Краткая характеристика инфекции. Основные клинические симптомы. История вопроса.

Cardnerella vaginalis - Это наиболее частый возбудитель неспецифического вагинита /чаще наблюдается у женщин, пользующихся внутриматочными спиралями или перенесших искуственный аборт/. Основной диагностический критерий - наличие "ключевых клеток" /клеток эпителия, покрытых выриабельными коккобактериями/. Выявляет их при окраске по Граму.

Бактериальный вагиноз (гарднереллёз, анаэробный вагиноз, неспецифический бактериальный вагинит, гарднереллёзный вагинит) занимает определённое место среди болезней, которые возникают в результате половых контактов и, по данным специалистов, им страдают более 20% женщин детородного возраста.

Бактериальный вагиноз возникает в результате резкого дисбаланса вагинальной микрофлоры и замещения нормальной микрофлоры влагалища (в которой преобладают лактобактерии) анаэробными микроорганизмами, Gardnerella vaginalis и Mycoplasma hominis.

В 1955 году Гарднер описал м/о как этиологический агент бактериального вагиноза (неспецифического вагинита).

Классификация

5 гр по Берджи факультативные анаэробные Г- палочки, 4 подгруппа – другие роды. Род Gardnerella, патогенный вид G.vaginalis

2.2 Морфологические и тинкториальные свойства.

Мелкие палочки, м.б. коккобактерии без капсул и спор, неподвижны, Гр. (-), Гр. вариабельны

2.3 Культуральные свойства

Факультативные анаэробы, растут на средах с тиамином, рибофлавином, фолиевой кислотой, биотином, а также на кровяном агаре +5% СО₂, оптимальная температура 35-37°С. Образуют мелкие, гладкие, круглые колонии, на кровяном агаре дают b-гемолиз (с человеческой кровью, но не с бараньей).

2.4 Биохимические свойства

Каталаза и оксидаза негативные, ферментируют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты, не образуют индол.

2.5 Токсигенные свойства

Гарднереллы продуцируют цитотоксин, который формирует катионные каналы в липидных мембранах с последующей активацией фосфолипазы А₂, что инициирует родовый процесс и преждевременный разрыв плодных оболочек.

2.6 Антигенные свойства Мало изучены.

2.7 Резистентность - Не устойчивы во внешней среде.

2.8 Патогенность для животных - В естественных условиях для животных не патогенны.

3. Эпидемиология и патогенез.

Бактериальный вагиноз — наиболее распространённое инфекционное заболевание нижнего отдела половых органов среди женщин детородного возраста. По данным различных исследователей, его обнаруживают у 21-33% обследуемых женщин. У больных с гонорейным или хламидиозным цервицитом бактериальный вагиноз обнаруживают чаще, чем у женщин без цервицита. Вопрос о значении полового пути передачи) бактериального вагиноза на сегодняшний день окончательно не решён.

Большую роль в патогенезе играют пили, с помощью которых происходит адгезия м/о к эпителию влагалища.

Неспецифический бактериальный вагиноз характеризуется значительными изменениями влагалищной флоры и влагалищной среды. Последствием уменьшения или отсутствия физиологических лактобацилл, является недостаточное количество молочной кислоты и повышение рН влагалищной среды. Создавшаяся таким образом нейтральная среда благоприятствует развитию различных патогенных микробов, в том числе G.vaginalis. В процессе метаболизма гарднерелла образует аминокислоты, из которых под влиянием анаэробов образуются летучие амины (путресцин, кадаверин, триэтиламин). Эти амины являются причиной неприятного запаха, напоминающего запах гнилой рыбы.

При бактериальном вагинозе появляются влагалищные выделения, которые состоят из смешанной флоры (пептококки, пептострептококки, бактероиды, гарднереллы, мобилункус, микоплазма гоминис и небольшое количество вагинального эпителия).

Развитию бактериального вагиноза могут способствовать различные эндогенные и экзогенные факторы:

эндогенные

- изменение гормонального статуса;
- снижение иммунологической реактивности;
- нарушение микробиоценоза кишечника;

экзогенные

- предшествующая антибактериальная терапия
- перенесенные и сопутствующие воспалительные заболевания мочеполового тракта;
- применение гормональных средств, иммунодепрессантов.

4. Иммунитет. После перенесённого заболевания иммунитет не стойкий.

Лабораторная диагностика

Исследуемый материал - патологические выделения из половых органов.

1.Экспресс-диагностика

непрямая РИФ.

2. Микроскопический метод.

 Гр.(-) или Гр. вариабельные мелкие палочки, колонизирующие клетки плоского эпителия, так называемые "ключевые" клетки. В этих клетках гарднереллы, расположенные вокруг ядра - Гр. (+), по периферии - Гр.(-).

3.Бактериологический метод

 Посев на среды с тиамином, рибофлавином, фолиевой кислотой, биотином, а также на кровяной агар // с человеческой и с бараньей кровью. Образуют калонии d-0,5мм, гладкие, круглые. На кровяном агаре b-гемолиз (с человеческой, но не с бараньей кровью).

Идентификация по биохимическим свойствам. Тесты на оксидазу и каталазу отрицательные (-). Образуют кислоту при расщеплении мальтозы (+), но не маннита(-).

Выделение чистой культуры не рекомендуется, т.к. 58% женщин без бак.вагиноза имеют G.vaginalis во влагалищном секрете.

4. Проба с КОН 10%: На предметном стекле смешивают каплю 10%раствора КОН с выделениями из гениталий - появление запаха "тухлой рыбы" при заболевании (за счет образования аминов).

6.Специфическая профилактика и терапия. Отсутствуют.

 

91. Риккетсии. Классификация. Свойства. Заболевания вызываемые ими. Эпидемиология и патогенез. Иммунитет. Лаб диагностика. Спец профилактика и лечение.
Риккетсии и риккетсиоподобные микроорганизмы.

Термин "риккетсии", введенный H. da Rocha-Lima (1916), объединяет обширную группу грамотрицательных микро-организмов, как правило тесно связанных в своей жизнедеятельности с членистоногими. Систематическое положение риккетсий до настоящего времени нельзя считать окончательно определенным. Появляющиеся квалификационные схемы отражают процесс накопления знаний по биологии, генетике и экологии этих своеобразных микроорганизмов, имеющих ряд общих свойств:

а) риккетсии являются облигатными внутриклеточными паразитами;

б) в отличии от подавляющего большинства бактерий не способны к росту на бесклеточных питательных средах;

в) их биология связана с паразитизмом у членистоногих (клещи, вши, блохи);

г) они имеют ряд особенностей в строении, размножении, биохимических, генетических и иммунобиологических характеристиках;

д) вызываемые риккетсиями заболевания характеризуются своеобразием клиники и эпидемиологии;

е) имеются специализированные методы изучения (риккетсиологические).

Учение о риккетсиях и риккетсиозах, благодаря работам многих отечественных и зарубежных исследователей, приведено в стройную систему. Важную роль в этом отношении имеют труды академика П.Ф.Здродовского и его школы.

Среди многообразных представителей микроорганизмов этой группы значительное место занимают риккетсии, апатогенные для человека и теплокровных животных, однако высокоадаптированные к членистоногим. Риккетсии и риккетсиоподобные микроорганизмы широко распространены среди различных представителей членистоногих, в том числе у вшей, блох, комаров, клопов, а также в большинстве видов иксодовых клещей. Принято считать эту группу микроорганизмов эндосимбионтами, находящимися в мутуалистических отношениях с хозяевами-членистоногими. Высокая адаптация к организму членистоногих большинства видов риккетсий, в том числе патогенных для позвоночных животных, позволяет многим исследователям рассматривать их в качестве первичных хозяев риккетсий. Вместе с тем, многие виды риккетсий патогенны для человека и животных, что определяет их медицинское и ветеринарное значение.

Таксономия. Патогенные риккетсии и близкие к ним возбудители - эндоцитобионты эукариотических клеток по существующей таксономии отнесены в царстве прокариотов к отделу Gracilicutes, классу Proteobacteria, порядку Rickettsiales, семействам Rickettsiaceae, включающей роды Rickettsia, Orientia, Ehrlichia и Bartonellaceae (род Bartonella и, вероятно, род Brucella), а род Coxiella (лихорадка Ку) относят к группе гамма- протеобактерий.

Краткая характеристика рода Rickettsia (da Rocha-Lima, 1916)

Морфология. Риккетсии- мелкие плеоморфные микроорганизмы от кокковидных до палочковидных, иногда ните-видные, однако чаще короткие палочки 0,3-0,6 х 0,8-2,0 мкм, у некоторых видов длиной до 4 мкм перед делением кле-ток. Жгутиков и капсул нет, но на электронных микрофотографиях клеток, подвергнутых минимальным лаборатор-ным манипуляциям, обычно виден внешний слой аморфного материала. Грамотрицательные микроорганизмы, плохо окрашиваются обычными анилиновыми красителями. Удерживают основной фуксин. Применяется также модифика-ция окраски по П.Ф.Здродовскому, который в связи с наличием большого количества липоидов рекомендовал исполь-зование карболового фуксина. При этом риккетсии окрашиваются в ярко-розовый или рубиново-красный цвет, цито-плазма клеток - в голубой, ядра - в синий.

Риккетсии имеют сходное с классическими грамотрицательными бактериями строение клетки: снаружи расположен микрокапсулярный слой толщиной 10-15 нм, обладающий антигенными свойствами, далее выявляется трехслойная мембрана клеточной стенки шириной 8-12 нм; цитоплазма образуется рибосомоподобными гранулами, между которыми обнаруживаются нити ДНК. При электронной микроскопии различают двухслойную клеточную оболочку, напоминающую по химическому составу клеточную оболочку бактерий, а также диффузно расположенный в цитоплазме ядерный материал - нуклеоид, рибосомы, РНК, ДНК. При изучении поверхностных структур риккетсий с помощью электронной микроскопии выявлены, как у многих бактерий, особого рода образования - волосовидные придатки или фимбрии. С наличием жгутикоподобных образований у R.sibirica, возможно, связана подвижность. У ряда видов риккетсий отмечают наличие вегетативных и покоящихся форм.

Химический состав. У риккетсий отмечено высокое содержание липидов (до 50%) и низкое - углеводов. По высокому содержанию нуклеиновых кислот (до12%) и наличию в составе как ДНК, так и РНК, риккетсии представляют бактериальные организмы. Сходны по химическому составу и клеточные стенки риккетсий и классических бактерий. В них выявлены диаминопимелиновая и мурамовая кислоты, белки, липиды, полисахариды. Однако у риккетсий содержится и глюкуроновая кислота, которая в оболочках бактерий обычно отсутствует. Соотношение ДНК и РНК составляет 1:6-1:8. РНК содержится в риккетсиях преимущественно в цитоплазме, а ДНК образует скопления, которые по существу и представляют нуклеоид.

О сложности химического состава риккетсий свидетельствует наличие в них витаминов (никотинамид, фолиевая кислота, биотин, рибофлавин, тиамин, пантотеновая кислота, витамины В6, В12). У риккетсий обнаружены энзимные системы, в частности трансаминазы, глютамат-оксидазная система, с помощью которых осуществляется в живой клетке хозяина автономный метаболизм этих микроорганизмов.

При изучении суммарных белков риккетсий методом электрофореза в полиакриламидном геле, в зависимости от разрешающей способности метода выявляется от 19 до 175 полипептидов, в том числе 6 из них являются основными с молекулярными массами в пределах 11х10 - 155х10. Содержание Г + Ц в ДНК исследованных видов - 30-32,5 мол.%.

Микроэкология и особенности культивирования. Экологической микронишей представителей рода Rickettsia служит цитоплазма, для ряда из них (риккетсии группы КПЛ) - ядро эукариотической клетки, где они размножаются свободно, без окружения паразитофорной вакуолью. Не культивируются в отсутствии клеток хозяина. Размножаются в клет-ках позвоночных и членистоногих, в эпидермальных клетках, выстилающих желточный мешок развивающегося куриного эмбриона. Хороший рост получен in vitro в клетках куриного эмбриона и в некоторых стационарных линиях кле-ток млекопитающих. Образуют бляшки на фибробластах куриного эмбриона. Температурный оптимум роста от 32 до 35° С. Риккетсии являются медленно растущими микроорганизмами, размножаются поперечным бинарным делением, время их генерации составляет не менее 8-9 часов.
---
В инфекционной патологии основное значение имеют риккетсии группы сыпного тифа (R.prowazekii - возбу-дитель сыпного тифа и R.typhi - возбудитель крысиного сыпного тифа) и группы клещевых пятнистых лихо-радок (КПЛ) - R.rickettsii - возбудитель пятнистой лихорадки Скалистых гор (в Америке), R.conorii - возбудитель марсельской лихорадки (преимущественно в Средиземноморском регионе, а также в бассейнах Черного и Каспийского морей), R.sibirica - возбудитель клещевого риккетсиоза или клещевого сыпного тифа (Северная и Центральная Азия, включая регионы юга Сибири и Дальнего Востока), R.akari - возбудитель осповидного (ве-зикулезного) риккетсиоза, R.australis - возбудитель австралийского риккетсиоза, R.japonica - возбудитель япон-ской клещевой пятнистой лихорадки. Из представителей других родов в патологии человека имеют значение Coxiella burnetii - возбудитель лихорадки Ку, Orientia tsutsugamushi - возбудитель лихорадки цуцугамуши, не-давно открытые возбудители гранулоцитарного эрлихиоза (агент HGE из рода Ehrlichia) и моноцитарного эр-лихиоза (Anaplasma chaffeensis), различные виды бартонелл, вызывающих широкий круг клинической патоло-гии (от окопной лихорадки до болезни кошачьих царапин). Остановимся на некоторых группах патологии, вызываемых риккетсиями и коксиеллами, подробнее.

Сыпной тиф.

Сыпной тиф - антропоноз, при котором циркуляция возбудителя -Rickettsia prowazekii происходит в паразитарной системе, включающей человека (резервуар) и платяную вошь - переносчика. В организме вши риккетсии размножа-ются в эпителии кишечника, вызывая его разрушение (несовершенная адаптация). Риккетсии в высоких концентраци-ях содержатся в фекалиях переносчиков. Платяная вошь покидает хозяина при сыпнотифозной лихорадке, что и опре-деляет ее роль как переносчика. Путь передачи - трансмиссивный (контаминация инфицированных фекалий вшей при расчесах).

Исторически эпидемический сыпной тиф - одна из наиболее важных эпидемических инфекций, получавшая наибольшее распространение в период войн, других социальных и природных потрясений (т.е. увеличения вшивости населения). Кроме этого с R.prowazekii связана болезнь Брилля - Цинссера - рецидив эпидемического сыпного тифа, возникающий у переболевших через десятки лет (эндогенная реактивация возбудителя).

Патологический процесс при риккетсиозах обусловлен тем, что риккетсии размножаются, главным образом, в эндотелиальных клетках сосудов, особенно мелких, и сосудорасширяющим действием риккетсиального токсина, что вызывает значительные изменения центральной нервной системы и расстройства кровообращения. Высказывается мнение о возможности не только длительной персистенции риккетсий в организме переболевшего но и, с учетом ангио-тропизма риккетсий, развития различной сердечно - сосудистой патологии через годы после перенесенного риккетсиоза.

Лабораторная диагностика сыпного тифа и других риккетсиозов осуществляется преимущественно с использовани-ем серологических методов - РСК, РНГА, РНИФ, ИФА.

Разработана и применяется живая сыпнотифозная вакцина. Однако наибольшее значение имеет борьба с педикулезом, своевременное лабораторное обследование на сыпной тиф длительно лихорадящих больных, особенно из катего-рий риска (завшивленные, бездомные, беженцы и др.).

Клещевой риккетсиоз.

Возбудитель - Rickettsia sibirica из группы клещевых пятнистых лихорадок. Облигатно- трансмиссивная природно-очаговая инфекция, передаваемая человеку клещами преимущественно из родов Dermacentor и Haemophysalis. При-родные очаги распространены в Сибири и на Дальнем Востоке России, в Казахстане, Монголии, Китае. Путь передачи - трансмиссивный (инокуляция при присасывании переносчика с инфицированной слюной). Клинически заболевание проявляется лихорадкой, первичным аффектом на месте присасывания клеща, регионарным лимфаденитом, розеолезно - папулезной полиморфной сыпью, относительной доброкачественностью течения. В отличии от сыпного тифа поражаются преимущественно сосуды кожи, а не головного мозга, деструкция эндотелиальных клеток сосудов менее выражена. В типичных случаях диагноз можно ставить клинически, из лабораторных методов чаще применяют РСК со специфическим антигеном.

Лихорадка Ку.

Свое название инфекция получила от первых букв (Qu) английского слова querry (неясный, неопределенный), т.е. - лихорадка неяного генеза. Возбудитель - Coxiella burnetii- облигатный фаголизосомальный паразит эукариотических клеток, не размножающийся на питательных средах. C.burnetii культивируют в куриных эмбрионах, культурах клеток, в биопробах на различных лабораторных животных.

Выделяют фазовые вариации коксиелл, аналогичные R- и S- формам бактерий. Возбудитель в фазе1 и фазе2 отлича-ется по вирулентности, строению, иммуногенности и другим свойствам. Коксиеллы мельче риккетсий, способны об-разовывать инфраформы (менее 40 нм), легко проходящие через бактериальные фильтры, проявляют значительную устойчивость во внешней среде.

Лихорадка Ку - зооноз преимущественно сельскохозяйственных животных. Характеризуется множественностью ис-точников (прежде всего пуховые козы, овцы, крупный рогатый скот, меньше - птицы) и факторов передачи инфекции (молоко, мясо, шкуры, вода, солома, пыль и др.). С наибольшей частотой заражение людей происходит прямо или опосредовано от сельскохозяйственных животных. Ведущее значение имеют аспирационный и контактный пути пе-редачи, меньшее - алиментарный. С учетом высокой устойчивости возбудителя особое значение при лихорадке Ку имеет пылевая инфекция.

Клинически лихорадка Ку многолика, часто проходит под масками других инфекций (лихорадка неясного генеза, грипп, ОРЗ, бруцеллез и мн.др.). Наиболее характерны острое начало, высокая температура, лихорадка длительностью около недели или больше, гипергидроз, головные, суставные и мышечные боли, гепато- лиенальный синдром, воз-можно развитие интерстициальной пневмонии, осложнения в виде тромбофлебита, панкреатита. Наряду с острой ин-фекцией возможны рецидивы, хроническое течение с развитием эндокардита. Диагноз лихорадки Ку вследствие по-лиморфизма клинического течения невозможен без лабораторного подтверждения. Основной метод - РСК. У больных преобладают антитела к антигену C.burnetii фазы 2; антитела к антигену фазы 1 преобладают при формировании хро-нического течения. В лечении лихорадки Ку, равно как и риккетсиозов групп сыпного тифа и клещевых пятнистых

лихорадок назначают преимущественно препараты тетрациклинового ряда. Разработана живая вакцина против лихорадки Ку, основные мероприятия проводятся по санации очагов лихорадки Ку среди сельскохозяйственных животных.

 

92. Вирус гриппа. Классификация. Свойства. Эпидемиология и патогенез. Иммунитет. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

Грипп- острое респираторное заболевание вирусной этиологии, протекающее с явлениями общей интоксикации и поражением респираторного тракта.

○ Группа: РНК-содержащие миксовирусы

○ Семейство: Orthomyxoviridae

○ Род: Influenzavirus

○ 3серотипа: А (подтипы и штаммы), В и С.

○ Номенклатура вируса включает тип, источник изоляции, место, номер, год изоляции,

       антигенная формула для типа А.

Характеристика:

○ Размеры частиц 80-120 нм, форма вируса чаще сферическая, но может быть и нитевидной.

○ В центре вируса спиралевидный нуклеопротеид. РНК вирусов однонитчатая, состоит из 8-и самостоятельных отрезков (высокая изменчивость вируса).

○ Нуклеопротеид покрыт белковым капсидом и двуслойной липидной оболочкой – суперкапсидом, из которого торчат как шипы по 10 нм молекулы гемагглютининов и нейраминидаз.

○ Известно 15 разновидностей гемагглютининов и 10 разновидностей нейраминидаз.

Антигенные свойства:

○ S-антиген (solution – растворимый), или внутренний нуклеокапсид, включает в себя РНК и вирусный белок, составляя 40% массы вириона. Отличается высокой стабильностью, общий для определенного типа вируса. Неинфекционный, неиммуногенный.

○ В наружной оболочке вириона содержится поверхностный V-антиген (viral – вирусный): гемагглютинин (антиген H) и нейраминидаза (антиген N). Определяет подтип и штамм вирусов гриппа типа А.

○ У вируса гриппа типа А выделяют два механизма изменения генетической структуры:

○ Антигенный шифт приводит к грубым изменениям в структуре гемагглютинина или нейраминидазы и обусловливает появление новых подтипов вируса внутри типа А, которые вызывают более тяжелые по течению и более массовые по характеру распространения эпидемии гриппа.

○ Антигенный дрейф приводит к менее значимым изменениям и определяет появление новых штаммов вируса.

Диагностические критерии:

○ У вируса гриппа типа А выделяют два механизма изменения генетической структуры:

○ Антигенный шифт приводит к грубым изменениям в структуре гемагглютинина или нейраминидазы и обусловливает появление новых подтипов вируса внутри типа А, которые вызывают более тяжелые по течению и более массовые по характеру распространения эпидемии гриппа.

○ Антигенный дрейф приводит к менее значимым изменениям и определяет появление новых штаммов вируса.

Патогенез:

○ Репродукция вируса в клетках дыхательных путей;

○ Вирусемия, токсинемия, токсические и токсико-аллергические реакции;

○ Поражение дыхательных путей с преимущественной локализацией процесса в каком-либо отделе дыхательного тракта;

○ Возможные бактериальные осложнения со стороны дыхательных путей и других систем организма;

○ Обратное развитие патологического процесса.

Иммунитет:

○ Постинфекционный иммунитет стойкий, возможно – пожизненный. Иммунитет типо-, подтипо- и штаммоспецифический.

○ Основную роль играют вируснейтрализующие антитела против гемагглютининов внеклеточных вирусов.

○ Антитела появляются в крови через 3-4 дня после начала заболевания и достигают пиковых концентраций через 2-3 недели.

○ SIgA обеспечивает защиту слизистых оболочек, препятствуя адгезии вирусов на клетках эпителия (связывание гемагглютининов).

○ Интерфероны α и β блокируют развитие вируса внутри пораженных клеток.

○ NK-клетки вызывают гибель пораженных вирусом клеток, что приводит к прекращению репликации вируса.

Диагностика:

Исследуемый материал – смыв из носоглотки, мазок из полости носа, мокрота, сыворотка крови.

Экспресс-диагностика: РИФ

○ В мазках из полости носа в первые дни болезни

○ с использованием специфической гриппозной флюоресцирующих сыворотки

○ Ответ через 2-3 часа

ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

○ Культивирование вируса осуществляется на курином эмбрионе или различных клеточных культурах – первичные культуры почечных клеток обезьян, человека и телят (HeLa, KB, клетки сердца, кишечника и другие первичные диплоидные и гетероплоидные клетки к гриппу нечувствительны).

○ Индикация: РГАдс или РГА через 3-4 дня.

○ Идентификация: РТГА со специфическими противогриппозными диагностическими сыворотками.

Серодиагностика:

Ретроспективная диагностика

○ Исследуют парные сыворотки крови, взятые у больных в острый период болезни (до 5-го дня от начала заболевания) и в период реконвалесценции – через 12-14 дней.

○ РСК и РТГА с гриппозными антигенами.

○ Диагностическим считается нарастание титра антител в 4 раза и более.