Методы культивирования, индикации вирусов и идентификации вирусов. Характеристика клеточных культур.

*Индикациявирусов лабораторный процессустановления присутствия неидентифицированных вирусов в иссл.материале или в системе культивирования вирусов.

Условия выращивания клеточных культур:
u Соблюдение правил асептики;
u Использование лабораторной посуды из нейтрального стекла или специальных реакторов;
u Использование сложных питательных сред (среда 199, Игла), содержащих минеральные соли, аминокислоиты, витамины, глюкозу, сыворотку крови животных и человека, буферные растворы для поддержания рН;
u Добавление антибиотиков к питательной среде;
u Соблюдение оптимальной температуры (36 – 38,5 С) роста клеток
Типы клеточных культур
n Однослойные культуры клеток – клетки прикрепляются и размножаются в виде монослоя на поверхности химически
нейтрального стекла;
n Суспензионные культуры клеток – клетки размножаются во всем объеме питательной среде;
n Органные культуры – цельные кусочки органов и тканей.

Однослойные клеточные культуры: по числу генераций различают:
n Первичные культуры – способны размножаться только в первых генерациях, т.е. выдерживают не более 5-10 пассажей после выделения из тканей.
n Перевиваемые или стабильные культуры – способны размножаться в лабораторных условиях десятки лет.
n Полуперевиваемые культуры – выдерживают 40-50 пассажей.

Вироиды и прионы. Пролиферация прионов. Прионные болезни.

Близкие к вирусам инфекционные агенты если:
1. только НК = вироид,
2. только белок = прион.

Терминология

n ПРИОН – (частичная анограмма от англ. Proteinaceous infectious particles) – белковоподобная инфекционная частица;
n PrP – прионный белок (от англ. Prion protein);
n PrPc – неинфекционный клеточный белок («С» от англ. Cell – клетка)
n PrPSc – инфекционный прионный белок («Sc» - от англ. Scrapie – распространенная болезнь овец и коз);
n PRNP – ген, кодирующий синтез клеточного прионного белка (PrPc) в организме человека, локализованный на хромосоме 20;

Вироиды это - инфекционные агенты, состоящие только из кольцевой РНК. Вироиды это лишенные оболочки небольшие молекулы кольцевой, обычно одноцепочечной РНК. Вироиды способны автономно инфицировать клетки хозяина.

Прионы - особый класс инфекционных агентов, представленных белками с аномальной третичной структурой и не содержащих нуклеиновых кислот.

Прионные болезни — это группа заболеваний человека и животных, при которых происходит гибель нервных клеток головного мозга за счет накопления патологического белка (приона). Прионный белок существует в головном мозге и в норме, но при патологии он становится способным к формированию больших белковых агрегатов, мешающих работе нервной клетки. Белковые комплексы сначала накапливаются внутри клетки, а потом высвобождаются во внеклеточное пространство, где формируют «амилоидные бляшки».

Пролиферация патологических прионов: превращение прионов в измененные формы происходит при нарушении кинетически контролируемого равновесия между ними. Процесс усиливается при возрастании количества патологического (РгР) или экзогенного приона. РгР является нормальным белком, заякоренным в мембрану клетки. РгР' - глобулярный гидрофобный белок, образующий агрегаты с собой и с РгР'' на поверхности клетки: в результате РгР' преобразуется в РгР'' и далее цикл продолжается. Патологическая форма РгР''' накапливается в нейронах, придавая клетке губкообразный вид.

Нозологические формы прионных болезней человека:
n болезнь Крейтцфельдта-Якоба (БКЯ)
n Куру
n синдром Герстманна-ШтреусслераШейнкера (СГШШ)
n фатальная семейная инсомния (ФСИ)

7. Общая характеристика и строение бактериофагов. Этапы взаимодействия вирулентного фага с бактерией-хозяином.

8. Умеренные бактериофаги: особенности, репродукция. Лизогения и лизогенная конверсия.

9. Применение бактериофагов в медицине.