Методы микробиологической диагностики стрептококковой инфекции.

Материал для исследования: гной, кровь, моча, мокрота, ликвор, мазки со слизистой носа и зева, раневое отделяемое.

1. Бактериоскопический метод: из патологического материала готовят мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Обнаруживают грамположительные кокки, которые располагаются в виде коротких цепочек, или диплококков или в виде единичных кокков.

Поэтому, их трудно отличить от стафилококков и этот метод применяют редко.

2. Бактериологический метод:

- посев исследуемого материала на кровяной агар и в пробирку с сахарным бульоном. Инкубация 24 ч. 37 гр.

-исследование полученных подозрительных колоний: Макроскопия: рост в сахарном бульоне- придонный или пристеночный рост в виде хлопьев или зерен, вся среда остается прозрачной; по росту на кровяном агаре- 3 вида стрептококков. (смотри 55 вопрос). Микроскопия: мазок, окраска по Граму. Клетки грам «+», располагаются одиночно, попарно или небольшими скоплениями. Пересев подозрительных колоний на кровяной агар или бульонную среду для выделения ЧК. Инкубация 24 ч. 37 гр.

- проверяют полученную ЧК: макроскопия, микроскопия.

- идентификация выделенной ЧК: определяют чувствительность к антибиотикам методом дисков, ставят каталазный тест (у стрептококков каталазная активность отсутствует, культуру вносят в каплю перекиси водорода, если есть каталаза- перекись разлагается с образованием пузырьков), определяют серовар стрептококка в РА, серогруппу определяют в РП с полисахаридным преципитиногеном С и сыворотками серогрупп А, В, С и D).

3. Серологический метод: применяют в случаях хронической инфекции. Применяют РСК или РП для определения специфических АТ в крови больного. Определение в крови специфических АТ к токсину- стрептолизину О: серийные разведения сыворотки больного, добавляют препарат стрептолизина О, термостат 37 гр. 15 мин. Затем добавляют взвесь эритроцитов кроликов. Термостат 1 ч. 37 гр. Определяют титр реакции. Реакция основана на нейтрализации способности О-стрептолизина растворять эритроциты в случае наличия в крови больного соответствующих АТ

4. Биологический метод: внутрибрюшинно заражают мышей материалом от больного.

58. Характеристика менингококков. Заболевания, вызываемые ими. Факторы патогенности.
Таксономия:
Семейство: Nesseriaceae
Род: Nesseria
Вид: N.meningitides
Морфология: грамотрицательные диплококки округлой формы. Диаметр 0.6-1.0 мкм. Поверхности, обращенные друг к другу, вогнутые или ровные. Неподвижны. Спор и жгутиков не образуют. Имеют пили 4 типа. Образуют нежную капсулу полисахаридной природы. Строгие аэробы. Капнофилы.
Культуральные свойства: на простых питательных средах НЕ растет, поэтому к основным средам добавляют нативные белки- сыворотка, кровь, яичный желток. Бессывороточная среда- Мюллера-Хинтона. Оптимум роста: t- 37 гр., рН- 7.2-7.4. Колонии: на сывороточном агаре- круглые бесцветные нежные колонии маслянистой консистенции; на кровяном агаре- нежные округлые сероватого цвета с блестящей поверхностью. НЕ ДАЕТ ГЕМОЛИЗА.
Биохимические свойства: низкая биохимическая активность; протеолитическими свойствами не обладают; оксидазоположительны, каталазоположительны; ферментируют глюкозу и мальтозу; не образует индол и сероводород.
Антигенные свойства: имеют несколько АГ: родовые (белковые и полисахаридные), видовой (протеиновый), группоспецифические (гликопротеидный комплекс), типоспецифические (белки наружной мембраны). По К-АГ выделяют 9 серогрупп (A, B, C, D, X, Z, W, E).
Резистентные свойства: слабо устойчивы к внешним воздействиям- вне организма быстро погибает, при высыхании, кипячении, действии УФО погибает; чувствителен к большинству антибиотиков, антисептиков, дезинфектантов.
Эпидемиология: источник инфекции- больной и носитель; механизм передачи-аэрогенный, путь- воздушно-капельный. Заражение происходит при длительном тесном контакте. Экологическая ниша- слизистая носоглотки.
Факторы патогенности:
Капсула: защита от фагоцитоза.
Пили (фимбрии): адгезия менингококков к эпителию носоглотки.
Белки наружной мембраны: участвуют в прикреплении, проникновении, метаболизме менингококка.

Бактериоцины, оксидаза, каталаза: способствуют колонизации
Гиалуронидаза- фактор распространения
Нейраминидаза- фактор инвазии.
Оксидаза- фактор микробного антогонизма.
Эндотоксин-липополисахаридный комплекс: индуцирует синтез цитокинов, пирогенное действие, развитие токсического шока, поражение сосудов и кровоизлияний во внутренних органах.
Заболевания, вызываемые менингококками:
Назофарингит (при локализованной форме)
Менингококковый менингит (при генерализованной форме)
Менингококкемия (сепсис- при генерализованной форме)
Также при генерализации инфекции: эпидемический цереброспинальный гнойный менингит, менингоэнцефалит, эндокардит, артериит, полиартирит, иридоциклит, пневмония.