Методы выявленияизменений, возникающих в организме под влиянием вдыхания летучих компонентовполимерных композиций

Выборсоответствующих показателей и методов, а также объем планируемых исследований вкаждом конкретном случае определяется особенностями токсического действияисследуемого комплекса летучих веществ и необходимостью применения общепринятыхинтегральных тестов и некоторых специфических показателей.

Определениепоказателей должно быть начато за 2 - 3 недели до началаэксперимента. В зависимости от их характера следует строго дифференцироватьсроки определения каждого. После установления исходных величин должны бытьнамечены сроки определения соответствующих показателей в процессе последующихопытов.

При выборепоказателей и тестов, а также при последующей оценке полученных сдвиговнеобходимо учитывать характер и диапазон «физиологических колебаний» того илииного показателя. При этом не может быть однотипного подхода к оценкеанализируемых сдвигов, т.к. в одних случаях даже чрезвычайно широкие колебанияисследуемого показателя укладываются в «физиологическую норму», а в других -даже весьма незначительные уже свидетельствуют о развитии патологическогопроцесса. При изучении факторов малой интенсивности получаемый статистическизначимый полиморфизм данных следует трактовать как результат токсическоговоздействия.

В экспериментемогут быть применены различные функциональные нагрузки: длительная мышечнаяработа, вращение в центрифуге, гипоксия, воздействие некоторыхфармакологических агентов и др. Если при функциональной нагрузке в организмеживотного возникает патологическое состояние, значит достигнутое притоксическом воздействии «равновесие», обусловленное напряжением компенсаторныхзащитных механизмов, находится на грани «повреждения». Если же прифункциональной нагрузке реакции организма не отличаются от таковых уконтрольных животных или от сдвигов, наблюдавшихся у животных до нагрузки, тоследует полагать, что регистрируемые сдвиги находятся в пределахфизиологических норм защиты.

Схемыисследований влияния газовыделений из полимерных материалов на организм вхроническом эксперименте (прилож. 2)на всех схемах значком (*) обозначены тесты, исследования которых не являютсяобязательными, проводятся при наличии экспериментальной базы, а необходимостьпроведения определяется экспериментаторами.

Схема № 1 - Изучение общего состояния организма.Используются общепринятые методы определения.

Схема № 2 - Изучение функционального состоянияцентральной нервной системы (ЦНС).

Схемапредусматривает изучение корковых, подкорковых и обменных процессов.

Для изученияэнергетического обмена - ферментный состав цикла трикарбоновых кислот, биосинтез аскорбиновой кислоты в гомогенатах мозга.

Схема № 3 - Изучение неспецифической реактивностиорганизма. Схема включает, в основном, оценку влияния токсических газовыделенийна гипофизадреналовую систему, фагоцитарную активность нейтрофилов крови, активность лизоцима, фракционный составбелков крови и др.

Схема № 4 -Изучение функциональногосостояния печени. Рекомендуется исследовать белковый, липидный,углеводный и энергетический виды обмена, специфическую ферментативнуюактивность, биосинтез аскорбиновой кислоты.

Схема № 5 - Изучение функционального состояниясердца. Определяющими могут быть показатели ЭКГ не менее 100 кардиоциклов, артериальное давление, специфическая ферментативнаяактивность, энергетический и липидный обмены.

Схема № 6 - Изучение функционального состоянияпочек. Схема предусматривает определение показателей выделительной функции, фильтрационнойспособности, энергетического обмена.

Схема № 7 - Изучение функциональной способности кроветворной системы.Предусматривается определение форменных элементов крови, лейкоцитограмма,биосинтез аскорбиновой кислоты в селезенке.

Схема № 8 - Изучение гонадотропногодействия. Включает функциональное состояние сперматозоидов, морфологическиепоказатели, белковый и энергетический обмены, окислительно-восстановительныепроцессы. Для характеристики функционального состояния сперматозоидов можетприменяться определение индекса токсичности на сперматозоидах крупного скота.

Схема № 9 - Изучениеаллергенной активности производится в тех случаях, когда к этому есть прямыепоказания. Предусматривается использование одного из методов определения аллергенности в моделированныхусловиях вне организма и коньюнктивальной пробы на морских свинках.

Схема № 10 - Морфологическое и гистохимическоеисследование внутренних органов.

Помимо основныхпредложенных схем по показаниям должны проводиться исследования отдаленныхпоследствий: мутагенное действие, тератогенное действие и изучение генеративнойфункции.

Рекомендуемыесхемы исследований не являются строго обязательными во всех случаях. Выбортестов должен производиться в зависимости от цели исследования, а такжевозможности лаборатории.

Притоксиколого-гигиенической оценке ПСМ могут быть использованы так называемыеальтернативные методы, т.е. исследования на биологических моделях in vitro. Такие исследования позволяют дать оценкуинтегральной токсичности в короткие сроки и без существенных материальныхзатрат. Эти методы хорошо применимы при скрининговыхисследованиях и позволяют получить предварительные результаты исследованиятоксичности. Выполнение исследований должно проводиться по методическим указаниямили рекомендациям, утвержденным в установленном порядке (см. методическоепособие «Альтернативные методы исследований (Эспресс-методы) для токсиколого-гигиенической оценки материалов, изделийи объектов окружающей среды»).

Обобщениерезультатов исследования, обоснование выводов и рекомендаций

Для проведениястатистической обработки существует ряд специальных параметрических инепараметрических методов. В тех случаях, когда результаты имеют правильноераспределение и приближаются по форме к кривой Гауса, может быть рекомендованав качестве оптимальной обработка параметрическим методом с использованиемкритерия Стьюдента. В случаях, если не имеется нормального распределения рядаследует использовать непараметрические методы: критерий Вилкоксона, критерий Вандер Варденена, Х2 и др. Для измерения связи может быть использован коэффициенткорреляции.

В зависимости отполучаемых результатов и задач, стоящих перед исследователем, экспериментаторсам выбирает тот или иной метод статистической обработки и степень значимостиобнаруженных изменений (от 95 до 99 %) в зависимости отточности и специфичности выбранного метода исследования.

В сводныхтаблицах должны быть указаны: число наблюдений (n), средняя арифметическая (М), ошибка средней арифметической (± m) и величинакритерия Стьюдента (t).

При обработкематериалов непараметрическими методами статистики в таблицах также необходимопредставлять среднеарифметические величины (М) и их средние ошибки (± m).

Обоснование иоформление заключения

При обоснованиизаключения о результатах проведенных токсикологических исследований следует,прежде всего, сопоставить конкретные данные отдельных опытов с темиконцентрациями токсических веществ в воздухе экспериментальных камер, прикоторых были выявлены какие-либо изменения.

Дальнейшийанализ экспериментальных данных, сведенных в таблицы должен учитывать:

а)математическую достоверность выявленных изменений;

б) срокипоявления сдвигов и время обратного их развития после окончания затравки;

в) постоянствовыявленных сдвигов;

г) наличиефазности в развитии функциональных изменений;

д) наличие илиотсутствие параллелизма в изменениях интегральных и специфических показателей.

Систематизация,обобщение и анализ полученных данных, предпринятые с учетом указанных вышесопоставлений, позволяют аргументировать допустимость или запрещениеиспользования исследуемого синтетического полимерного материала.