История развития хранилищ для нефти: Первые склады нефти появились в XVII веке. Они представляли собой землянные ямы-амбара глубиной 4…5 м...
Археология об основании Рима: Новые раскопки проясняют и такой острый дискуссионный вопрос, как дата самого возникновения Рима...
Топ:
Техника безопасности при работе на пароконвектомате: К обслуживанию пароконвектомата допускаются лица, прошедшие технический минимум по эксплуатации оборудования...
Генеалогическое древо Султанов Османской империи: Османские правители, вначале, будучи еще бейлербеями Анатолии, женились на дочерях византийских императоров...
Марксистская теория происхождения государства: По мнению Маркса и Энгельса, в основе развития общества, происходящих в нем изменений лежит...
Интересное:
Наиболее распространенные виды рака: Раковая опухоль — это самостоятельное новообразование, которое может возникнуть и от повышенного давления...
Аура как энергетическое поле: многослойную ауру человека можно представить себе подобным...
Отражение на счетах бухгалтерского учета процесса приобретения: Процесс заготовления представляет систему экономических событий, включающих приобретение организацией у поставщиков сырья...
Дисциплины:
2020-10-20 | 78 |
5.00
из
|
Заказать работу |
Определение содержания рибофлавина методом количественного люминесцентного анализа
Цель: освоение методов количественного люминесцентного анализа, приобретение навыков работы на флуориметре «Квант», определение витамина В2 методом прямой флуориметрии.
Посуда и реактивы: Рабочий стандартный раствор. Анализируемый раствор.
Задание: выполните опыты, оформите отчёт.
Правила техники безопасности:
1. Правила работы с реактивами.
2. Правила работы с химической посудой.
3. Правила работы с нагревательными приборами.
Методические указания к выполнению лабораторной работы:
Метод основан на сравнение интенсивности флуоресценции стандартного и анализируемого растворов витамина В1 при облучении светом ультрафиолетового диапазона. Содержание витамина В1 определяют, не прибегая к построению градуировочного графика лишь по одной точке, стандартный раствор при этом готовят с содержанием рибофлавина, близким к определяемому содержанию и не превышающим 1. 10-5 моль/дм3.
Ход работы:
Для приготовления рабочего стандартного раствора, содержащего 0,04 мг/см3 рибофлавина, взвешивают 0,0400 г рибофлавина в стаканчике или в фарфоровой чашке (навеску пересчитывают на чистую субстанцию). Затем навеску растворяют в горячей воде и переносят в мерную колбу объемом 1 дм3 на водяной бане. После охлаждения объем доводят до метки дистиллированной водой. Раствор годен в течение 1 месяца при условии его хранения в бутылке из темного стекла в холодильнике при температуре от 5 до 10 0 С. В день проведения испытаний часть основного раствора переносят в стаканчик и выдерживают в темном месте до приобретения комнатной температуры, затем отбирают пипеткой 10 см3 раствора в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем раствора до метки (1 см3 раствора содержит 0,0004 мг/см3 рибофлавина). Раствор годен только в день приготовления, а между измерениями хранится в темном месте.
В качестве анализируемого раствора используют или готовый раствор рибофлавина, или его готовят следующим образом: навеску растертых в ступке драже массой около 1 г взвешивают с точностью до 0,0002 г, растворяют в горячей дистиллированной воде при подогревании на водяной бане и количественно переносят в мерную колбу объемом 500 см3. Затем раствор охлаждают, доводят объем до метки и фильтруют через обычную фильтровальную бумагу (первые 10 см3 отбрасывают). Из полученного раствора готовят раствор второго разведения. Для этого отбирают 10 см3 раствора в мерную колбу на 100 см3 и доводят до метки дистиллированной водой. Расчетное содержание рибофлавина в растворе около 0,4 мкг/см3 или 0,0004 мг/см3. Между замерами раствор хранится в темном месте. |
Выполнение работы на приборе «Квант»
Определение содержания рибофлавина проводят на приборе «Квант», внешний вид которого представлен на рисунке.
1 - включение прибора в сеть; 2 - чувствительность; 3 - измерение;
4 - переключатель установка 100 % грубо; 5 - установка 0 %;
6 - установка 100 % точно; 7 - отсчетный лимб;
8 - шкала отсчетного лимба; 9 - первичный фильтр; 10 - вторичный
светофильтр; 11 - кюветное отделение; 12 - установка нуля;
Установка чувствительности; 14 - миллиамперметр
Рисунок - Внешний вид флуориметра «Квант»
Для проведения измерений на флуориметре «Квант» необходимо соблюдать следующий порядок.
Включить прибор в сеть переменного тока с напряжением 220 В и нажать кнопку 1 «сеть», при этом загорается индикаторная лампочка.
Дать прибору прогреться не менее 60 мин.
По спектрам поглощения и флуоресценции (экспериментальные или литературные данные) выбрать необходимые первичный и вторичный светофильтры. При установке светофильтра необходимо следить, чтобы зеркальная поверхность первичного светофильтра была обращена к источнику света, а вторичного - к кювете.
№ докум
Подп.
Дата
Обработка результатов анализа
Содержание рибофлавина в одном драже (С) в граммах вычисляют по формуле
С = , г
где А - показания флуориметра при замере испытуемого раствора;
В – показания флуориметра при замере стандартного образца;
Содержание рибофлавина в готовом растворе (С, мг/см3) вычисляют по формуле
С = ,
где Сст – содержание рибофлавина в стандартном растворе, мг/см3.
Контрольные вопросы:
Определение содержания рибофлавина методом количественного люминесцентного анализа
Цель: освоение методов количественного люминесцентного анализа, приобретение навыков работы на флуориметре «Квант», определение витамина В2 методом прямой флуориметрии.
Посуда и реактивы: Рабочий стандартный раствор. Анализируемый раствор.
Задание: выполните опыты, оформите отчёт.
Правила техники безопасности:
1. Правила работы с реактивами.
2. Правила работы с химической посудой.
3. Правила работы с нагревательными приборами.
Методические указания к выполнению лабораторной работы:
Метод основан на сравнение интенсивности флуоресценции стандартного и анализируемого растворов витамина В1 при облучении светом ультрафиолетового диапазона. Содержание витамина В1 определяют, не прибегая к построению градуировочного графика лишь по одной точке, стандартный раствор при этом готовят с содержанием рибофлавина, близким к определяемому содержанию и не превышающим 1. 10-5 моль/дм3.
Ход работы:
Для приготовления рабочего стандартного раствора, содержащего 0,04 мг/см3 рибофлавина, взвешивают 0,0400 г рибофлавина в стаканчике или в фарфоровой чашке (навеску пересчитывают на чистую субстанцию). Затем навеску растворяют в горячей воде и переносят в мерную колбу объемом 1 дм3 на водяной бане. После охлаждения объем доводят до метки дистиллированной водой. Раствор годен в течение 1 месяца при условии его хранения в бутылке из темного стекла в холодильнике при температуре от 5 до 10 0 С. В день проведения испытаний часть основного раствора переносят в стаканчик и выдерживают в темном месте до приобретения комнатной температуры, затем отбирают пипеткой 10 см3 раствора в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем раствора до метки (1 см3 раствора содержит 0,0004 мг/см3 рибофлавина). Раствор годен только в день приготовления, а между измерениями хранится в темном месте.
В качестве анализируемого раствора используют или готовый раствор рибофлавина, или его готовят следующим образом: навеску растертых в ступке драже массой около 1 г взвешивают с точностью до 0,0002 г, растворяют в горячей дистиллированной воде при подогревании на водяной бане и количественно переносят в мерную колбу объемом 500 см3. Затем раствор охлаждают, доводят объем до метки и фильтруют через обычную фильтровальную бумагу (первые 10 см3 отбрасывают). Из полученного раствора готовят раствор второго разведения. Для этого отбирают 10 см3 раствора в мерную колбу на 100 см3 и доводят до метки дистиллированной водой. Расчетное содержание рибофлавина в растворе около 0,4 мкг/см3 или 0,0004 мг/см3. Между замерами раствор хранится в темном месте. |
Своеобразие русской архитектуры: Основной материал – дерево – быстрота постройки, но недолговечность и необходимость деления...
Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...
Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...
Семя – орган полового размножения и расселения растений: наружи у семян имеется плотный покров – кожура...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!