Структурные компоненты клеточной стенки грибов

 

Состав клеточной стенки C. albicans
Углеводы: манноза - 86%, глюкоза - 6%
белки составляют 7%
хитин (больше в мицелиальной форме)

Дрожжевые грибы р. Candida
Бесспоровые дрожжи
Псевдомицелий: может быть хорошо развитым, рудиментарным или отсутствовать;
некоторые виды образуют истинный мицелий.

Таксономия рода Candida
C. albicans
C. tropicalis
C. pseudotropicalis
C. stellatoidea
C. krusei
C. guilliermondii

Распространение - широко распространены в природе: на растениях, плодах, овощах, фруктах - постоянные контакты с человеком

Обнаружение C. albicans у здоровых людей
Полость рта – 50-60%
Кишечник – 20-50%
Вагина – 10-20%

Проблема диагностики кандидозов - C. albicans встречаются повсеместно. Поражены ли ткани?

Морфологические формы C. albicans
- дрожжевая округлая, диаметр 5-8 мкм
- мицелиальная – нити различной длины
- псевдомицелий – нити из удлиненных клеток

\\Морфологические формы C. albicans \\Дрожжевая форма, образование бластоспоры C. albicans \\ Размножение почкованием - образование бластоспор (дочерних клеток) C. albicans \\ Ультратонкий срез дрожжевой клетки С. albicans \\Ростковые трубки C. albicans \\Ростковая трубка C. albicans \\
Стадии развития C. albicans: дрожжевая, мицелиальная, ростковые трубки, рубцы\\Дрожжевая клетка и псевдомицелий C. albicans \\Псевдомицелий C. albicans \\ Мицелий\\ Образование хламидоспор
(10-12 мкм) C. albicans на рисовом агаре \\ Образование клетками \\ C. albicans хламидоспор на рисовом агаре\\Хламидоспоры C. albicans

Культуральные свойства C. albicans
Факультативный анаэроб
Среда Сабуро, Чапека
Опт. Т^о – 20-37^оС
Устойчивы к воздействию факторов окружающей среды

Колонии C. albicans - среды для культивирования: Сабуро, Чапека, пивное сусло, среды на основе овощей (картофельный, капустный, морковный, рисовый агар)

АГ структура C. albicans
По строению поверхностных полисахаридных АГ делят на 6 групп: A,B,C,D,E,F – они же низкомолекулярные токсины. Структура белковых АГ меняется при переходе из дрожжевой в мицелиальную форму.
Серологические методы в диагностике - не главные!!!

Факторы патогенности C. albicans
Аллергические реакции - алкогольдегидрогеназа и кислый Р2–белок
Адгезия, коадгезия, рецепторы гликолипиды
Инвазия
Диссеминация
Экзоферменты: Фосфолипаза, Экзоклеточная протеиназа

Токсины C. albicans
 Экзотоксин – кандитоксин (сильный аллерген)
  эндотоксин – паприн
Низкомолекулярные токсины - полисахариды - A,B,C,D,E,F)

Действие токсинов
снижают количество Т-клеток (до 15 раз), риск аутоиммунных заболеваний
подавляют пролиферацию лимфоцитов
снижение активности фагоцитов и клеточного иммунитета
аллергены

Патогенез при кандидозе
Инвазию ограничивают нейтрофилы
Образуют скопления вокруг грибов в виде микроабсцессов
Нейтрофилы не способны фагоцитировать мицелиальные формы
Фунгицидные системы макрофагов и лимфоцитов менее активны, чем нейтрофилов
\\Незавершенный фагоцитоз клеток C. albicans нейтрофилами и моноцитами \\Фагоцитоз дрожжевых форм C. albicans \\
У здорового человека и у носителя никогда не будет грибов в крови, конъюнктиве, ушной сере, носовой полости и в желудке

Лабораторная диагностика кандидоза
Нет проблемы с поверхностными формами
Висцеральные формы кандидоза не имеет своей собственной клинической картины
Необходимо 3 раза выделить один вид Candida

Материал на исследование - в зависимости от локализации: мокрота, промывные воды бронхов, пунктат плевры, моча, кровь и т.д.
Характер мокроты (гной, кровь, много лейкоцитов0

Типы врастания мицелия на картофельном агаре
Кандида - ветвление 1-го порядка (C.albicans)
Микокандида - ветвление 2-го и 3-го порядка (C. pseudotropicalis).

Биохимические свойства: короткий ряд сахаров     C. albicaus
глюкоза                         К+Г+
мальтоза                        К+Г+
лактоза                             -
сахароза                           К+Г-

Серологические реакции – РА, РНИФ, метод встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ),метод встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ)

Чувствительность УПГ к АМП
Поверхностный кадидоз - раствор буры, краска Кастелляни (Фукорцин), производные аморолфина – ламизил-крем, лоцерил - лак.
Диссеминированный и хронический кожно-слизистый кандидоз - Амфотерицин B
Кандидоз кишечника, мочевыводящей системы- Микогептин, Нистатин, леворин, Группа имидазола: клотримазол, кетоконазол, дифлюкан (флюконазол)

Лекция 12 Патогенные простейшие Protozoa

Протистология или протозоология - наука о простейших - беспозвоночных животных
Протозойные инфекции - заболевания, вызываемые простейшими

По локализации инфекционного процесса можно разделить на 4 группы:
1. гр. Кровяные (трипаносомоз, лейшманиоз, малярия)
2. гр. Тканевые (токсоплазмоз)
3. гр. Кишечные (амебиаз, лямблиоз, балантидиаз)
4. гр. Урогенитальные (трихомониаз)

1группа - Кровяные протозойные инфекции
1.Трипаносомоз – р. Trypanosoma, 2. Лейшманиоз – р. Leishmania, 3. Малярия – р. Plasmodium

2 группа-  Тканевые протозойные инфекции
Токсоплазмоз – Toxoplasma gondii

3 группа - Кишечные протозойные инфекции
1. амебиаз – Entamoeba histolytica, 2. лямблиоз –Lamblia intestinalis  или Giardia lamblia, 3. балантидиаз – Balantidium coli 

4 группа -Урогенитальные протозойные инфекции        
 Трихомониаз –Trichomonas vaginalis

Простейшие – одноклеточные эукариотические микроорганизмы. Широко распространены в природе, особенно во влажных местах: обитают в пресной и морской воде, в почве и на растениях;
Размеры намного (на порядок) превышают размеры бактерий;
По строению близки к животным.

Общие свойства патогенных простейших (ПП):
Значительная часть жизненного цикла ПП связана с организмом человека или животных, несмотря на то, что они широко распространены в природе;
Поверхность большинства ПП покрыта плотной эластичной мембраной – пелликулой;
Некоторые ПП обладают опорными фибриллами – аксостилем;
В цитоплазме: ядро, окруженное двойной мембраной, ядрышко, ЭПР, аппарат Гольджи, митохондрии, вакуоли, лизосомы.
Большинство ПП способны активно перемещаться в пространстве: псевдоподии, реснички, жгутики;
Большинство – гетеротрофы, захват пищи путем фагоцитоза, у некоторых - специализированный ротовой аппарат – цитостом;
Дыхание всей поверхностью тела
Размножение или половым путем (сложный цикл) или бесполым – митоз, возможно чередование поколений.
Многие ПП при неблагоприятных условиях образуют покоящиеся формы – цисты -важная роль при распространении инфекции.

Особенности иммунитета при протозойных инфекциях (ПИ). Три феномена.
Явление иммунодепрессии, Гиперпродукция IgE, Продуцирование аутоАТ
1-й феномен: Явление иммунодепрессии – снижение иммунного ответа к гетерогенным антигенам; снижена выработка АТ к другим АГ других возбудителей → часто ПИ развиваются как смешанные
инфекции.
2-й феномен: Гиперпродукция неспецифического белка – IgE, при этом другие Ig не вырабатываются вообще. Количество Т и В-лимфоцитов практически не меняется. Возрастает в основном, количество IgE, но по ним нельзя судить, т.к. они неспецифичны.
3-й феномен: Продуцирование аутоАТ. Повышенная реакция ЦИК (циркуляция иммунных комплексов)

Урогенитальная протозойная инфекция – трихомониаз.  Возбудитель - Trichomonas vaginalis
Наиболее актуальная ПИ, (ранее назв. - трихомоноз). Вызывают простейшие. Передается per continuitatem. Поражение нижних отделов мочеполовой системы

Актуальность проблемы
1836 г. - Донне - у женщин, 1886 г. – Кюнцлер – у мужчин
30% негонококковых уретритов – трихомониаз
180 млн. больных на Земном Шаре, 3 млн. новых случаев в год (США), 70% из них болеют транзиторно (без клинических симптомов)
У некоторых женщин заболевание протекает бессимптомно и только через 6 мес. – клинические проявления.

Класс Mastigophora –жгутиконосцы
Таксономия рода Trichomonas
1. Т. vaginalis – в МПТ
2. T. hominis – в тонком и толстом кишечнике
3. T. tenax – в ротовой полости

Отличие сапрофитов от патогенных форм трихомонад
1. по морфологическим свойствам  (T. vaginalis- самая крупная);
2. по скорости роста
3. по АГ свойствам

Морфологические свойства T. vaginalis
Одноклеточные микроорганизмы
В норме - грушевидной формы 8-45 х 2-14 мкм;
Ядро эксцентрично
Пузырчатая цитоплазма: вакуоли, бактерии, лейкоциты
Жгутики: Передний конец – около цитостома 4 свободных жгутика
              Аксостиль (на конце спикула – конец стержня)
              Ундулирующая мембрана (краевая нить) занимает 2/3 - жгутика
              Пластинчатый комплекс- группа блефаропластов
Цист не образует

Размножение T. vaginalis - продольное деление

Атипичные формы T. vaginalis
Нетипичные – чаще у мужчин, типичные – чаще у женщин
1. малоподвижные
2. амебоидные – усилена фагоцитарная, адгезивная и цитотоксическая функция
3. неподвижные (шаровидные) мелкие – 4 мкм
Мелкие чаще всего выделяют при острой форме. Крупные (8-45 х 2-14) мкм – при хронической форме

Тинкториальные свойства T. vaginalis
1. метиленовый синий
2. бриллиантовый зеленый
3. генцианвиолетовый
4. окраска по Романовскому-Гимзе

Культуральные свойства T. vaginalis
Оптимальные условия:  Анаэробные, рН = 5,6 - 6,0, Тº – 35-37ºС
Гибнут при выходе из своей экологической ниши УГТ:
В дист. воде и воде – гибнут почти сразу, в физ. р-ре – сохраняются покоящиеся формы до 4 сут. На резиновых перчатках – до 4 час.

ЖПС и ППС питательные среды. Для хорошего роста требуют: цистеин, 20% сыворотки круп. рог. скота
Среда Павловой (лошадиная сыворотка, рисовый отвар)
Среда Джонсона-Трассела (печеночный настой)

Биохимическая активность T. vaginalis
Ферментируют:    НЕ ферментируют:
 Глюкоза,                                   сахароза
крахмал,                                   инозит
Мальтоза,                                 дульцит
Галактоза,                                 рамноза
Лактоза,                                     ксилоза
Маннит                                      сорбит

Расщепляют АК: L-лизин, глутиминовую кислоту, орнитин, фенилаланин
Не расщепляют: аргинин

Патогенез трихомониаза
Инкуб. период – 3-15 сут. (до 210 сут.). Половой путь, высоко контагиозны! Тропны к клеткам плоского эпителия. Внеклеточный паразит полостей!!!
Из уретры проникает в половые железы, возможно передвижение по лимфатическим сосудам
На месте внедрения – эрозивно-язвенные поражения с инфильтрацией подслизистого слоя
Трихомонады могут вызывать активное заболевание (АТ протективным действием не обладают) или транзиторное носительство без иммунного ответа

Патогенные свойства V. vaginalis
1. инвазия (жгутики)
2. фагоцитарная активность
3. ферменты: нейраминидаза, гиалуронидаза, β-гемолизин
Истинных экзотоксинов не образуют
4. Цитопатическое действие

Клинические проявления при трихомониазе: г нойные или пенистые выделения, зуд, боль, бели. Идентичен с гонококковым уретритом

Особенности клинических проявлений трихомониаза и гонореи
У женщин паразитируют в: T. vaginalis - в вагине, Neisseria gonorrhoeae – в цервикальном канале. У мужчин паразитируют в уретре

Смешанные с T. vaginalis инфекции
1. Сhlamydia trachomatis -30%, 2. Candida albicans -25%, 3. Ureaplasma urealyticum-20%, 4.          Neisseria gonorrhoeae -12%, 5. U. urealyticum, С.trachomatis-11%, 6. анаэробные бактерии -10%

Лабораторная диагностика
1. Микробиологические методы с целенаправленным выделением возбудителя
2. определение специфического иммунного ответа
3. дифференцирующая диагностика от других заболеваний МПС

Микробиологическая диагностика
1. Микроскопия нативного материала
2. Микроскопия окрашенного материала
3. Посев на питательные среды

Чувствительность к препаратам
Группа имидазола: Метронидазол, Метрогил, Трихопол, Тинидазол