могут нести видоизменённые конечности: лёгкие, гребневидные органы, паутинные бородавки или половые придатки. У многих паукообразных сегменты просомы сливаются друг с другом, вплоть до потери внешней сегментации у большинства пауков и клещей.

Покровы

У паукообразных они несут относительно тонкую хитиновую кутикулу, под которой находится гиподерма и базальная мембрана. Кутикула предохраняет организм от потери влаги при испарении, поэтому паукообразные заселили самые засушливые районы земного шара. Прочность кутикуле придают белки, инкрустирующие хитин.

Органы дыхания

Органами дыхания служат трахеи (у фаланг, лжескорпионов, сенокосцев и некоторых клещей) или так называемые легочные мешки (ускорпионов и жгутоногих), иногда те и другие вместе (у пауков); у низших же паукообразных обособленных органов дыхания не имеется; эти органы открываются наружу на нижней стороне брюшка, реже — и головогруди, одной или несколькими парамидыхательных отверстий (stigma).

Легочные мешки являются более примитивными структурами. Считается, что они произошли в результате видоизменения брюшных конечностей в процессе освоения наземного образа жизни предками паукообразных, при этом конечность впятилась в брюшко. Легочный мешок у современных паукообразных представляет собой углубление в теле, его стенки образуют многочисленные листовидные пластинки с обширными лакунами, заполненными гемолимфой. Через тонкие стенки пластинок происходит газообмен между гемолимфой и воздухом, поступающим в легочный мешок через отверстия дыхалец, расположенных на брюшке. Легочное дыхание имеется у скорпионов (четыре пары легочных мешков), жгутоногих (одна или две пары) и низкоорганизованных пауков (одна пара).

У лжескорпионов, сенокосцев, сольпуг и некоторых клещей органами дыхания служат трахеи, а у большинства пауков (кроме самых примитивных) одновременно имеются и легкие (сохраняется одна — передняя пара) и трахеи. Трахеи представляют собой тонкие ветвящиеся (у сенокосцев) или неветвящиеся (у лжескорпионов и клещей) трубочки. Они пронизывают внутри тело животного и открываются наружу отверстиями стигм на первых сегментах брюшка (у большинства форм) или на I сегменте груди (у сольпуг). Трахеи лучше приспособлены к воздушному газообмену, чем легкие.

У некоторых мелких клещей специализированные органы дыхания отсутствуют, у них газообмен осуществляется, как и у примитивных беспозвоночных, через всю поверхность тела.