Выделение микроорганизмов, участвующих в круговороте азота

 

Для выявления аммонифицирующих бактерий в почве использовали метод посева из почвенных суспензий в ряд пробирок с МПБ. После 7 суток ингибирования, наличие аммонификаторов выявляют по помутнению среды и выделению газа (табл. 3).

 

 

Таблица 3

Признаки роста на МПБ

Признаки	Разведения
	1	2	3	4	5	6	7
пленка	+	+	-	-	+	-	-
муть	+	+	+	-	-	-	-
осадок	+	+	-	-	-	-	-
выделение H2S	+	+	-	-	-	-	-
выделение NH3	-	-	-	-	-	-	-

 

Микроскопировали пробирки, где было обнаружено признаки роста. Признаки роста были обнаружены в пробирках с 10^-1 и 10^-2 разведением. При микроскопировании были обнаружены грамположительные и грамотрицательные палочки.

В почве были обнаружены аммонифицирующие бактерии. Для обнаружения нитрофицирующих бактерий использовали накопительную среду Виноградского (2 фаза). После 2 недель инкубации смотрели на наличие признаки роста. Для обнаружения продуктов жизнедеятельности нитрифицирующих бактерий проводили качественные реакции с раствором Гриса (1 фаза) и дифениламином (2 фаза).

В колбе со средой Виноградского 1 фазы (10^-1 разведение) после инкубации произошло помутнение среды. При проведении качественной реакции с реактивом Гриса наблюдали положительную реакцию (красное окрашивание). При микроскопировании обнаружили грамположительные палочки и кокки. При проведении качественной реакции с дифениламином получили положительный результат. При микроскопии обнаружили грамположительные палочки и кокки.

В результате обнаружения денитрофицирующих микроорганизмов были обнаружены грамположительные палочки относится к роду Bacillus. Были обнаружены анаэробные микроорганизмы, численность составила 2,6 КОЕ/г.

После инкубации в средах появились трещины, что указывает на выделение газов.

Для обнаружения азотофиксирующих бактерий использовали метод почвенных комочков. По 10 комочков на две чашки Петри со средой Эшби. Через недели в первой чашке обнаружили 5 комочков, во второй – 6.

 При микроскопировании ни в одной из колоний не обнаружили азотобактер.

Выделение микроорганизмов, участвующих в круговороте фосфора

        

Для выделения и изучения микроорганизмов, участвующих в круговороте фосфора, использовали картофельный агар и агар Муромцева.

На 8 сутки чашки заросли колониями микроорганизмов. Наблюдалось потемнение картофельного агара и помутненее среды Муромцева.

При исследовании чашек с картофельным агаром было выделено 2,1*10⁶ КОЕ/г микроорганизмов. При исследовании чашек с агаром Муромцева было выделено 5,1*10⁶ КОЕ/г. Встречались актиномицеты, бактериальные колонии и колонии представителей рода Penicillium и А spergillus.

        

Выявление микроорганизмов, участвующих в аэробном и анаэробном разложении клетчатки

 

Для обнаружения аэробных целлюлозразрушающих микроорганизмов использовали 2 колбы со складчатым фильтром на дне. После 2 недель наблюдали ослизнение конусов, также в колбе со 10^-2 разведением конус осел на дно.

В колбе с 10^-1 и 10^-2 разведением обнаружил колонии белого и черного цвета. Также наблюдали зеленые колонии плесневых грибов. Численность целлюлозразрушающих микроорганизмов составила 2,1*10³ КОЕ/г. При микроскопировании выявили грамположительные неспорообразующие палочки и кокки.

Для обнаружения анаэробных целлюлозразрушающих микроорганизмов использовали 2 высокие пробирки с полосками фильтровальной бумаги. После двух недель наблюдали пожелтение и ослезнение бумаги. При микроскопировании обнаружили грамположительные палочки.

 

Выявление микроорганизмов, вызывающих маслянокислое брожение

 

Для выявления микроорганизмов, вызывающих маслянокислое брожение, использовали пробирки со средой Виноградского для маслянокислых бактерий с небольшим количеством крахмала, засевали 10^-1 и 10^-2 разведения. После недели инкубации микроскопировали и проводили качественные реакции.

В результате:

1. Реакция обнаружения масляно-этилового эфира. Этилбутират не образовался.

2. Реакция с хлорным железом. Жидкость приобрела более темную окраску, следовательно, образовалось маслянокислое железо.

При микроскопировании обнаружили грамположительные палочки и маслянокислые бактерии относится к роду Clostridium.

 

 

ВЫВОДЫ

1. в результате исследования пробы почвы, отобранной с территории парка АГУ, обнаружили, что данная почва сухая имеет слабокислую реакции среду.

2. В результате исследования микробиологических показателей почвы из парка АГУ были выделены и изучены почвенные бактерии, актиномицеты, дрожжи и микромицеты.

3. В результате исследования микробиологических показателей почвы из парка АГУ были обнаружены и изучены микроорганизмы участвующие в трансформации соединений углерода, азота и фосфора.

 

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Азнаурьян, Д. К. Изменение эколого-биологических свойств почв юга России при загрязнении нефтью: [Текст] автореф. дис. …канд. биол. наук: 03.00.16 / Азнаурьян, Д. К. – Ростов-на-Дону, 2009. – 22 с.

2. Борисова, А. Г. Микробиологическая активность в почвах разного

генезиса и техногенной трансформации [Текст] Вестник молодых ученых и специалистов Самарского государственного университета.. № 27 Самара, 2013

3. Глазовская, М. А. Способность окружающей среды к самоочищению /[Текст] Глазовская, М. А. // Природа. – 1979. – № 3. – С. 71.

4. Давыдова, С.Л., Тагасов В.И. Нефть и нефтепродукты в окружающей среде: Учеб. пособие. - М.: Изд-во РУДН, 2004. - 163 с.

5. Егоров, Н. С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии [Текст]: учебное пособие / Н. С. Егоров: под ред. Н. С. Егорова – 3-е изд., перераб. и доп. – М.: Издательство МГУ, 1995. - 224 с.: ил.; 25 см – Библиогр.: с. 114-117 – 1000 экз. – ISBN 5-211-03358-2.

6. Евдокимова, Г.А. Биоразнообразие почвенной биоты как фактор устойчивости почв к загрязнению [Текст] Евдокимова Г.А., Мозгова Н.П. / Тезисы Всероссийского совещания «Антропогенное воздействие на природу Севера и его экологические последствия» 1998 г.

7. Звягинцев, Д.Г. Биология почв: Учебник. [Текст] Звягинцев, Д. Г., Бабьева, И. П., Зенова, Г. М. — 3-е изд., испр. и доп. — М.: Изд-во МГУ, 2005. — 445 е., илл. — (Классический университетский учебник). ISBN 5-211-04983-7

8. Трушина, Т.П. Экологические основы природопользования. – Ростов н/Д: [Текст].«Феникс», 2001. – 384 с

9. Федоров, А.И. Практикум по экологии и охране окружающей среды: [Текст]. Учеб. Пособие для студентов высших учебных заведений/ А.И. Федоров, А.Н. Никольская.– М: Гуманит. Изд. Центр ВЛАДОС, 2001. – 288с:ил.

10.  Нетрусов, А. И. Практикум по микробиологии [Текст]: учебное пособие для студентов вузов / А. И. Нетрусов, М. А. Егорова, Л. М. Захарчук и др.: под ред. А. И. Нетрусова – М.: Издательский центр «Академия», 2005. - 608 с.: ил.; 26 см – Библиогр. с. 56-93 – 3000 экз. – ISBN 5-7695-1809-х

11.  Федоров, А.И. Практикум по экологии и охране окружающей среды: [Текст]. Учеб. Пособие для студентов высших учебных заведений/ А.И. Федоров, А.Н. Никольская.– М: Гуманит. Изд. Центр ВЛАДОС, 2001. – 288с:ил.

12. Новикова, О. В. Проблемы экологической безопасности на железнодорожном транспорте [Текст] Новикова О. В. №12 Год: 2016 С.: 57-62 УДК: 502.17:656.2

13. Киреева, Н. А. Микробиологические процессы в нефтезагрязненных почвах / Н. А. Киреева. – М.: [Текст] Наука, 1995. – 178 с.

14. Ковда, В. А. Почвенный покров как компонент биосферы [Текст] Доклад члена-корреспондента АН СССР В. А. КОВДЫ. № 9

15. Колесников, С. И. Биодиагностика экологического состояния почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами / С. И. Колесников, К. Ш. Казеев, В. Ф. Вальков, Д. К. Азнаурьян, М. Г. Жаркова. – Ростов н/Д: [Текст] Изд-во ЗАО Ростиздат, 2007. – 192 с.

16. Колесников, С.И. Экологические последствия загрязнения почв тяжелыми металлами / [Текст] С.И. Колесников, К.Ш. Казеев, В.Ф. Вальков. – Ростов н/Д: СКНЦ ВШ, 2000. – 232 с.

17. Янкевич, М.И. Оценка качества окружающей среды с помощью изучения содержания тяжелых металлов и численности микромицетов в почве [Текст] Янкевич, М.И. 1986.-187 с.

18. Fagestrom T. Population dynamics in sessile organisms: some general results from threeseemingly different theory-lineages // [Текст].Oikos. 1997. V. 80. № 3. P. 588 594.

19. Gleick, P. H. Global Freshwater Resources: Soft-path Solutions for the 21th Century //[Текст] Science. - 2003. - 302, № 5650. - P. 1524-1527.

20. Henze M., Armes P., La Cour-Jansen., Arvan E. [Текст]. «Wastewater treatment.» Per. with English. - M.: "World", 2006.