Определение общих фосфолипидов в сыворотке крови по содержанию общего фосфора.

Принцип метода:

Осаждение ФЛ трихлоруксусной кислотой вместе с белками и фотометрическое определение в образовавшемся осадке содержания ФЛ по количеству липидного фосфора.

 

АПОЛИПОПРОТЕИН А₁.

Аполипопротеин А₁ (аро А₁) – это основной белковый компонент липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), удаляющих ХС из клеток и, таким образом, защищающий от атеросклероза. Эпидемиологические исследования показали обратную зависимость между уровнями ЛПВП (в соответствии с аро А₁) и ишемической болезнью сердца (ИБС). В то время как определение общего холестерина и ТГ используется для скрининга коронарного риска, измерение аро А₁ вместе с липопротеином (а) и апопротеином В обеспечивает дополнительную полезную информацию о нарушениях липидного обмена и может быть альтернативой измерению ХС-ЛПВП.

Метод определения: иммунотурбидиметрический тест.

Принцип метода:

Определение концентрации аро А₁ по конечной точке, фотометрическим измерением реакции антиген-антитело между антителами к человеческому аро А₁ и аро А₁, находящемуся в образце.

АПОЛИПОПРОТЕИН В.

Аполипопротеин В (аро В) – это основной белковый компонент липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), транспортирующих холестерин в клетки и, таким образом, вносящий свой вклад в формирование атеросклеротических бляшек в артериях. Повышенные уровни аро В неразрывно ассоциируются с ИБС из-за тесной связи между аро В и степенью атеросклероза. В то время как определении ХС и ТГ используется для скрининга коронарного риска, измерение аро В вместе с липопротеином (а) и аполипопротеином А₁ обеспечивает дополнительную полезную информацию по различным нарушениям метаболизма ЛП и может быть альтернативой измерению ХС-ЛПНП. Измерения аро В также очень полезны при мониторинге липидопонижающей терапии.

Метод определения: иммунотурбидиметрический тест.

Принцип метода:

Определение концентрации аро В по конечной точке, фотометрическим измерением реакции антиген-антитело между антителами к человеческому аро В и аро В, находящемуся в образце.

 

ЛИПОПРОТЕИД (а)

Липопротеин (а) – Lp (а) – это частица, состоящая из ЛПНП, присоединенная к апопротеину (а), которая, в зависимости от изоформ, может иметь разные размеры. Lp (а) считается фактором риска атеросклероза, не зависящем от прочих параметров липидов и таких экзогенных факторов, как диета. Повышенные уровни Lp (а) имеют большое прогностическое значение для ИБС, особенно в сочетании с повышенным ХС-ЛПНП. В то время как определение общего холестерина и ТГ используется в целях скрининга, измерение Lp (а), наряду с ХС-ЛПВП, апопротеинами А₁ и В является ценным показателем для дифференциальной диагностики ИБС.

Метод определения: иммунотурбидиметрический тест.

Принцип метода:

Определение Lp (а) по конечной точке, фотометрическим измерением реакции антиген-антитело между антителами к человеческому Lp (а) и Lp (а), находящемуся в образце.

 

 

Приложение 2.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МИНЕРАЛЬНОГО ОБМЕНА.

КАЛЬЦИЙ.

Около 99% кальция находится в костях. Физиологически активным является ионизированный кальций, постоянно обнаруживаемый в плазме крови. Ионы кальция необходимы для передачи нервного импульса, поддержания мышечного сокращения, свертывания крови, контроля за протеканием некоторых ферментативных реакций, осуществления других жизненно важных функций.

Около 50% кальция плазмы находится в ионизированном виде, 45% представлено в связанном с альбумином состоянии и около 5% - с комплексирующими ионами (фосфат, цитрат). Уровень кальция в плазме определяется балансом ряда процессов: всасывания в кишечнике, перераспределением между клеточным и неклеточным пространствами организма, обмена в костях и выведения почками. Эти процессы контролируются паратгормоном, кальцитонином и кальцитриолом.

На содержание кальция в плазме и других биологических жидкостях оказывают влияние характер питания, состояние эндокринной системы, почек, желудочно-кишечного тракта. Нормальное содержание кальция составляет 2,25 – 2,75 ммоль/л.

Определение кальция в биологических жидкостях проводится следующими методами:

1. титриметрический (мурексидный) метод. Основное неудобство титриметрического метода состоит в том, что индикаторный переход не всегда удается зафиксировать точно.

Принцип метода:

Содержание кальция в сыворотке крови определяется титриметрическим методом с применением мурексида, который образует с ионами кальция в щелочной среде комплексное соединение, окрашенное в красно-фиолетовый или бледно-розовый цвет (в зависимости от концентрации кальция).

При титровании трилоном Б этот комплекс разрушается и связанный мурексид вновь освобождается, что приводит к появлению его натуральной окраски (фиолетовый или бледно-сиреневый).

2. химический метод с глиоксаль-бис-2-оксианилом. Проведение методики затрудняется нестабильностью формирующегося в щелочной среде комплекса. Наиболее стабильные результаты получаются при временном интервале 6-9 минут. Вместо данного химического реактива могут использоваться и другие реагенты, например α-крезолфталеин комплексон.

3. использование ионселективных анализаторов.

Принцип метода:

Состоит в измерении электрохимического потенциала ионселективного электрода, погруженного в исследуемый раствор. С помощью данного метода возможно надежное определение физиологически активного, ионизированного кальция.