Адаптации растений и животных к жизни в горах: Большое значение для жизни организмов в горах имеют степень расчленения, крутизна и экспозиционные различия склонов...
Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...
Топ:
Марксистская теория происхождения государства: По мнению Маркса и Энгельса, в основе развития общества, происходящих в нем изменений лежит...
Оценка эффективности инструментов коммуникационной политики: Внешние коммуникации - обмен информацией между организацией и её внешней средой...
Выпускная квалификационная работа: Основная часть ВКР, как правило, состоит из двух-трех глав, каждая из которых, в свою очередь...
Интересное:
Инженерная защита территорий, зданий и сооружений от опасных геологических процессов: Изучение оползневых явлений, оценка устойчивости склонов и проектирование противооползневых сооружений — актуальнейшие задачи, стоящие перед отечественными...
Наиболее распространенные виды рака: Раковая опухоль — это самостоятельное новообразование, которое может возникнуть и от повышенного давления...
Лечение прогрессирующих форм рака: Одним из наиболее важных достижений экспериментальной химиотерапии опухолей, начатой в 60-х и реализованной в 70-х годах, является...
Дисциплины:
2022-10-29 | 38 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Клеточная стенка кислотоустойчивых бактерий отличается высоким содержанием липидов. Они с трудом окрашиваются, но затем удерживают основной краситель при обесцвечивании кислотой. Некислотоустойчивые бактерии легко окрашиваются, а затем легко обесцвечиваются кислотой и окрашиваются дополнительным красителем.
Метод Ожешко используется для выявления спор. Для этого на нефиксированный мазок наносят 0,5% р-р HСl, подогревают 1-2 минуты над пламенем, промывают водой, фиксируют и далее окрашивают по методу Циля-Нильсена. При этом цитоплазма клетки окрашивается в синий цвет, а споры в красный.
Метод Бурри-Гинса используется для окраски капсул бактерий и основан на том, что капсула не воспринимает красители. Капсулу выявляют негативным контрастированием фона по Бури. Для этого черную тушь смешивают в культурой и высушивают. После этого проводят фиксацию в пламени горелки, окрашивают тела микробных клеток по Гинсу - водным фуксином в течение 1 минуты и промывают водой 5-10 секунд. В результате на темном фоне хорошо видна бесцветная капсула и красные тела микробов.
Леффлера окраска способ метахроматического выявления волютиновых (РНК + полифосфаты) зерен у коринебактерий и скоплений нуклеиновых соединений у др. бактерий. Для окраски используют щелочной р-р метиленового синего, который наносят на 3 - 5 мин на фиксированный мазок, после чего смывают водой, мазок высушивают и микроскопируют. Протоплазма бактерий окрашивается в голубой цвет, волютиновые зерна - в темно-синий.
|
Нейссера метод окраски используют для выявления зерен волютина у возбудителей дифтерии и др. коринебактерий. Фиксированный мазок 2 - 3 мин красят уксуснокислым синим,10 - 30 с обрабатывают р-ром Люголя, слегка промывают водой и докрашивают в течение 30 с р-ром везувина, высушивают и микроскопируют. Бактерии окрашиваются в желтый цвет, волютин -в темно-синий.
Здродовского метод (холодный Циль-Нильсен) используют для выявления риккетсий внутри пораженных клеток. Для этого: 1. Окрашивают мазок разведенным фуксином Циля (10—15 капель на 10 мл дистиллированной воды) в течение 5 мин.;. 2. Промывают водой; 3.Обрабатывают мазок 0,5% раствором лимонной кислоты или 0,01% раствором НCl; 4. Промывают водой. 5. Окрашивают метиленовым синим в течение 1 мин.; 6. Промывают водой, высушивают препарат. Риккетсии окрашиваются в красный цвет, цитоплазма клеток, в которых они паразитируют,— в голубой, ядра — в синий.
ЗАНЯТИЕ № 3
ТЕМА: МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ. ЗАЩИТНЫЕ ПРИСПОСОБЛЕНИЯ У МИКРООРГАНИЗМОВ. МЕТОДЫ ИХ ВЫЯВЛЕНИЯ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ. ПОКОЯЩИЕСЯ ФОРМЫ МИКРООРГАНИЗМОВ. МОРФОЛОГИЯ СПИРОХЕТ, АКТИНОМИЦЕТОВ, РИККЕТСИЙ, ХЛАМИДИЙ, L-ФОРМ БАКТЕРИЙ, МИКОПЛАЗМ, ГРИБОВ.
ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
1. Споры, стадии и условия образования спор, биологическое значение. Методы выявления спор и кислотоустойчивых бактерий. Техника окраски по Цилю-Нельсену.
2. Капсулы бактерий, их значение. Способы обнаружения. Техника окраски по Бурри-Гинсу.
3. Определение подвижности. Жгутики, их строение. Изучение подвижности бактерий. Методы исследования микроорганизмов в живом состоянии. Темнопольная и фазово-контрастная микроскопия.
4. Формы бактерий с дефектами клеточной стенки (протопласты, сферопласты, L-формы).
5. Микоплазмы. Классификация. Филогенез. Морфология, структура, химический состав, особенности размножения. Методы выявления.
|
6. Патогенные спирохеты. Систематическое положение и морфология спирохет. Особенности ультраструктуры и химического состава. Методы исследования.
7. Актиномицеты, морфология, ультраструктура, химический состав. Роль актиномицетов в природе и медицине. Патогенные виды.
8. Классификация, морфология и строение грибов и методы их обнаружения.
9. Таксономия патогенных риккетсий. Морфология, структура, размножение, способы выявления.
10. Хламидии, особенности морфологии и структуры. Цикл развития хламидий. Методы выявления.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ И ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
1►Приготовление мазка из агаровой культуры спороносных бацилл, окраска по методу Ожешко), микроскопия и зарисовка.
Техника окраски спор по Ожешко и кислотоустойчивых бактерий по Цилю-Нильсену (указать, в какие цвета окрашиваются бактерии на каждом этапе окрашивания/ раскрасить таблицу)
Этап окраски | Окраска спор по Ожешко | ||
1. На нефиксированный мазок наносят 0,5% р-р HСl, подогревают 1-2 минуты над пламенем, промывают водой, фиксируют и далее красят по Цилю-Нильсену |
| Окраска кислото-устойчивых бактерий По Цилю-Нильсену | |
2. Кислотно-термальное протравливание Обработка карболовым фуксином Циля над пламенем спиртовки (время экспозиции до отхождения паров), снять бумажку, остудить препарат, сполоснуть водой |
| ||
2. Обесцвечивание Обработка серной кислотой (H 2 SO 4) Концентрация 5% |
| ||
3. Докрашивание водным раствором метиленового синего (время экспозиции) 3-5 минут |
|
* МТ – Mycobacterium tuberculosis; Str – стрептококк.
5►Микроскопия препаратов микроорганизмов, окрашенных по Ожешко и Цилю-Нельсену. Зарисовка препаратов.
Bacillus anthracoides Окраска спор по Ожешко Увеличение x 630 | Mycobacterium tuberculosis в мокроте Окраска по Цилю-Нельсену. Увеличение x 630 |
6►Приготовление мазков из агаровой культуры клебсиелл, окраска по Бурри-Гинсу, микроскопия и зарисовка.
Klebsiella pneumoniae Окраска по по Бурри-Гинсу Увеличение x 630 |
4►Приготовление препарата «раздавленная капля» или «висячая капля» из сенного настоя для изучения подвижности (указать особенности микроскопии препарата)
Принцип приготовления препарата «висячая капля»: используют специальное стекло с углублением (лункой), каплю исследуемого материала наносят на покровное стекло, края лунки смазывают вазелином Принцип приготовления препарата «раздавленная капля»: используют обычное предметное стекло, наносят исследуемый материал и накрывают («раздавливают») покровным стеклом
|
Техника микроскопии данных препаратов: г отовый препарат, микроскопируют с иммерсионным обьективом при приспущенном конденсоре (в темном поле)
5► Приготовление мазков из агаровой культуры дрожжеподобных грибов, окраска водным раствором фуксина, микроскопия.
6► Изучение морфологии плесневых грибов.
Candida albicans Окраска по Граму Увеличение х 630 Обозначьте на рисунке: 1- дрожжевая клетка; 2- псевдомицелий. | Препарат культуры плесневых грибов Окраска по по Граму Увеличение х 630 Обозначьте на рисунке: 1- конидии (спорангии); 2- стеригмы; 3- конидиеносец (спорангиеносец); 4- мицелий. |
7► Микроскопия и зарисовка риккетсий Провацека в готовых препаратах, окрашенных по Романовскому-Гимзе и Здродовскому.
8► Изучение препаратов боррелий в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
ДЕМОНСТРАЦИИ
Rickettsia prowazekii в органах белых мышей | Rickettsia prowazekii вакцинный штамм | Borrelia recurrrentis в мазке крови |
Окраска по Здродовскому х 1000 | Окраска по Здродовскому х 1000 | Окраска по Романовскому-Гимзе х 1000 |
Палочковидные микроорганизмы, расположены внутриклеточно | Вакцинный штамм представлен кокковидной формой риккетсий | Боррелии - тонкие спиральные бактерии, диаметром 0,2-0,5 мкм, длиной 5,0-25 мкм, имеющие 3-10 крупных завитков.Окрашиваются по Романовскому - Гимзе в сине-фиолетовый цвет. |
(указать методы окраски микроскопических препаратов и особенности морфологии микроорганизмов – форму и расположение в препарате)
ЗАНЯТИЕ № 4
|
|
Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни...
Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...
Семя – орган полового размножения и расселения растений: наружи у семян имеется плотный покров – кожура...
Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!