Адаптации растений и животных к жизни в горах: Большое значение для жизни организмов в горах имеют степень расчленения, крутизна и экспозиционные различия склонов...
Двойное оплодотворение у цветковых растений: Оплодотворение - это процесс слияния мужской и женской половых клеток с образованием зиготы...
Топ:
Определение места расположения распределительного центра: Фирма реализует продукцию на рынках сбыта и имеет постоянных поставщиков в разных регионах. Увеличение объема продаж...
Процедура выполнения команд. Рабочий цикл процессора: Функционирование процессора в основном состоит из повторяющихся рабочих циклов, каждый из которых соответствует...
Методика измерений сопротивления растеканию тока анодного заземления: Анодный заземлитель (анод) – проводник, погруженный в электролитическую среду (грунт, раствор электролита) и подключенный к положительному...
Интересное:
Уполаживание и террасирование склонов: Если глубина оврага более 5 м необходимо устройство берм. Варианты использования оврагов для градостроительных целей...
Влияние предпринимательской среды на эффективное функционирование предприятия: Предпринимательская среда – это совокупность внешних и внутренних факторов, оказывающих влияние на функционирование фирмы...
Национальное богатство страны и его составляющие: для оценки элементов национального богатства используются...
Дисциплины:
2017-06-29 | 1807 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина
ОСНОВЫ ПРОИЗВОДСТВА ГИПЕРИММУННЫХ СЫВОРОТОК И ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
Учебно-методическое пособие по биотехнологии
Москва 2003
Удк 619:615.371(075)
Т.Н. Грязнева, И.В. Тихонов, Д.А. Девришов
Основы производства гипериммунных сывороток и иммунноглобулинов /Учебно-методическое пособие по биотехнологии.— М.: МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 2003. — 48 с.
Изложены методы получения гипериммунных сывороток и иммунноглобулинов, применяющихся для профилактики инфекционных болезней и лечения больных животных.
Предназначено для студентов ветеринарных, ветеринарно-биологических и зооинженерных факультетов высших учебных заведений, а также для практикующих ветеринарных врачей.
Рецензенты:
М.Н. Левчук -профессор кафедры биотехнологии Военного университета радиационной, химической и биологической защиты МО РФ, доктор медицинских наук.
Ю.Д. Караваев – заведующий отделом эпизоотологии, диагностики и профилактики болезней овец и других животных ВИЭВ, доктор ветеринарных наук.
Г.В. Павлов - профессор кафедры микробиологии и иммунологии МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, доктор биологических наук.
Утверждены учебно-методическим объединением высших учебных заведений РФ по образованию в области ветеринарии и зоотехнии (протокол № от 2003 г.)
Основы производства гипериммунных сывороток
И иммунноглобулинов
1. Цель занятия: Изучить технологию изготовления гипериммунных сывороток и иммунноглобулинов.
2. Место проведения занятия: учебная лаборатория.
3. Длительность занятия: 4 академических часа.
4. Материальное обеспечение:
|
4.1. Сыворотки и гамма-глобулины фабричного производства.
4.2. Нативная сыворотка крови животных.
4.3. Риванол (этакридина лактат) в порошке и в виде 3 %-ного раствора.
4.4. Химически чистая соль (NaCI).
4.5. Флаконы емкостью 10 и 100 мл.
4.6. Пробкозакатывающая машина.
4.7. Обеззоленные бумажные фильтры.
4.8. Лабораторная посуда (колбы, мерные стаканы, воронки).
5. Распределение рабочего времени (180 минут):
5.1. Организационные вопросы - 10 мин.
5.2. Теоретическая часть - 40 мин.
5.3. Практическая часть - 120 мин.
5.4. Уборка рабочего места - 10 мин.
Таблица 1
План
Проведения лабораторной работы
№ | Содержание занятия | Основная литература |
1. 2. 3. 4. 5. | Основы производства гипериммунных сывороток. Методы получения гамма-глобулинов. Риваноловый метод получения гамма-глобулина. Контроль качества готового препарата. Фасовка готового препарата. | 1. Балашенко С.Г., Урбан В.П. Иммунные глобулины в ветеринарии. Минск, «Урожай», 1972. 2. Кленина Н.В. Гамма-глобулины в ветеринарии. М.: Урожай, 1971. 3. Сафонов А.Ф., Пирожков Г.В. Получение и применение неспецифического гамма-глобулина / Сб. науч.тр. КНИВИ, 1992. 4. Синицин В.А. и др. Фракциони- рование белков плазмы крови с целью препаративного получения гамма-глобулинов и альбумина. Харьков УААН, ИЭКВМ, 1995. 5. Тутов И.К., Ситьков В.И. Основы биотехнологии ветеринарных препаратов. Ставрополь, 1997. |
Практическая работа
1. Получить гамма-глобулин из сыворотки крови животных риваноловым методом.
2. Провести контроль качества готового препарата.
3. Расфасовать и закатать полученный гамма-глобулин во флаконы.
Теоретическое содержание занятия
Основы биотехнологии производства
Гипериммунных сывороток
Важнейшей задачей прикладной иммунологии является разработка методов и средств сывороточной профилактики и серотерапии при инфекционных болезнях животных.
Гиперимунные или специфические сыворотки представляют собой сыворотки крови животных, систематически иммунизированных бактериальными или вирусными антигенами.
|
Гипериммунные сыворотки содержат антитела, обладающие строго специфическим действием на бактериальные токсины, патогенные бактерии или вирусы, против которых иммунизировали животных.
Таблица 2
Отбор животных-продуцентов. Грундиммунизация
Получение гипериммунных сывороток осуществляется в несколько этапов:
1. Подбор животных - продуцентов
2. Грундиммунизация (грундирование) - отбор животных из числа завезенных путем создания у них основы иммунитета.
3. Гипериммунизация животных-продуцентов
4. Приготовление сывороточных препаратов
Подбор животных-продуцентов
Всех завезенных на биофабрику животных выдерживают в карантине 45 суток. За это время их всесторонне обследуют с ежедневным (утром и вечером) двукратным измерением температуры тела, проверяют на пораженность гельминтами и при необходимости дегельминтизируют.
Всех животных исследуют на инфекционные болезни, согласно требованиям нормативно-технической документации.
Лошадей исследуют:
1. Caп
2. Трихомоноз
3. Бруцеллез
4. Туберкулез
5. Пироплазмидозы
6. Инфекционная анемия
Крупный рогатый скот исследуют:
1. Туберкулез
2. Бруцеллез
3. Лептоспироз
Свиней исследуют:
1. Туберкулез
2. Бруцеллез
Овец исследуют:
1. Бруцеллез
2. Туберкулез
3. Паратуберкулез и др.
При отборе животных-продуцентов учитывают их физиологические и иммуннобиологические показатели.
На активность выработки животным-продуцентом гипериммунной сыворотки антител влияют:
1. Тип нервной деятельности животного-продуцента
2. Реактивность организма
3. Порода
4. Пол
5. Конституция
6. Возраст
Лошадей используют в возрасте от 3 до 12 лет, помеси донской и казахской пород, массой 450-500 кг.
Волов используют в возрасте от 3 до 8 лет, массой не менее 350 кг, красностепной, калмыцкой, симментальской, швицкой астраханской пород.
Свиней используют в возрасте 5-6 месяцев, массой не менее 80 кг, крупной белой породы.
Овец, баранов и валухов используют в возрасте 2-3 лет и массой 30-45 кг (для получения диагностических сывороток и сывороточных сред).
Учитывая, что введение антигенов животным и периодическое кровопускание приводят к нарушению обмена веществ и анемии, а в ряде случаев, и к снижению титров антител, главное внимание уделяют вопросам полноценного, сбалансированного кормления животных-продуцентов.
|
Кормление животных-доноров отличается от кормления других животных и осуществляется по специально разработанным и утвержденным рационам.
Такие рационы должны содержать по 11-12 кормовых единиц и по 1000-1200 г переваримого протеина, а также включать сочно-витаминные корма и быть строго сбалансированными по минеральному составу.
Для восстановления крови после крововзятия важно правильно организовать минеральное кормление животных.
На 1 кг сухого корма лошадей должно приходиться:
железа - 145-165 мг;
меди - 15-18 мг;
кобальта -1,2-1,4 мг;
марганца - 9 мг.
Для восстановления красной крови лошадям вводят в рацион эритроциты, фибрин, кормовые антибиотики, проращенный овес. Иногда проводят реинфузию эритроцитов.
Кормят животных-продуцентов 3-5 раз в день, водопой - вволю, соль лизунец - вволю (кроме свиней).
Крупных животных содержат индивидуально, мелкий рогатый скот и свиней - группами.
Гипериммунизация животных
Гипериммунизация - это метод парэнтерального введения животным нарастающих доз соответствующих антигенов с целью получения наивысшей ответной имунологической реакции организма, а следовательно, и максимального увеличения в крови животных титра специфических антител, который должен обеспечить лечебный, профилактический и диагностический эффект препаратов.
При гипериммунизации сыворотка крови меняется. Обычно нарастает количество общего белка, увеличивается количество гамма- и бета- глобулиновых фракций, уменьшается содержание альбуминов.
Так, если в нормальной сыворотке крови лошадей альбумины составляют 50 % от общего количеств белков, то в иммунной сыворотке их бывает 35 % и ниже.
Успех гипериммунизации животных-продуцентов во многом зависит не только от тщательного их подбора, качества антигена и адьювантных веществ, но и от правильно выбранной схемы гипериммунизации, правильной технологии выполнения этих схем иммунизации, а также технологии кровопускания или обескровливания продуцентов в конце их эксплуатации.
|
Антиген вводится обычно подкожно или внутримышечно в несколько мест с таким расчетом, чтобы точки инъекции находились вблизи лимфатических узлов. При этом, в иммуногенез быстрее вовлекается большое количество лимфоузлов, что повышает общую и иммунологическую реактивность организма. Введение антигена одновременно в несколько мест, кроме того, обеспечивает лучшую рассасываемость его и появление более равномерных и менее болезненных инфильтратов.
Антигены в небольших дозах (5-25 мл) обычно вводят подкожно в верхнюю часть шеи животного, а в больших количествах - в область спины и крупа внутримышечно.
Нужно иметь в виду, что при введении животному больших доз антигена образуются инфильтраты и даже абсцессы. Но абсцессы обычно бывают стерильными.
Места введения антигена или крововзятия протирают дезинфицирующими растворами.
Для гипериммунизации, как было показано выше, чаще всего использую лошадей. Цикл гипериммунизации обычно длительный и составляет 1-2 и более месяцев. Впрочем, в каждом случае цикл иммунизации во многом зависит от вида получаемой гипериммунной сыворотки.
Например, для получения гипериммунной противосибиреязвенной сыворотки используют лошадей в возрасте от 3 до 10 лет. Вначале здоровым животным вводят четырехкратно вакцину Ценковского II для создания стойкого иммунитета (грундиммунизация), а потом лошадей подвергают гипериммунизации вирулентной суточной бульонной культурой возбудителя сибирской язвы. Всего используют 12 вирулентных штаммов возбудителя, комбинируя их по четыре в виде смеси для каждой иммунизации.
Гипериммунизацию лошадей начинают с малых доз: 0,5; 1,0; 2,5 и 5,5 мл с интервалом в трое суток. Затем культуры возбудителя сибирской язвы вводят с интервалами в 3-4 суток и в дозах 10,0; 20,0; 40,0; 80,0; 100,0; 110,0; 120,0; 130,0; 140,0; 150,0 мл.
Обычно бывает достаточным ввести антиген 13 раз, и сыворотка лошадей-продуцентов становится активной. При введении доз от 10 до 80 мл к культуре добавляют 0,2 % алюминиевых квасцов, а к дозам от 100 до 150 мл - 0,1 % квасцов. При повышении у животных температуры тела интервал между инъекциям увеличивают до 4 или 5 суток.
В каждом конкретном случае схемы иммунизации могут быть разными. Схемы иммунизаций отличаются одна от другой даже при получении одной и той же сыворотки.
Специалисты сывороточного производства считают, что каждое животное отличается индивидуальной реактивностью организма и для него необходима своя, отдельная схема гипериммунизации.
Разнообразие схем иммунизации определяется, по мнению Г.Е. Синельникова (1978) следующим:
- различием методов введения антигена;
|
- дозировкой антигена;
- количеством инъекций;
- интервалами между инъекциями;
- объемом забираемой у животного крови;
- кратностью цикловых кровопусканий.
Введение антигенов обычно не вызывает резких отклонений в состоянии здоровья животных, лишь иногда наблюдаются местные и общие реакции. Эффективность иммунизации животных повышается при дробном введении антигенов одновременно в различные участки тела с охватом возможно большего количества лимфатических узлов.
По окончании гипериммунизации, когда в сыворотке крови животного установлен максимальный титр специфических антител, у него берут кровь обычно через 7-10 суток после последней инъекции антигена. Этот период соответствует максимальному накоплению антител в крови животных и полностью укладывается в закономерности иммуногенеза.
Количество забираемой крови зависит:
- от массы животного;
- от привычки его к кровопотерям с учетом начального и последующих циклов;
- количества предполагаемых кровопусканий в данном цикле;
- количества титра антител;
- состояния здоровья животного.
К взятию крови животных приучают постепенно.
Обычно при каждом крововзятии кровь берут из яремной вены из расчета800 мл на каждые 50 кг массы животного (или 13 % к общей массе крови животного).
Многочисленные эксперименты и клинические исследования свидетельствуют о том, что гемодинамика, эритропоэз, лейкопоэз, регенерация сывороточных белков, функциональное состояние различных органов при кровопусканиях в значительной мере зависит от дозы и кратности взятия крови.
Однократное кровопускание, в дозах не превышающих 1 % от массы тела животного, не вызывает заметных гемодинамических, гемоцитологических и биохимических сдвигов в ближайшие сроки от момента взятия крови.
В то же время установлено, что двукратное кровопускание стимулирует образование иммуноглобулинов М (IgМ), плазмоцитарную реакцию лимфоидных органов, влияет на уровень гамма- и бета- глобулинов, повышает синтез пропердина, лизоцима и бета-лизинов, увеличивает бактерицидность сыворотки крови и фагоцитарную активность лейкоцитов, повышает превентивные свойства сыворотки а также сопротивляемость организма инфекции.
Совершенно иным является эффект многократных взятий крови. Они приводят к изменению иммунных реакций. В частности, они стимулируют образование различных факторов иммунитета, но угнетают активность IgM-антител.
Тотальное обескровливание проводят тогда, когда решается вопрос о прекращении использования животных как продуцентов. Обычно это делают в момент максимального накопления антител и появления тенденции снижения их синтеза.
Перед тотальным взятием крови для получения её в наибольших количествах животным обычно вводят сердечные вещества. Но нужно отметить, что животные-продуценты могут пройти несколько циклов гипериммунизации (5-8) и решение вопроса о тотальном кровопускании принимается строго индивидуально.
Гамма – глобулинов
В предупреждении инфекционных болезней и лечении больных животных большую роль играют глобулиновые препараты. К ним относятся ''неспецифический'' (нормальный) гамма-глобулин, полученный из сыворотки крови здоровых животных, а также иммунные глобулины, выделенные из гипериммунных сывороток или сывороток переболевших животных (сыворотка животных-реконвалисцентов).
Огромное значение имеют глобулиновые препараты для сохранения новорожденного молодняка с/х животных.
Начиная с 1946 г., после того, как была установлена высокая эффективность гамма-глобулина при кори, в нашей стране стал выпускаться гамма-глобулин для медицинских целей. Медицинская промышленность, выпускала гамма-глобулин, полученный как из сыворотки крови человека, так и из сыворотки крови иммунизированных животных.
В конце 50-х годов было начато изучение профилактического и лечебного действия гамма-глобулинов в ветеринарии.
С 1962 г, на основании экспериментальных работ профессора Харьковского зооветеринарного института И.И. Лукашева и по его предложению, в нашей стране, впервые, на Орловской биофабрике было организовано производство гамма-глобулина против болезни Ауески из гипериммунной сыворотки.
Существует целый ряд комбинированных методов получения гамма-глобулиновых препаратов. Однако из большого числа предложенных методов получения гамма-глобулинов производственное значение имеют не многие. К ним относятся: солевой, спиртовой, риваноловый и спиртово-хлороформный.
Содержание гамма-глобулинов в сыворотке крови животных
Содержание гамма-глобулина в сыворотке крови животных различно и непостоянно. Оно подвержено не только индивидуальным колебаниям, но и, в значительной мере, зависит от упитанности, возраста, пола, породы, полового цикла, беременности, времени и условий исследований.
Особенно изменяется содержание гамма-глобулинов и белкового спектра сыворотки крови, в целом, при различных воспалительных процессах, инфекционных заболеваниях. Этот фактор является одним из диагностических признаков. Значительно увеличивается содержание гамма-глобулина при иммунизации животных, под воздействием введенного антигена.
Содержание белковых фракций в сыворотке крови у разных видов животных и человека представлены в таблице 3 (по Д.Л. Фердману).
Таблица 3
Содержание белковых фракций в сыворотке крови
Объект | Белковые фракции, в относительных % | |||
альбумины | Глобулины | |||
альфа | бета | гамма | ||
Человек Корова Лошадь Свинья Овца Кролик Морская свинка | 55.2 41.0 32.0 42.0 57.0 60.0 56.0 | 5.3 13.0 14.0 16.0 11.0 7.0 14.5 | 8.7 8.0 24.0 17.0 7.0 12.0 8.0 | 30.0 38.0 30.0 25.0 25.0 21.0 21.5 |
Изучением содержания белковых фракций в сыворотке крови здоровых животных занимался В.М. Красов (1969 Г.). Им, совместно с И.Н. Кацовой и Т.В. Малишевской, был изучен белковый спектр сыворотки крови семнадцати видов животных и пяти видов птиц.
При исследованиях также было установлено, что у молодых особей содержание гамма-глобулина значительно ниже, чем у взрослых, а у новорожденных он отсутствует совсем.
Литературные данные показывают, что изменения белковой картины крови начинаются с эмбрионального развития организма.
Так, например, у эмбрионов большой группы млекопитающих в сыворотке крови отсутствуют гамма-глобулины и встречается особый белок, открытый и названный Педерсоном фетуином. После рождения фетуин исчезает. У эмбрионов некоторых грызунов и приматов доказано наличие в сыворотке гамма-глобулинов в той же относительной концентрации, что и у взрослых, и отсутствие фетуина.
Различие в составе сывороточных белков у эмбрионов млекопитающих связанно с морфологическими особенностями строения плаценты. Гамма глобулины обнаружены в крови тех животных, у которых строение плаценты обеспечивает тесный контакт с кровью матери и зародыша и делает возможным переход гамма-глобулинов из материнской крови в кровь эмбриона. Фетуин же найден у млекопитающих с монослойной плацентой, через которую гамма-глобулин не может поступить в кровь эмбриона.
Так, например, в плазме новорождённого жеребёнка содержится 3,7 % белка, из них альбумина – 65 %, альфа-глобулина –32 %, бета-глобулина –3 %, а гамма-глобулина –0 % (Пенсон, 1943). Гамма-глобулин отсутствует и в сыворотке крови новорождённого телёнка, однако, через 18-20 часов после дачи молозива его содержание можно обнаружить биохимическими методами.
А.В.Соколов с сотрудниками (1956) обнаружил, что гамма-глобулины у поросят попадают в сыворотку крови только из молока матери и что новорождённые в течение 3 недель после рождения не способны самостоятельно продуцировать сывороточный гамма-глобулин. Были проведены и другие исследования, которые показали, что имеющиеся в молозиве гамма-глобулины сыворотки крови матери, очевидно, проникают в кровь сосунов через желудочно-кишечный тракт непереваренными.
Гамма-глобулина
В настоящее время разработан метод выделения гамма-глобулина методом ультрафильтрации. Для этого используют ультрафильтрационные модули на полых волокнах, отличающиеся пределом задержания по молекулярной массе на 5000, 15000, 50000, 100000 дальтон. В соответствии с этим используют модули УФУ-5, УФУ-15, УФУ-100, УФУ-50.
Для задержания гамма-глобулинов лучше использовать установку УФУ-100, обеспечивающую полную задержку гамма-глобулинов в фильтрате, т.к. молекулярная масса гамма-глобулина составляет 160000-900000 дальтон.
Производственные опыты по ультрафильтрации сыворотки дали возможность сконцентрировать её в 3 раза и практически без потерь иммуноглобулиновых компонентов (Школьников Е.Э. и др., 1996).
В условиях хозяйства
В условиях хозяйства можно легко и просто получить гамма-глобулин риваноловым методом и использовать его для профилактики болезней молодняка и лечения больных животных.
Например. Берут кровь от клинически здоровых коров хорошей упитанности (вакцинированных против различных инфекционных болезней; животных-реконвалесцентов, не являющихся микробоносителями; за 2 месяца до отела или через 2 недели после отела).
От одной коровы можно брать до 3 литров крови из яремной вены.
Кровь отстаивают при комнатной температуре до полного свертывания и отделяют сыворотку. К 100 мл сыворотки крови добавляют 30 мл 3 %-ного раствора риванола (этакридин лактат). Сыворотка мутнеет, в результате выпадения в осадок альбуминов, альфа- и бета-глобулинов, которые связываются с риванолом. Смесь сыворотки и риванола отстаивают в течение 30 минут в условиях холодильника (4° С). Затем в полученный раствор добавляют поваренную соль (NaCl) из расчета 0,5-0,8 % к объему раствора (0,65-1,04 г на 130 мл объема сыворотки с риванолом) для дополнительного осаждения балластных белков и уплотнения осадка. Смесь сыворотки, риванола и соли отстаивают в течение 1 часа при комнатной температуре и фильтруют через бумажные обеззоленные фильтры. На фильтре остаются альбумины, альфа- и бета-глобулины, а также риванол, в фильтрате - гамма-глобулин.
Раствор гамма-глобулина должен быть прозрачным, желтоватого или розоватого цвета. Препарат фасуют в стерильные стеклянные флаконы и закрывают резиновыми пробками. Флаконы и пробки стерилизуют кипячением в течение 1 часа.
Затем проводят контроль качества готового препарата.
В условиях хозяйства можно провести контроль на стерильность и безвредность полученного гамма-глобулина.
Для определения стерильности укупоренный флакон гамма-глобулина помещают в теплое место (возле батареи или калорифера) на 3 суток. Стерильный раствор гамма-глобулина через 3 суток останется прозрачным. Если раствор помутнел, значит в нем размножаются микроорганизмы. Всю полученную партию гамма-глобулина бракуют.
Для определения безвредности полученного гамма-глобулина, его вводят здоровому теленку в дозе 1,0 мл на 1 кг живой массы подкожно или внутримышечно. Если препарат безвреден, то изменений в общем состоянии животного не наблюдается.
Полученный гамма-глобулин применяют подкожно, для профилактики желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка животных в дозе 0,5 мл на 1 кг живой массы 1 раз в день 2 дня подряд, с терапевтической целью – в дозе 1,0 мл на 1 кг живой массы 1 раз в день 3 дня подряд. Первую инъекцию гамма-глобулина животному вводят дробно: вначале 1:10 дозы, через 15 минут (если не отмечаются отклонения в общем состоянии животного) вводят оставшееся количество препарата. Гамма-глобулин, полученный риваноловым методом, можно также давать животным внутрь.
Гамма-глобулин должен храниться при t = 40 С, в темном месте. Срок годности 0,5-1,0 год с момента изготовления препарата.
Практическая работа
Список использованной литературы
1. Балашенко С. Г., Урбан В, П. Иммунные глобулины в ветеринарии.- Минск.- Урожай, 1972.
2. Кленина Н. В. Гамма-глобулины в ветеринарии.- Минск.-Урожай, 1971.
3. Коноковский А. И. Биохимия животных. - М., Колос.- 1992.
4. Коляков Я. Е. Ветеринарная иммунология. - М., Агропромиздат.-1986.
5. Мешков Н.П., Северин С.И. Практикум по биохимии.- М., изд. МГУ, 1989.
6. Сафонов А.Ф., Пирожков Г. В. Получение и применение неспецифического гамма-глобулина. /Сб. науч. тр. КНИВИ, 1990.
7. Синицин В. А., Резуненко Е. В. Кириллов В. А. Фракционирование белков плазмы крови с целью препаративного получения гамма-глобулинов и альбумина - УААН, Институт экспериментальной клинической ветеринарной медицины, Харьков, 1995.
8. Тутов И. К Ситьков В. И. Основы биотехнологии ветеринарных препаратов. - Ставрополь, 1997.
9. Фримель Г. Иммунологические методы. -М.: Медицина 1987.
Содержание
1. Основы биотехнологии производства гипериммунных
сывороток…………………………………………………………………..7
1.1. Отбор животных-продуцентов. Грундиммунизация…..………..9
1.2. Гипериммунизация животных………………………………….13
1.3. Приготовление сывороточных препаратов…………………....16
2. Основы биотехнологии производства гамма – глобулинов………...19
2.1. Общие сведения о гамма-глобулинах………………………..…20
2.2. Содержание гамма-глобулинов в сыворотке крови животных.22
2.3. Связь гамма-глобулина с антителами…………………..………24
2.4. Основные типы иммуноглобулинов……………………..……..26
2.5. Методы получения гамма-глобулинов…………………..……..27
2.5.1. Электрофоретическое разделение белков………………..…..28
2.5.2. Разделение белков методом хроматографии…………….…..28
2.5.3. Ультрафильтрационный метод выделения
гамма-глобулина …………………………………………………………29
2.5.4. Метод солевого фракционирования (высаливание)………...29
2.5.5. Спиртовой метод получения гамма-глобулина……………...34
2.5.6. Спиртово-хлороформенный метод получения гамма-глобулина…………………………………………………………………38
2.5.7. Риваноловый метод получения гамма-глобулина…………...39
3. Контроль готового препарата гамма-глобулина…………………….40
4. Получение гамма-глобулина на биопредприятиях……………….43
3. Получение гамма-глобулина риваноловым методом в условиях хозяйства………………………………………………………………….44
4. Применение гамма-глобулинов в ветеринарии…………………45
7. Практическая работа……………………………………………....46
8. Список использованной литературы……………………………..47
Смотреть ещё материал на: ЛитРес, My-shop.ru, Ozon.ru
медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина
|
|
Двойное оплодотворение у цветковых растений: Оплодотворение - это процесс слияния мужской и женской половых клеток с образованием зиготы...
Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни...
Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰)...
Эмиссия газов от очистных сооружений канализации: В последние годы внимание мирового сообщества сосредоточено на экологических проблемах...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!