Определение температурного оптимума

Инкубация параллельных посевов при t 25°-30°-37° на ско­шенном агаре Сабуро. Используется для дифференциации Т. men-tagrophytes и Т. terrestre, а также Т. verrucosum и Т. schonleinii.

IV. Серологические и аллергологические исследования.

4.1. Серологические тесты: реакция преципитации в варианте иммунодиффузии в агаровом геле. Сыворотка пациента вносится в центральную лунку, сделанную в агаровом геле, и антигены куль­тур различных видов вносятся в окружающие лунки. Результаты учитываются через 48 и 72 часа инкубации при комнатной темпе­ратуре и затем через 2-3 дня в холодильнике. Для проверки спе­цифичности линий преципитации в центральную лунку вносится капля 1,5 % ЭДТА, и через 1 час неспецифические линии преци­питации исчезают.

4.2. Аллергологические тесты: внутрикожные тесты с трихофи-тином, активным компонентом, которого является галактоманнан-пептид. Углеводный компонент выявляет немедленный тип аллер­гии (ГНТ), а белковая составляющая связана с выявлением кле­точного иммунитета (ГЗТ). Больные, не проявляющие ГЗТ или дающие ГНТ, часто имеют хроническую форму дерматофитоза.

Характеристика и дифференциация основных возбудителей дерматофитозов

Е. floccosum (синонимы Е. inguinale, E. cruris).

Антропофил. Поражает кожу паховых складок, голеней, меж­пальцевые складки стоп, ногти.

Первичные культуры развиваются на 4-5 день. Колонии склад­чатые, куполообразные, мучнистые. Цвет колонии желтый с зеле­новатым оттенком, обратная сторона от желтой до коричневой.

При микроскопии культуры видны многочисленные тонко- и гладкостенные, тупоконечные макроконидии с 2-6 перегородками, одиночные или по 2-8 в виде гроздьев бананов. Микроконидии от­сутствуют. При старении культур появляются хламидоспоры и арт-роспоры. Минимальная ингибирующая концентрация гризеофульви-на, подавляющая рост культур Е. floccosum, составляет 1 мкг/мл.

Род Microsporum

М. audouinii. Антропофил. Поражает волосистую часть головы у детей с флюоресценцией волос и гладкую кожу.

Первичные культуры развиваются на 6-8 день. Колонии мед­леннорастущие, плоские, пушистые, с радиальными складками. Поверхность от белой до кремовой, обратная сторона желтовато-коричневая. При микроскопии видны редкие бугристые, толсто­стенные макроконидии и полиморфные микроконидии.

В старых культурах многочисленные хламидоспоры. Рост гри­ба стимулирует добавление к среде никотиновой кислоты. Мини­мальная ингибирующая концентрация гризеофульвина составляет 1 мкг/мл.

Отличить гриб от сходных культур М. canis можно по слабому росту на полированном рисе, по отсутствию способности гидроли-зоватъ желатин и использовать мочевину, NH4NO3 и трегалозу как единственные источники азотного и углеродного питания.

М. canis (синонимы М. lanosum, M. felineum). Зоофильный дер-матофит (кошки, собаки). Поражает волосистую часть головы у де­тей с флюоресценцией волос, гладкую кожу и пушковые волосы.

Первичные культуры развиваются на 5-10 день. Колонии евгони-ческих штаммов быстрорастущие, плоские, пушистые. Цвет поверх­ности от серого до кремового, обратная сторона желто-оранжевая. Дисгонические штаммы кожистые, приподнятые и пигментирован­ные. При микроскопии видны многочисленные веретеновидные, ост­роконечные макроконидии с бугристой и толстой стенкой (2 мк), со­стоящие из 3-15 клеток. Встречаются микроконидии.

В старых культурах многочисленные хламидоспоры. По нашим данным, 94% штаммов имеют МИК 5 мкг/мл, и отдельные штам­мы подавляются лишь 7,5 и 20 мкг/мл гризеофульвина.

Отличить гриб от сходных культур М. audouinii можно по хо­рошему росту на полированных рисовых зернах, способности гид-ролизовать желатин и использовать мочевину, NH4NO3 и трегало­зу в качестве единственных источников азотного и углеродного питания, а также по наличию совершенной формы Nannizziae otae.

М. ferrugineum (синоним Т. ferrugineum). Антропофил. Поражает волосистую часть головы у детей с флюоресценцией волос и реже гладкую кожу. Первичные культуры развиваются на 8-10 день. Колонии медленнорастущие, складчатые, кожисто-восковидные, иногда бархатистые. Цвет поверхности и обратной стороны оранжевый.

При микроскопии культур видны: бамбуковидный мицелий, гребешковые гифы, рога оленя, цепочки артроспор, обилие хламидоспор. Конидии отсутствуют. Минимальная ингибирующая кон­центрация гризеофульвина составляет 5 мкг/мл.

Отличать следует от сходных культур Т. schoenleinii по типу по­ражения волос и их флюоресценции, по способности усваивать трегалозу и неспособности усваивать мочевину. От культур Т. verrucosum отличается флюоресценцией пораженных волос, пигментацией колоний и отсутствием потребности в витаминах. От сходных куль­тур Т. soudanense отличается по типу поражения волос и их флюо­ресценции, бесцветными колониями на рисовой среде и сусло-агаре, а также наличием уреазной активности на 8-14 день (у Т. soudanense она отсутствует) и неспособностью усваивать мальто­зу и сахарозу как единственные источники углеродного питания.

М. gypseum. Почвенный дерматофит вызывает микозы гладкой кожи и волосистой части головы. Волосы поражаются по типу крупноспорового эндотрикса, флюоресценция волос отсутствует или очень слабая.

Первичные культуры развиваются на 3-5 день. Колонии быст­рорастущие, плоские, мучнистые, с возрастом становятся бархати­стыми. Поверхность колоний кремовая, обратная сторона имеет разнообразную пигментацию.

При микроскопии видны многочисленные бугристые, веретеновидные, тонкостенные макроконидии из 3-9 клеток. Расположены на мицелии поодиночке или в виде гроздьев. Изредка встречаются немногочисленные микроконидии. Минимальная ингибирующая концентрация гризеофульвина составляет от 1 до 10 мкг/мл.

Гриб отличается от сходных культур М. cookei отсутствием красного пигмента, тонкостенными макроконидиями и наличием совершенных форм Nannizzia gypsea, N. incurvata.

М. nanum. Зоофильный гриб распространен в Северной Аме­рике и Австралии, вызывает микозы кожи и волосистой части го­ловы. Волосы поражаются по типу крупноспорового эктоэндотрикса, флюоресценция отсутствует или слабая.

Первичные культуры развиваются на 6-8 день. Колонии быст­рорастущие, плоские, пушистые, с возрастом мучнистые. Цвет по­верхности от белого до кремового, обратная сторона красноватая.

При микроскопии отмечается обилие характерных овальных и грушевидных тонкостенных макроконидий, состоящих из 1-3 кле­ток. Редкие булавовидные микроконидии. Совершенная форма Nannizzia obtusa.

Род Trichophyton

Т. mentagrophytes. Имеет две основные разновидности:

а) var. gypseum (мучнистый) и

б) var. interdigitale (пушистый). Гриб вызывает микозы гладкой кожи, ногтей, реже волосистой части головы у человека. Волосы поражаются по типу мелкоспорового эктотрикса, не флюоресци­руют. Гипсовидный вариант выделяют от грызунов и крупных млекопитающих.

Первичные культуры развиваются на 5-7 день. Колонии быст­рорастущие, имеют различия у обоих вариантов:

а) у гипсовидного они мучнистые, иногда складчатые; поверх­ность кремовая, обратная сторона коричневая;

б) у пушистого они плоские, бархатисто-пушистые, с возрас­том несколько мучнистые; поверхность белая, обратная сторона желто-коричневая.

При микроскопии у гипсовидного варианта наблюдают обилие округлых, реже грушевидных микроконидий, часто расположен­ных гроздьями. У пушистого варианта количество микроконидий умеренное. У обоих вариантов встречаются 5-8-клеточные гладко-и тонкостенные макроконидии и в разном количестве завитки и спирали. Минимальная концентрация гризеофульвина, подавляю­щая рост гриба - 5 мкг/мл.

Совершенные формы гриба Arthroderma benhamiae, A. van-breuseghemii.

В отличие от сходных культур Т. equinum, гриб хорошо растет на человеческом волосе in vitro и образует органы-перфораторы, не ну­ждается в никотиновой кислоте для своего роста. Дня дифференциа­ции от сходных культур Т. simii следует помнить, что макроконидии Т. simii склонны к образованию хламидоспор и распаду, а также, что микроконидии Т. simii полиморфные и волосы морских свинок по­ражаются им по типу эктоэндотрикс с зеленой флюоресценцией.

Т. rubrum (синонимы Т. purpureum, E. rubrum). Антропофил.

Преобладающий возбудитель онихомикозов, микозов стоп, кистей, кожи в области складок и гладкой кожи. Волосы поражает редко, без флюоресценции.

Первичные культуры развиваются на 8-10 день. Колонии бы­строрастущие, бархатистые (иногда мучнистые или складчатые). Поверхность белая (розовая или винно-красная по краям), обрат­ная сторона пурпурная, красная. Пигмент не диффундирует в сре­ду. Уреазу не продуцирует. Нет потребностей в витаминах.

При микроскопии отмечают многочисленные полиморфные микроконидии, расположенные по обеим сторонам гифа, или реже гроздьями. Редкие макроконидии из 3-5 клеток напоминают по форме «карандаш». У 95 % испытанных штаммов минимальная ингибирующая концентрация гризеофульвина 2,5 мкг/мл и ниже, отдельные штаммы ингибируются 5 и 7,5 мкг/мл.

Атипичные беспигментные штаммы Т. rubrum можно дифферен­цировать от Т. mentagrophytes var. interdigitale по отсутствию орга­нов-перфораторов на волосе in vitro, по замедленной (на 8-21) или отсутствующей уреазной активности и по большей чувствительности к гризеофульвину. Образование пигмента культурами Т. rubrum сти­мулируется на среде Сабуро, на картофельном, кукурузном или со­евом агаре. От сходных культур Т. gallinae гриб отличается наличием уреазной активности. От сходных культур Т. megninii его можно от­личить по отсутствию потребности в L-гистидине.

Т. schoenleinii (синоним Achorion schoenleinii).

Поражает волосистую часть головы и гладкую кожу с образо­ванием скутул (фавус). Волосы имеют слабую светло-зеленую флюоресценцию.

Колонии медленнорастущие, приподнятые, складчатые с кожисто-восковидной поверхностью, иногда с коротким пушком. Цвет поверхности от серого до кремового, обратная сторона желтая. При микроскопии можно отметить гребешковые гифы, рога оленя, фавические канделябры. Много хламидоспор. Конидии отсутст­вуют. Минимальная ингибирующая концентрация гризеофульвина составляет 1-2,5 мкг/мл.

От сходных культур Т. verrucosum отличается характером по­ражения волоса и способностью расти на средах без тиамина. От культур М. ferrugineum отличается характером поражения волоса и способностью усваивать мочевину как единственный источник азотного питания. От культур Т. concentricum отличается клиниче­ской картиной вызываемого поражения и менее пигментирован­ными колониями.

Т. tonsurans (синонимы Т. acuminatum, Т. cerebriforme, Т. crateriforme, T. sulfureum). Антропофил.

Поражает волосистую часть головы, гладкую кожу, изредка ногти, вызывает сикоз. Волосы поражаются по типу эндотрикс, не флюоресцируют.

Культуры развиваются на 4—6 день. Колонии медленнорасту­щие, сухие, плотные, мучнистые, складчатые. Поверхность серая или кремовая, обратная сторона от коричневой до охряной.

При микроскопии отмечается обилие полиморфных микрокони­дий, редкие веретеновидные макроконидии. При старении культуры появляется обилие хламидоспор и артроспор. Рост культур стимули­руется тиамином. Расщепляет мочевину. Минимальная ингибирую-щая рост концентрация гризеофульвина от 1 до 10 мкг/мл.

От сходных культур Т. equinum отличается типом поражения волос и потребностью в тиамине. От культур Т. rubrum отличается потребностью в тиамине и быстрым (за 8 дней) гидролизом моче­вины. От культур Т. soudanense отличается пигментацией колоний, потребностью в тиамине, наличием уреазной и отсутствием гемо­литической активности.

Т. verrucosum (синонимы Т. album, T. ochraceum, T. discoides).

Зоофильный дерматофит (крупный рогатый скот, дикие и до­машние животные) поражает гладкую кожу, реже волосистую часть головы человека. Волосы поражаются по типу крупноспоро­вый эктотрикс, не флюоресцируют.

Первичные культуры развиваются от 10 до 30 дней. Оптималь­ная температура роста 37°. Колонии медленнорастущие, складча­тые, кожисто-восковидные, иногда бархатисто-мучнистые. По­верхность серая, кремовая, обратная сторона желтоватая.

При микроскопии наблюдаются фавические канделябры, рога оленя, многочисленные хламидоспоры. В мучнистых культурах отмечаются микроконидии и макроконидии, имеющие характер­ную форму «крысиного хвоста». Рост культур стимулируется тиа­мином и витаминами (инозитом). Минимальная ингибирующая концентрация гризеофульвина составляет 1-5 мкг/мл.

От сходных культур Т. schoenleinii гриб можно отличить по происхождению из характерных очагов поражения, характеру по­ражения волос, потребности в витаминах. От культур Т. сопсеп-tricum отличается по характеру вызываемых клинических пораже­ний и потребности в витаминах. От культур Т. yaoundei отличается по пигментации колоний и потребности в витаминах.

Т. violaceum (синонимы Т. glabrum, T. puinosum).

Поражает волосистую часть головы, гладкую кожу. Волосы поражаются по типу эндотрикс, не флюоресцируют.

Культуры развиваются на 15-20 день. Колонии медленнора­стущие, складчатые, приподнятые, восковидные, фиолетовые с поверхности и с обратной стороны. Непигментированные вариан­ты называются Т. glabrum.

Конидии, как правило, отсутствуют или очень редкие. При микроскопии видны гребешковые гифы, фавические канделябры, в старых культурах цепочки хламидоспор или артроспоровый мице­лий. Рост культур стимулируется тиамином. Минимальная инги­бирующая концентрация гризеофульвина составляет 1-10 мкг/мл.

От культур Т. yaoundei гриб можно отличить по пигменту и по стимуляции роста тиамином. От сходных культур Т. gourvilii от­личается отсутствием микроконидий, стимуляцией роста тиами­ном и наличием уреазной активности.