История развития хранилищ для нефти: Первые склады нефти появились в XVII веке. Они представляли собой землянные ямы-амбара глубиной 4…5 м...
История создания датчика движения: Первый прибор для обнаружения движения был изобретен немецким физиком Генрихом Герцем...
Топ:
Оценка эффективности инструментов коммуникационной политики: Внешние коммуникации - обмен информацией между организацией и её внешней средой...
Характеристика АТП и сварочно-жестяницкого участка: Транспорт в настоящее время является одной из важнейших отраслей народного...
Интересное:
Наиболее распространенные виды рака: Раковая опухоль — это самостоятельное новообразование, которое может возникнуть и от повышенного давления...
Уполаживание и террасирование склонов: Если глубина оврага более 5 м необходимо устройство берм. Варианты использования оврагов для градостроительных целей...
Принципы управления денежными потоками: одним из методов контроля за состоянием денежной наличности является...
Дисциплины:
2017-10-11 | 552 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Цель. Определение состава фекальной микрофлоры: выделение чистой культуры фекальных микроорганизмов и идентификация.
Исследуемый материал – различные разведения фекалий в физиологическом растворе от 101 до 1011.
1-й этап. Получение изолированных колоний фекальной микрофлоры.
Ход работы.
1.Делают посевы соответствующих разведений испражнения на среды:
-для выявления анаэробных бифидобактерий необходимо делать посевы фекалий в разведениях от 106 до 1011 глубоким уколом в пробирки с полужидкой средой Блаурококка (печеночно-МПА с цистеином и лактозой);
- для выделения E.сoli - на среду Эндо (Левина),
-для выделения патогенных энтеробактерий (сальмонелл, шигелл и др.) – на среду Плоскирева,
-для выделения Proteus vulgaris - посев по Щукеевичу в конденсационную воду скошенного МПА,
-для выделения стафилококков с лецитиназной активностью – на желточно-солевой агар,
-для выделения гемолитических бактерий - на кровяной агар,
-для выделения грибов рода Кандида - на среду Сабуро и др.
2.Все посевы помещают в термостат при 37°С на 18-24 часа, Блаурококка – 48 час., за исключением среды Сабуро (при 28-30°С на 3-5 дней).
2-й этап. Выделение чистой культуры.
Ход работы.
1. Подсчет колоний и макроскопическое описание их:
Выделение чистой культуры бифидобактерий является весьма трудоемким и практически необязательным, так как определение разведения, в котором обнаруживают бифидобактерий является вполне достаточным для оценки нормального или пониженного содержания их в фекалиях. Из посевов, в которых виден рост в виде помутнения всей среды или отдельных колоний, готовят мазки и окрашивают их по Граму. Обнаружение характерных грамположительных палочек с разветвлениями на концах в виде римской цифры V, с несколько утолщенными концами подтверждает их принадлежность к бифидобактериям (рис.24).
|
-на среде Эндо: определение общего количества E.сoli, подсчет лактозонегативных (бесцветных) и со слабовыраженными ферментативными свойствами (розывые) колоний (рис.25);
-на среде Плоскирева - бесцветных колоний патогенных энтеробактерий (сальмонелл, шигелл и др.);
-на скошенном МПА - рост Proteus vulgaris по всей поверхности;
-на желточно-солевой агаре - лецитиназная активность стафилококков проявляется в виде радужного помутнения вокруг колоний (рис.26);
-на кровяном агаре – колонии бактерий, обладающих гемолитической активностью;
-на среде Сабуро – колонии грибов рода Кандида округлой формы, выпуклые, с гладкой поверхностью, ровными краями, матового цвета. Из подозрительной колонии готовят неокрашенный препарат. При его микроскопии должны быть почкующиеся овальные клетки - псевдомицелии (почкующиеся клетки распалагаются в цепочку). Окрашиваются по Граму положительно.
2.Микроскопическое исследование колоний.
3.Пересев небольшой части колоний на скошенную среду.
4. Инкубация в термостате при 37°С в течение 18-24 часа.
3-й этап. Идентификация выделенной чистой культуры.
Ход работы.
1. Макроскопическое определение роста микробов.
2. Проверка на чистоту выделенной чистой культуры – микроскопическое исследование.
3. Окончательная идентификация по ферментативной активности путем пересева на диференциально-диагностические среды и по др. признакам.
4-й этап. Учет результатов идентификации и оформление заключения о наличие и степени дисбактериоза.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО МИКРОБНОГО ЧИСЛА (МЕТОД КОХА) И САНИТАРНО - ПОКАЗАТЕЛЬНЫХ МИКРОБОВ ВОЗДУХА
Для оценки санитарно-бактериологического состояния воздуха определяют следующих показателей: микробного числа воздуха (количество микробов в в 1м3 воздуха) методами осаждения по Коху и аспирации по Кротову, наличие зеленящего стрептококка путем посева воздуха на кровяной агар с добавлением генцианового фиолетового (среда Гарро), для обнаружения S. aureus – на желточно-солевой агар, для обнаружения других патогенных бактерий – соответствующие элективные питательные среды.
|
Определение микробного числа воздуха методом Коха проводится в 2 этапа:
1 этап. Отбор пробы воздуха. Стерильные чашки Петри с МПА открывают в месте отбора проб воздуха и выдерживают в течение 10 мин, после чего закрывают и инкубируют при 370С в течение 48 часов.
2 этап. Учет результатов. По количеству выросших колоний подсчитывают микробное число воздуха, пользуясь формулой Омелянского, в соответствии с которым считают, что на поверхность питательной среды площадью 100см2 в течение 5 мин оседает столько микроорганизмов, сколько их содержится в 10 л воздуха:
Х – количество микробов в 1м3 воздуха
X = а – число колоний, выросших на чашке
в – площадь чашки Петри, равная ПR 2
Метод Кротова является более точным методом определения микробного числа воздуха с помощью специального прибора.
|
|
Адаптации растений и животных к жизни в горах: Большое значение для жизни организмов в горах имеют степень расчленения, крутизна и экспозиционные различия склонов...
Архитектура электронного правительства: Единая архитектура – это методологический подход при создании системы управления государства, который строится...
Наброски и зарисовки растений, плодов, цветов: Освоить конструктивное построение структуры дерева через зарисовки отдельных деревьев, группы деревьев...
Эмиссия газов от очистных сооружений канализации: В последние годы внимание мирового сообщества сосредоточено на экологических проблемах...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!