Виды анализа на хеликобактер пилори.

Анализ кала

Этот анализ является качественным, то есть отвечает на вопрос, есть ли хеликобактер пилори в организме или нет. Исследование проводится в лаборатории методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Анализ отличается высокой точностью — до 95%. Данный анализ является самым простым видом диагностики. Его рекомендуют детям, пожилым людям и тяжелобольным пациентам.

Анализ крови

§ Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген хеликобактер пилори в человеческом организме вызывает ответную реакцию иммунной системы — выработку антител, или иммуноглобулинов. Данный анализ, как и анализ кала, является качественным. В роли биоматериала выступает венозная кровь. Помимо описанных выше симптомов и состояний, этот анализ также назначают в качестве профилактического обследования лицам, имевшим бытовые контакты с людьми, страдающими заболеваниями желудочно-кишечного тракта.

§ Метод вестерн-блота. Данное исследование проводится, если у пациента обнаружены антитела к хеликобактер пилори. Этот анализ является более специфичным методом диагностики, так как дает дифференцированные сведения об антителах. Точность определения количества антител достигается путем разделения с помощью электрофореза белков экстракта бактерии. Биоматериал для исследования — венозная кровь.

Гистологический метод.

ГМ позволяет непосредственно визуализировать НP и может быть рекомендован для первичной диагностики у больных, которым показана ЭГДС

ГМ позволяет непосредственно визуализировать НP и может быть рекомендован для первичной диагностики у больных, которым показана ЭГДС

ГМ позволяет непосредственно визуализировать НP и может быть рекомендован для первичной диагностики у больных, которым показана ЭГДС. Материалом исследования является биоптат СОЖ. Преимуществами ГМ являются простота исполнения, удобство хранения, транспортировки. Специфичность гистологического метода может достигать 100%, а чувствительность – 91–93%.

Высокочувствительным (97%) и высокоспецифичным (100%) методом для диагностики инфекции НР является флюоресцентная гибридизация in situ (метод FISH) на гистологических препаратах. Метод FISH может идентифицировать кокковидную форму НР, которая обычно не обнаруживается путем рутинного гистологического исследования. Кроме того, FISH – это быстрый, точный и экономически эффективный метод обнаружения устойчивости к кларитромицину НР в образцах биопсии желудка.

Несмотря на высокую чувствительность гистологического метода, на его диагностическую точность могут оказать влияние количество биоптатов и место их забора. Для получения оптимальной информации рекомендуется множественная биопсия, которая также обеспечивает морфологическую оценку СОЖ [19]. Сиднейская система рекомендует исследование не менее пяти биоптатов: по два из антрального отдела (2–3 см от привратника по большой и малой кривизне), по два из тела желудка (по большой и малой кривизне, примерно в 8 см от кардии) и один из угла желудка. Ценность исследования повышается при оценке степени и стадии гастрита по системе OLGA или OLGIM, которые позволяют оценить прогноз заболевания.

При малой обсемененности НР, а также при утрате бактерий в процессе подготовки препаратов вероятны ложноотрицательные результаты. При слабой подготовке гистолога возможна идентификация в качестве НР других микроорганизмов – ложноположительный результат.

Чувствительность и специфичность ГМ у пациентов с кровотечением из верхних отделов ЖКТ в среднем ­составляют лишь 70%.Поэтому к вопросу диагностики и лечения НР следует вернуться в период ремиссии в плановом порядке.

Следует учитывать, что обнаружить НР удается только на достаточно тонких и хорошо окрашенных срезах. При наличии атрофических изменений в СОЖ повышается частота ложноотрицательных результатов. Более того, в области кишечной метаплазии HР в большинстве случаев не обнаруживается ни при обычных, ни при специальных методах окрашивания, несмотря на серологические признаки инфекции. Исчезновение HР коррелирует с развитием кишечной метаплазии и снижением секреции желудка [22]. У пациентов, принимающих антисекреторные средства (H2-блокаторы, ИПП), препараты висмута и антибиотики, чувствительность и специфичность ГМ снижены.Универсальной рекомендацией является отмена ИПП за 2 нед до проведения исследования, антибиотиков и препаратов висмута – за 30 дней.

Цитологический метод является одним из вариантов гистологического исследования. Материалом являются мазки-отпечатки биоптатов СОЖ, взятых при эндоскопическом исследовании, которые в последующем высушиваются и окрашиваются по методу Романовского–Гимзы.

Быстрый уреазный тест.

БУТ является непрямым методом диагностики НР на основе выявления уреазной активности бактерии.

БУТ является непрямым методом диагностики НР на основе выявления уреазной активности бактерии. Тест требует взятия биоптата СОЖ, который помещается в пробирку (лунку) с мочевиной и индикатором на жидкостной, гелевой или сухой основе. По изменению цвета индикатора при повышении рН среды в результате расщепления мочевины микробной уреазой можно с достаточно высокой точностью идентифицировать НР. В клинической практике при наличии показаний к эндоскопии и отсутствии противопоказаний к проведению биопсии БУТ рекомендуется использовать в качестве диагностического метода первой линии.

Чувствительность БУТ в зависимости от количества биоптатов варьирует в пределах 80–90% (по другим данным – от 61 до 74%.Увеличение количества биоптатов, их забор из двух отделов желудка (из тела и антрума) позволяют увеличить чувствительность БУТ.При использовании качественных тестов и нескольких гастробиоптатов, хорошей обработке биопсийных щипцов специфичность теста может достигать 95–100% (по другим данным – 90%.Ложноположительные результаты наблюдаются редко и могут быть обусловлены присутствием других уреазосодержащих бактерий, таких как Proteus mirabilis, Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae и Staphylococcus aureus. Ложноотрицательные результаты теста наблюдаются чаще, чем ложноположительные, что не позволяет использовать отрицательный результат для исключения НР.Ложноотрицательные результаты могут быть получены у пациентов, перенесших язвенное кровотечение, на фоне приема ИПП, антибиотиков, препаратов висмута, а также при выраженной атрофии или метаплазии СОЖ.

Таким образом, положительный результат БУТ свидетельствует о наличии НР и дает возможность назначать лечение, но отрицательный – не позволяет исключить НР, поэтому БУТ не рекомендован для оценки эффективности эрадикации.

Быстрый уреазный тест. Для его проведения используются: гель-носитель, в котором содержится мочевина раствор азида натрия раствор фенол-рота Суть метода в том, что биоптаты, получаемые при эндоскопии, помещаются в специальную среду, и если в материале содержится хеликобактер пилори, то тест окрашивается в малиновый цвет. Время, за которое происходит окрашивание теста также говорит об уровне инфицирования организма бактериями.

Быстрый уреазный тест Во время гастроскопии эндоскопистом проводится биопсия слизистой желудка в области пилорического отдела и измененных участков. Для выявления в кусочке ткани желудка уреазы необходимо поместить материал в специальную среду, которая содержит мочевину и индикатор. При наличии хеликобактерного фермента мочевина расщепится на углекислый газ и ионы аммония. рН среды отклонится в щелочную сторону и индикатор отобразит это сменой цвета.

Подготовка.

За две недели перед проведением диагностики следует отказаться от приема препаратов висмута (Де-Нол), ингибиторов протонной помпы (Омепразол, Пантопрозол, Омез, Квамател), антибиотиков. Накануне исследования легких ужин за 8 часов до проведения гастроскопии. Воду не пить после полуночи.

 Методика проведения.

Быстрый уреазный тест или «CLO-тест», «Де-Нол-тест», «ХЕЛПИЛ-тест» проводится по следующему алгоритму: с помощью щипцов на конце эндоскопа проводится биопсия ткани – отщипывание кусочка с области дна и тела желудка; материал помещается в среду, содержащую мочевину и индикатор феноловый красный; положительный результат фиксируется в случае изменения цвета индикатора с желтого на ярко-красный.

 Расшифровка показателей.

 Результат ставится на основании интенсивности окраски индикатора. Эндоскопист оценивает окраску плюсами.

+ — 1 степени уреазной активности, низкий уровень Хеликобактер, окраска появляется в течение суток.

 ++ — 2 степень уреазной активности, умеренный уровень заражения бактерией, индикатор приобретает красный цвет в течение двух часов.

+++ — 3 степень уреазной активности, значительный уровень инфицирования, ярко-красный цвет индикатора в течение часа от проведения исследования.