Задача № 5. Охарактеризовать реакцию нейтрализации токсина антитоксином и реакцию нейтрализации вирусов.

Для этого надо знать:

Реакция нейтрализации. Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или их токсинов на чувствительные клетки. Это связано с блокадой микробных антигенов антителами. т.е. их нейтрализацией. При постановке реакции смесь антиген-антитело вводят животным или вносят в культуру клеток.

Реакция нейтрализации применяется для титрования антитоксических сывороток и для определения типа токсина (при ботулизме, газовой гангрене). Она основана на способности антитоксической сыворотки нейтрализовать летальное действие токсина. Токсин смешивают с диагностической антитоксической сывороткой in vitro и затем вводят белым мышам in vivo. При соответствии типа токсина и антитоксической сыворотки мыши не погибают. Например, при определении типа экзотоксина у возбудителя ботулизма смешивают токсин с диагностическими сыворотками различных типов, затем смесь вводят белым мышам. По выжившей мышке устанавливают тип экзотоксина.

 

Ингредиенты, мл	Мыши
Исследуемый материал
Сыворотки различных типов	№1	№2	№3	№4	-
Нормальная сыворотка	-	-	-	-
Инкубация при 370 30 мин
Заражение белых мышей внутрибрюшинно
Результат	выживание	гибель	гибель	гибель	гибель

 

Вывод: в исследуемом материале содержится экзотоксин к сыворотке № 1.

Реакция нейтрализации используется для выявления противовирусных антител или установления типа вируса. Иммунную противовирусную сыворотку смешивают с вирусом, и смесь вводят восприимчивым животным или заражают культуру клеток. При нейтрализации вируса антителами в первом случае животное выживает, а во втором случае – отсутствует ЦПД.

 

Вопросы для самоподготовки.

1. Дать определение реакциям иммунитета.

2. Какие реакции называются серологическими?

3. Какие две фазы происходят после взаимодействия антигена и антитела?

4. Что происходит в специфическую фазу?

5. Что происходит в неспецифическую фазу?

6. Для чего применяются серологические реакции?

7. Как проводится серодиагностика и серотипирование?

8. Для чего используют адъюванты?

9. Как получают и для чего используют люминесцирующие сыворотки?

10. Что характеризуют такие свойства как специфичность и чувствительность серологических реакций?

11. Что такое реакция агглютинации? (РЛ)

12. Для чего используется реакция агглютинации?

13. Какие компоненты необходимы для реакции агглютинации? Как они называются?

14. Как получают иммунные сыворотки?

15. В чем суть метода гипериммунизации?

16. Что такое диагностикум?

17. Какие вы знаете два основных метода постановки реакции агглютинации?

18. Опишите пластинчатую реакцию агглютинации.

19. Опишите развернутую реакцию агглютинации.

20. Что такое О- и Н - агглютинация?

21. В каких случаях образуется хлопьевидный осадок и когда мелкозернистый?

22. Какие возможны ошибки при постановке реакции агглютинации?

23. В чем суть реакции непрямой гемагглютинации?

24. Применение РНГА?

25. Что произойдет, если к вирусу добавить соответствующую сыворотку? Как называется эта реакция?

26. В чём суть реакции торможения гемагглютинации? Применение РТГА?

27. Что такое реакция преципитации?

28. Перечислите ингредиенты реакции преципитации. Как они называются?

29. В чем главное отличие антигена реакции агглютинации от антигена в реакции преципитации?

30. Опишите реакцию кольцепреципитации.

31. Когда используется реакция термокольцепреципитации?

32. В чем особенности реакции преципитаций в геле?

33. Чем отличается метод простой иммунодиффузии от метода двойной иммунодиффузии?

34. Для чего применяется реакция двойной иммунодиффузии по Оухтерлони?

35. Что такое иммуноэлектрофорез? Его применение.

36. Что такое иммунный лизис?

37. Какие компоненты участвует в реакции лизиса?

38. Как происходит реакция гемолиза?

39. Для чего нужны две системы - специфическая и неспецифическая в РСК?

40. Что происходит в первую и вторую фазу реакции связывания комплемента (РСК)?

41. Как проводится учёт результатов РСК?

42. Где применяется РСК?

Учебное издание

 

Е.Г. Доркина

 

 

Иммунодиагностические реакции: методические указания для самостоятельной внеаудиторной работы студентов 1-ого курса (очная форма обучения) по дисциплине С2.Б.12 – микробиология

 

 

Технический редактор: Браташова Т. М.

Подписано в печать «___»__________ 2012 г.

Формат 60´84 1/16 Бумага кн.-журнальная.

Печать ротапринтная. Усл.-печ. л.____

Уч.-изд. л. ___

Тираж ____ экз. Заказ №_____

Пятигорская государственная

фармацевтическая академия

357532 г. Пятигорск, пр. Калинина, 11.