Процедуры первичной (долабораторной) обработки образцов биологических материалов

3.5.1. Правила оформления направления на лабораторные исследования

Заявки на анализы должны быть согласованы со всеми врачами–специалистами, участвующими в лечении больного, чтобы при венепункции взять материал для всех необходимых исследований и не повторять процедуру. Медицинская сестра должна собрать все заявки данного пациента и дать суммарную заявку на анализы. Если пациент будет переведен в другое отделение, то она также должна предупредить лабораторию об этом, чтобы результаты исследований были направлены в нужное отделение и не утеряны. В направлении на лабораторные исследования (заявке) должны быть отображены следующие данные:

- дата и время назначения;

- дата и время взятия крови (сбора биологического материала);

- Ф.И.О. пациента;

- отделение, номер истории болезни, номер палаты;

- возраст, пол;

- диагноз;

- Ф.И.О. лечащего врача;

- перечень необходимых исследований;

- подпись специалиста, проводившего взятие крови или другого биологического материала.

3.5.2. Правила первичной обработки образца биоматериала

Важнейшей процедурой первичной обработки образцов биоматериалов после взятия их у пациентов является их кодирование с целью последующей надежной их идентификации. Кодирование видов образцов по характеру внесенных в них добавок закреплено с помощью разного цвета крышек пробирок, содержащих соответствующие добавки: красный/белый – без добавок, для сыворотки, клинико-химические исследования, серология; зеленый – гепарин, для плазмы, клинико-химические исследования; фиолетовый – ЭДТУК, для плазмы, гематологические исследования; голубой – цитрат натрия, для коагулологических исследований; серый – фторид натрия, для исследования глюкозы, лактата. Идентификация образцов от определенных пациентов наиболее рациональна с помощью штрих-кодов, в которых отражены идентификационные признаки пациентов: фамилия, клиническое отделение, фамилия лечащего врача и т.п. Штрих-коды изготавливаются в месте взятия образца и считываются с помощью специального устройства в клинической лаборатории. В небольших учреждениях возможно ручное кодирование пробирок нанесением на них карандашом по стеклу или фломастером условных знаков, цифр.

Другие процедуры первичной обработки образцов биоматериалов по месту их взятия зависят от общей организации лабораторного обеспечения в данном учреждении. Если процедурные кабинеты расположены в том же здании, что и лаборатория, то контейнеры с образцами должны как можно скорее переправляться в лабораторию, где и будут осуществляться все дальнейшие действия.

Пробы, содержащие инфекционные агенты, должны обрабатываться иначе, чем пробы с относительно небольшим риском инфицирования (подобно большинству проб крови, сыворотки, мочи, кала, тампонам, мазкам и фильтровальным бумажкам).

Биологический материал - кровь

При необходимости более длительной транспортировки в лабораторию образцы свернувшейся (обычно свертывание происходит в течение 30 минут) крови, предназначенные для получения сыворотки, должны быть отцентрифугированы на месте не позднее, чем через 1 час после взятия образца. Кровь для получения сыворотки или плазмы центрифугируют в течение 10-15 минут при ускорении 1000-1200 g. Цитратную плазму для исследований системы свертывания крови центрифугируют в течение 15 минут при 2000 g; для получения плазмы, свободной от тромбоцитов, центрифугирование длится 15-30 минут при 2000-3000 g. Центрифугирование пробирок с капиллярной кровью выполняется при 6000-15000 g в течение 90 сек. Обычно центрифугирование производится при температуре 20-22 ⁰С. Для отдельных аналитов может требоваться центрифугирование при температуре холодильника. Мазки крови для дифференциального подсчета лейкоцитов должны быть подготовлены не позднее, чем через 3часа после взятия образца.

Поскольку нуклеиновые кислоты быстро распадаются, образцы для молекулярно-биологических исследований должны быстро подвергаться стабилизации путем инактивации ДНКаз и РНКаз с помощью хаотропных веществ (гуанидин-изотиоцианат) и органического растворителя, например, фенола. Конечная концентрация ГИТЦ в стабилизированной пробе должна быть на ниже, чем 4 моль/л. Стабилизированный таким способом материал не должен охлаждаться во избежание кристаллизации ГИТЦ. Кровь с ЭДТУК для экстракции ДНК из лейкоцитов не требует стабилизации.

Биологический материал - кал

Вегетативные формы паразитов можно обнаружить только в свежих образцах кала при температуре тела хозяина. Цисты стабильны. Для концентрации паразитов и их сохранения в образцах кала обычно применяют растворы мертиолят-йод-формалин и ацетат натрия-формалин.

Требования к условиям хранения и транспортировки образцов биоматериалов в клиническую лабораторию

Условия хранения образцов биоматериалов, взятых у пациентов, определяются стабильностью в этих условиях искомых аналитов. Максимально допускаемая нестабильность, выраженная в процентном отклонении результата после хранения от исходного уровня, не должна превышать половины размера общей ошибки определения, рассчитываемой из суммы биологической и аналитической вариации данного аналита. Максимально допускаемое время хранения измеряется периодом времени, в течение которого в 95% образцов содержание аналита сохраняется на исходном уровне.

Стабильность аналитов в различных видах образцов (кровь, моча, спинномозговая жидкость) и проб (сыворотка, плазма, осадок, мазок крови) неодинакова (см. приложении В, Г, Д к настоящим правилам). Данные о стабильности проб должны учитываться и при их хранении после поступления в лабораторию. В отношении аналитов, нестабильных на свету, должны быть соблюдены соответствующие предосторожности (сбор материала в темную посуду, защита образца от прямого света).