Диагностическое лабораторное обследование на ККГЛ

Алгоритм лабораторного тестирования крови (сыворотки) на ККГЛ:

1-й образец берется при госпитализации и тестируется в ПЦР и ИФА Ag и ИФА IgM1;

2-й образец** берется через пять - семь дней после первого образца (чтобы интервал от начала заболевания до забора образца приходился на 7-9-й день заболевания) и тестируется в ПЦР (только ПЦР, нельзя заменять на ИФА Ag*) и ИФА IgM2 и IgG1***;

3-й образец берется через пять дней после второго образца и тестируется в ИФА IgM3 + ИФА IgG2***.

Лабораторное обследование на ККГЛ, укушенных клещами, без наличия клинических симптомов не проводится, так как у лиц, находящихся в инкубационном периоде и еще не имеющих симптомов, результаты тестов будут заведомо отрицательными.

 Во время эпидемического сезона лаборатории особо опасных инфекций (далее – ООИ) ЦСЭЭ осуществляют большой объем исследований на ККГЛ, включая тестирование клещей и человеческих образцов. Недопустимо сокращение алгоритма лабораторного обследования человеческих образцов в пользу тестирования клещей. Приоритет всегда должен отдаваться тестированию человеческих образцов, взятых у предположительных или вероятных случаев ККГЛ, а не клещей, так как клинические случаи заболевания человека представляют собой больший риск для окружающих людей, также своевременная диагностика важна для эффективного ведения пациентов.

Забор и обработка образцов крови для диагностических целей необходимо проводить с соблюдением мер инфекционного контроля и биологической безопасности, установленных Санитарными правилами «Санитарно-эпидемиологические требования к объектам здравоохранения» утвержденными государственным органом в сфере санитарно-эпидемиологического благополучия населения и в соответствии c разработанными стандартными операционными процедурами (далее – СОП) по забору, хранению, транспортировке биообразцов на ККГЛ согласно приложению 1 к настоящим Методическим рекомендациям.

 Примечание: * если образец был взят через 5 или более дней после начала симптомов, в таких случаях рекомендуется проводить ПЦР, так как результативность ИФА Ag к этому времени значительно снижается;

**в редких случаях, когда пациент поступает в стационар поздно, то есть второй образец крови приходиться на период более 10 дней от начала заболевания, (и, следовательно, ПЦР уже не работает и даст заведомо отрицательный результат), то рекомендуется второй образец тестировать в ИФА IgM и IgG;

*** образцы на IgG желательно забирать до введения иммунной плазмы для облегчения интерпретации результата.

 При направлении клиницистами образцов в лабораторию, каждый отобранный образец сопровождается «Направлением» согласно приложению 2 к настоящим Методическим рекомендациям, которое заполняется в обязательном порядке в медицинском организации. Все пункты направления являются важными для выбора соответствующего алгоритма обследования и интерпретирования результата.

Забор пробы крови производится у предположительных или вероятных случаев для диагностического тестирования на ККГЛ в достаточном количестве (не менее 5 мл).

Перед началом тестирования, сыворотка аликвотируется. Одна аликвота должна тестироваться в лаборатории ООИ ЦСЭЭ, вторая аликвота, подписанная таким образом, чтобы можно было идентифицировать образец и связать его с конкретным пациентом и формой расследования заболевания, замораживается при температуре -70⁰ С и хранится в лаборатории ЦСЭЭ до отправки в лабораторию ООИ Научно-практического центра санитарно-эпидемиологической экспертизы и мониторинга Комитета по защите прав потребителей Министерства национальной экономики Республики Казахстан (далее – НПЦСЭЭМ).

 Ежемесячно замороженные аликвоты всех диагностических образцов, собранных для тестирования на ККГЛ (сыворотка, ткани), как положительных, так и отрицательных с соблюдением холодового режима направляются в НПЦСЭЭМ в установленном порядке для хранения и проведения подтверждающего тестирования.

В НПЦСЭЭМ исследуется 100% положительных образцов и при большом количестве отрицательных образцов (более 100) производится случайная выборка 10-20% отрицательных образцов для исследования. При малом числе отрицательных образцов – исследуются все имеющиеся образцы.

Эпидемиологическое расследование случая ККГЛ и мероприятия
в очаге

 При выявлении больного c подозрением на предположительный случай ККГЛ медицинская организация немедленно по телефону и в течение 3 часов направляет экстренное извещение в территориальное подразделение ведомства государственного органа в сфере санитарно-эпидемиологического благополучия населения.

 Эпидемиолог заполняет анкету эпидемиологического расследования случая ККГЛ согласно приложению 3 к настоящим Методическим рекомендациям, контролирует госпитализацию больного и лабораторное обследование данного случая согласно установленному алгоритму в полном объеме.

После развития геморрагического синдрома или лабораторного подтверждения случая ККГЛ подается экстренное извещение на вероятный или подтвержденный случай в установленном порядке в территориальные подразделения ведомства государственного органа в сфере санитарно-эпидемиологического благополучия населения для проведения эпидемиологического расследования, установления контактных лиц (контакт с больным или контакт с теми же факторами риска, что и случай), определения степени риска контакта и проведения противоэпидемических мероприятий в очаге, включающих дезинфекцию и акаридизацию.

 По мере заполнения карт эпидемиологического расследования случая ККГЛ составляется построчный список в приложении и таким образом, формируется база данных, которую можно анализировать в любой аналитической программе.

 Данные описывают по месту, времени (эпидемическая кривая), человеку, факторам риска стратифицируя по категориям стандартного определения случая (предположительный, вероятный, подтвержденный). Оперативный эпидемиологический анализ позволит отслеживать эпидемическую ситуацию, определить полноту и своевременность лабораторного обследования, лечения, корректировать санитарно-противоэпидемические и санитарно-профилактические мероприятия.

Необходимо анализировать численность зарегистрированных укусов по времени и территории, для чего использовать эпидемическую кривую, и сопоставлять ее c аналогичной кривой за предыдущий год. С учетом имеющихся свидетельств о корреляции числа укусов с числом случаев ККГЛ по месту и времени, полезным будет совместить эпидемиологическую кривую укусов и случаев ККГЛ.

Проводя эпидемиологическое расследование вероятного или подтвержденного случая ККГЛ, данные по контактным лицам собираются и заносятся в «Список контактных лиц со случаем ККГЛ» согласно приложению 4 к настоящим Методическим рекомендациям. Собираются следующие данные:

  Фамилия, имя, отчество, идентификационная информация и основные сведения o случае;

Фамилия, имя, отчество и идентификационная информация по контактным лицам (номер телефона, адрес и т.д.);

уточняется тип контакта для того, чтобы определить уровень риска заражения ККГЛ (например, прямой контакт с кровью или жидкостями организма, или непрямой контакт);

дата последнего контакта со случаем ККГЛ;

уточняется медицинская организация и медработник, осуществляющий медицинское наблюдение за контактными лицами;

результаты медицинского наблюдения и исходы.

Контактные лица различается в зависимости от степени риска заражения.

 Различают высокий и умеренный риск заражения ККГЛ.

К высокому риску заражения относятся, лица с известным прямым (непосредственным) контактом c кровью или выделениями вероятного или подтвержденного случая ККГЛ, как например, укол иглой от шприца или попадание крови на кожу или слизистые поверхности глаз или носа.

Рекомендуется следующий алгоритм действий в отношении контактов высокого риска заражения ККГЛ – немедленное исследование сыворотки на исходный уровень IgG и IgM, ПЦР в реальном режиме и начать лечение рибавирином в соответствии с утвержденным Протоколом лечения. Также таким лицам должен проводиться дважды в сутки мониторинг температуры и других клинических признаков ККГЛ в течение 14 дней после контакта.

Если клинические признаки не разовьются в этот период, то следует взять второй образец сыворотки крови на IgG и IgM, ПЦР в реальном режиме по окончании срока наблюдения. На контактное лицо с высоким риском заражения необходимо заполнить анкету эпидемиологического расследованию случая ККГЛ согласно приложению 4 к настоящим Методическим рекомендациям.

К умеренному риску заражения относятся непрямой домашний или другой контакт c вероятным или подтвержденным случаем ККГЛ, когда контактировавший имел одинаковый риск инфицироваться через укус клеща или контакировал с теми же животными, что и случай, или имелся непрямой домашний или госпитальный контакт с жидкостями тела больного.

В таких случаях необходимо проводить мониторинг температуры и других клинических признаков ККГЛ дважды в день, в течение 14 дней после контакта.

Если в течение периода наблюдения у контактного разовьются лихорадка 38⁰ С и выше и какой-нибудь клинический признак предгемморагического периода ККГЛ (головная боль, миалгия, тошнота, рвота или диарея), то случай следует рассматривать как вероятный случай ККГЛ. Такого человека необходимо госпитализировать, начать лечение рибавирином в соответствии c утвержденным Протоколом и протестировать на ККГЛ, а также заполнить анкету эпидемиологического расследования случая ККГЛ согласно приложению 3 к настоящим Методическим рекомендациям.

По окончании срока наблюдения за контактными лицами, «Список контактных лиц со случаем ККГЛ» вкладывается в анкету эпидемиологического расследования случая ККГЛ для последующего проведения эпидемиологического анализа.