ПОДСЧЕТ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ — КиберПедия 

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим...

Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...

ПОДСЧЕТ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ



 

Подсчет форменных элементов – необходимый и существенный компонент клинического анализа крови.

Для подсчета форменных элементов взятую из пальца кровь разбавляют в специальных смесителях, чтобы создать нужную концентрацию клеток, удобную для подсчета. Разбавленной кровью заполняют специальную счетную камеру и подсчитывают под микроскопом число форменных элементов. Зная объем камеры и разбавление крови, вычисляют число кровяных телец в 1 мкл цельной крови.

Для подсчета форменных элементов используют счетную камеру Горяева. Она представляет собой толстое предметное стекло, в средней части которого находятся четыре желобка с тремя узкими площадками между ними. Средняя площадка ниже боковых на 0,1мм и разделена пополам поперечным желобком (рис. 17). По обе стороны от этого желобка расположены сетки, нанесенные на стекло. Сетка Горяева состоит из

 

 

Рис. 17. Счетная камера Горяева:

 

а – вид сверху; б – вид сбоку

225 больших квадратов, 25 из них дополнительно расчерчены на 16 маленьких. Единицей отсчета является маленький квадрат. Его сторона равна 1/20 мм, площадь – 1/20 ´ 1/20= = 1/400мм2. Объем разведенной крови, помещающийся над маленьким квадратом, равен 1/400 мм2 ´ 1/10 мм = = 1/4000 мм3. Перед работой необходимо рассмотреть под микроскопом сетку.

Для разбавления крови используют меланжеры,или смесители (рис. 18). Смеситель представляет собой капилляр с расширением в средней части. В расширенном участке находится стеклянная бусинка для перемешивания разведенной крови. На капиллярах нанесена градуировка – метки 0,5 и 1,0. Третья метка находится в смесителе: для подсчета эритроцитов – 101, лейкоцитов – 11. Для забора крови на меланжер надевают резиновую грушу, сдавливанием и расправлением которой достигается насасывание в него и крови и разбавляющих растворов. Для подсчета эритроцитов в меланжер набирают кровь до метки 0,5 и раствор до метки 101, при этом кровь разбавляется в 200 раз. В меланжер для подсчета лейкоцитов набирают кровь до метки 1, а раствор – до 11, при этом кровь разбавляется в 10 раз.

При подсчете эритроцитов в качестве разбавляющего раствора применяют 3% раствор NaCl. Эритроциты в нем сморщиваются и становятся заметнее. При подсчете лейкоцитов кровь разбавляют 5% раствором уксусной кислоты. В этих условиях эритроциты разрушаются и в поле зрения остаются только лейкоциты (точнее, их ядра). Уксусную кислоту подкрашивают метиленовым синим, при этом ядра лейкоцитов становятся видны отчетливее.



 

 

Задача 1

Подсчет эритроцитов

В норме в 1 мклкрови человека содержится 4,5–5 млн. эритроцитов (или 4,5–5´1012 в 1 л).

Для работы необходимы:микроскоп, камера Горяева, смеситель для подсчета эритроцитов, скарификатор, чашка для разбавления цитратной крови, фильтровальная бумага, 3% раствор NaCl, вата, спирт, йод, эфир.

Объект исследования – человек.

Проведение работы. Камеру помещают под микроскоп и рассматривают сетку вначале при малом, а затем при большом увеличении.

Накрывают камеру покровным стеклом, притирая его края к стеклу камеры до появления радужных колец. Оставив камеру под микроскопом, прокалывают палец.

Первую выступившую каплю крови из пальца стирают ватным тампоном. Во вторую каплю погружают кончик смесителя для эритроцитов, держат его вертикально и набирают кровь до отметки 0,5, следя, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. Обтирают конец капилляра фильтровальной бумагой и быстро, пока кровь не свернулась, переносят его в чашку с раствором NaCI, продолжая держать смеситель вертикально. Набирают раствор до метки 101 (т. е. разводят кровь в 200 раз), после чего смеситель переводят в горизонтальное положение и кладут на стол.

Для подсчета эритроцитов берут заполненный смеситель, зажимая нижний конец пальцем, снимают резиновую грушу и, зажав оба конца смесителя III и I пальцами, в течение 1 мин перемешивают кровь. Выпускают из смесителя на вату три капли, а четвертую наносят на среднюю площадку камеры у края покровного стекла. Капиллярными силами капля втягивается под покровное стекло и заполняет камеру. Излишек раствора крови стекает в желобок. Если на сетку попал воздух или на боковых площадках оказался излишек раствора, камеру следует промыть дистиллированной водой, насухо вытереть и заполнить снова. Заполненную камеру ставят под микроскоп и, если форменные элементы расположены равномерно (что является показателем хорошего перемешивания крови), приступают к подсчету. Считать эритроциты лучше при объективе малого увеличения (´8), но использовать при этом окуляр ´15.



Для того чтобы получить наиболее точные данные, необходимо подсчитать число эритроцитов в пяти больших квадратах, расположенных в различных местах сетки, например, по диагонали. Подсчет ведут в пределах маленького квадрата по рядам (от верхнего до нижнего). Во избежание двукратного подсчета клеток, лежащих на границе между малыми квадратами, применяют следующее правило: «К данному квадрату относятся эритроциты, лежащие как внутри квадрата, так и на его левой и верхней границах; эритроциты, лежащие на правой и нижней границах, к данному квадрату не относятся».

Подсчитав таким образом сумму эритроцитов в пяти больших квадратах (что составляет 80 маленьких), находят среднее арифметическое число эритроцитов в одном маленьком квадрате. Зная, что объем пространства камеры над одним маленьким квадратом равен 1/4000 мм3, умножают найденное число на 4000. Получают число эритроцитов в 1 мм3 разведенной крови. Умножив на величину разведения (200), получают количество эритроцитов в 1 мм3 цельной крови.

Таким образом, формула для вычисления количества эритроцитов следующая:

 

х = (Э ´ 4000 ´ 200)/80,

 

где х – искомое число эритроцитов в 1 мм3 (мкл) цельной крови;

Э – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратах.

В итоге полученное число эритроцитов записывают в пересчете на 1 л крови, т. е. число миллионов эритроцитов, найденных в 1 мм3 (мкл), умножают на 1012.

Результаты работы и их оформление.Запишите, сколько эритроцитов содержится в 1 л исследованной крови. Сравните полученные данные с нормой.

 

 

Задача 2

Подсчет ретикулоцитов

К молодым формам эритроцитов относятся ретикулоциты, имеющие в цитоплазме сетевидные включения. Появление их в периферической крови свидетельствует об усиленном эритропоэзе.

Для работы необходимы:микроскоп, предметное и покровное стекла, стерильный скарификатор, 1%-ный раствор бриллиант-крезило-вого синего, вата, йод, спирт, эфир.

Объект исследования – человек.

Проведение работы. Для подсчета ретикулоцитов на предметное стекло наносят каплю 1%-ного раствора бриллиант-крезилового синего. После прокола пальца к появившейся капле крови прикасаются покровным стеклом. Плотно прижав покровное стекло к предметному, делают мазок, т. е. распределяют кровь между стеклами очень тонким слоем. Зернистое содержимое ретикулоцитов окрашивается в синий цвет. Препарат рассматривают под микроскопом с иммерсионным увеличением и ограниченным полем зрения. Подсчитывают количество эритроцитов и отмечают найденные среди них ретикулоциты. Результат выражают в процентах.

Результаты работы и их оформление.Вычисляют количество ретикулоцитов в процентах по отношению к общему количеству эритроцитов. В выводе следует указать, соответствуют ли полученные данные норме (в норме в крови содержится от 6 до 15 ретикулоцитов на 1000 эритроцитов).

 

Задача 3

Подсчет лейкоцитов

Лейкоциты – белые кровяные тельца. В норме в 1 мкл крови содержится 4000–9000 лейкоцитов, что составляет (6–8)´109 в 1 л.

Для работы необходимы:микроскоп, счетная камера Горяева, смеситель для подсчета лейкоцитов, стерильный скарификатор, чашка для разбавляющего раствора, фильтровальная бумага, 5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим, вата, спирт, йод, эфир.

Объект исследования – человек.

Проведение работы. Последовательность процедур та же, что и при подсчете эритроцитов. После прокола пальца кровь набирают в меланжер для подсчета лейкоцитов до метки 1 и уксусную кислоту до метки 11. Перемешивают встряхиванием, затем заполняют счетную камеру, соблюдая те же предосторожности, что и при подсчете эритроцитов. Лейкоциты считают в 25 больших квадратах, что составляет 400 малых.

 

Формула для вычисления количества лейкоцитов:

 

х = (Л ´ 4000 ´ 10)/400,

 

где х – искомое число лейкоцитов в 1 мм3 (мкл) цельной крови;

Л – сумма лейкоцитов в 400 маленьких квадратах.

Результаты работы и их оформление.Запишите, сколько лейкоцитов содержится в 1 л исследованной крови. Для этого число тысяч лейкоцитов надо умножить на 109. Сравните полученные результаты с нормой.

 

 

Задача 4

Подсчет тромбоцитов

 

Количество тромбоцитов у человека составляет 200–400 тыс. в 1 мм3 крови, или (200–400)´109 в 1 л.

Для работы необходимы:микроскоп, счетная камера Горяева, смеситель для подсчета лейкоцитов, стерильный скарификатор, чашка Петри, 0,2 раствор цитрата натрия, 5%-ныйраствор сапонина, вата, спирт, йод, эфир.

Объект исследования – человек.

Проведение работы. Прокалывают палец, получают каплю крови. Смесителем для лейкоцитов набирают до метки 0,5 исследуемую кровь, до метки 1,0 – 0,2 раствор цитрата натрия, а затем до метки 11 – раствор сапонина для гемолиза эритроцитов. Смесь тщательно перемешивают встряхиванием. Заполняют счетную камеру. В связи с тем, что оседание тромбоцитов происходит медленно, камеру на 15–20 мин оставляют в чашке Петри, а затем производят подсчет тромбоцитов в 80 малых квадратах. Результат подсчета, умноженный на 1000, дает общее число тромбоцитов.

Результаты работы и их оформление.Отметьте количество тромбоцитов, полученное в результате подсчета. В выводе следует указать, соответствуют ли полученные данные норме.

Р а б о т а 3

АВТОМАТИЧЕСКИЙ ПОДСЧЕТ

ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ

 

Для подсчета числа частиц в дисперсии определенного объема служит прибор типа Пикоскель.

В приборе (рис. 19) имеется измерительный узел III, состоящий из электродов 1 и 2, тубуса с апертурой определенного диаметра 4 и стаканчика 5, наполняемого суспензией (кровь, разбав-ленная специальными растворами для подсчета эритроцитов или лейкоцитов).

В процессе ра-боты между электродами 1 и 2 путем нажатия кноп-ки «start» (пуск) за-сасывается в апертуру тонкая струя суспензии. Каждый форменный элемент изменяет сопротивление между электродами, и генерируемые при этом импульсы под-считываются электронным устройством. На табло появляется цифра после того, как струя определенного объема прошла от электрода 2 до размыкающего цепь электрода 3. На табло высвечиваются три первые цифры, указывающие на количество форменных элементов в 1 мкл крови. К показателю на табло прибора следует приписать соответствующее число нулей.

Для работы необходимы:электронный прибор для автоматического подсчета форменных элементов крови (например Пикоскель), стерильный скарификатор, заранее приготовленные в соответствии с инструкцией растворы для разбавления крови, фильтровальная бумага, вата, спирт, йод, эфир.

Объект исследования – человек.

Проведение работы.Прибор подготавливают к работе в соответствии с инструкцией. Взятую из пальца кровь в объеме 0,002 мл (специальный капилляр) разбавляют специальным раствором, приготовленным также в соответствии с инструкцией. 20 мл полученной суспензии наливают в стаканчик, который помещают на подставку 6 в прибор. Электроды 1 и 2 при этом погружены в суспензию. Нажатием кнопки «start» запускают измерение. Порция струи проходит от электрода 2 до электрода 3, при этом прибор выключается и полученный показатель высвечивается на шкале.

Подсчет лейкоцитов проводят в том же порядке. Для эритроцитов и лейкоцитов используют различные трубки, апертура которых отличается диаметром, а также разные разбавляющие растворы.

Результаты работы и их оформление:отметьте количество эритроцитов и лейкоцитов, полученное в результате подсчета. В выводе указать, соответствуют ли полученные данные норме.

 

 

Р а б о т а 4






Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого...

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим...

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой...

Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...





© cyberpedia.su 2017-2020 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав

0.009 с.