Состав сооружений: решетки и песколовки: Решетки – это первое устройство в схеме очистных сооружений. Они представляют...
Биохимия спиртового брожения: Основу технологии получения пива составляет спиртовое брожение, - при котором сахар превращается...
Топ:
Эволюция кровеносной системы позвоночных животных: Биологическая эволюция – необратимый процесс исторического развития живой природы...
Техника безопасности при работе на пароконвектомате: К обслуживанию пароконвектомата допускаются лица, прошедшие технический минимум по эксплуатации оборудования...
Генеалогическое древо Султанов Османской империи: Османские правители, вначале, будучи еще бейлербеями Анатолии, женились на дочерях византийских императоров...
Интересное:
Искусственное повышение поверхности территории: Варианты искусственного повышения поверхности территории необходимо выбирать на основе анализа следующих характеристик защищаемой территории...
Влияние предпринимательской среды на эффективное функционирование предприятия: Предпринимательская среда – это совокупность внешних и внутренних факторов, оказывающих влияние на функционирование фирмы...
Отражение на счетах бухгалтерского учета процесса приобретения: Процесс заготовления представляет систему экономических событий, включающих приобретение организацией у поставщиков сырья...
Дисциплины:
2017-10-11 | 653 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Метод используется для окраски кислотоустойчивых бактерий (M. tuberculosis, M leprae). Кислотоустойчивость связана с наличием в клеточной стенке и цитоплазме бактерий повышенного количества липидов, воска и оксикислот, в частности миколовой кислоты. Карболовая кислота разрыхляет клеточную стенку и тем самым повышает тинкториальные свойства, высокая концентрация красителя и нагревание усиливают реакцию взаимодействия клетки с красителями. При обработке препарата серной кислотой некислотоустойчивые бактерии обесцвечиваются и окрашиваются метиленовым синим в голубой цвет (рис.2 и 3).
Методика окраски:
Ход работы __________________________ 1.На фиксированный мазок накладывают белую фильтровальную бумагу и наливают фуксин Циля. Препарат 2-3 раза подогревают, держа высоко над пламенем до появления паров и каждый раз отставляя препарат в сторону для охлаждения. | Ориентировочные данные ___________________________ Карболовый фуксин- основная краска; прогревание – протрава. Наблюдать за появлением паров, глядя на мазок сбоку, а не сверху. __________________________ Серная кислота - обесцвечивающий фактор. Синька Леффлера – дополнительная краска. Кислотоустойчивые бактерии рубиново – красного цвета, а остальная микрофлора – синего цвета. |
2.Дают препарату остыть, бумагу сбрасывают и препарат промывают водой. | |
3.Препарат обесцвечивают в 5% растворе серной кислоты. | |
4.Промывают водой. | |
5.Докрашивают синькой Леффлера 3-5 минут. | |
6.Промывают водой, высушивают, смотрят под иммерсией. |
Окраска по Нейссеру
Метод используется для выявления зерен волютина у возбудителей дифтерии (С. diphtheria). В отличие от других коринобактерий у возбудителей дифтерии зерна волютина распалагаются на концах палочек.Этот сложный метод окраски включает несколько этапов:
|
1) фиксированный мазок окрашивают ацетатом синьки Нейссера
(основная окраска) в течение 2-3 мин.
2) наносят раствора Люголя (протрава) на 10-30 секунд;
3) промывают препарат водой;
4)окрашивают везувином (дополнительная окраска) в теч. 0,5-1 мин.
5) промывают препарат водой, высушить и микроскопируют.
Зерна волютина представляют собой соединения, имеющие в отличие от цитоплазмы щелочную реакцию, и поэтому избирательно воспринимают ацетат синьки, окрашиваясь в темно-синий цвет. Цитоплазма клетки, обладающая кислой реакцией, воспринимает щелочной краситель везувин и окрашивается в желтый цвет (рис.4).
Окраска по способу Ожешки
Метод Ожешки применяется для выявления спор. Этапы окраски:
1) на нефиксированный мазок наносят 0,5% раствор соляной кислоты и подогревают на пламени спиртовки 2-3 минуты;
2) кислоту сливают, препарат промывают водой, высушивают и фиксируют над пламенем;
3) окрашивают по Циль-Нильсену.
Споры бактерий окрашиваются в красный цвет, а вегетативные формы в синий (рис.5).
Обнаружение капсул по методу Бурри-Гинса
1. Смешать каплю взвеси микробных клеток с каплей туши и при помощи стекла со шлифовальным краем сделать мазок таким же образом, как мазок из крови, высушить и фиксировать.
2. На мазок нанести водный раствор фуксина на 1-2 мн.
3. Промыть водой, высушить на воздухе и микроскопировать. Бактерии окрашиваются в красный цвет, а неокрашенные капсулы контрастно выделяются на черно- розовом фоне (рис.6).
2.4 Методы определения подвижности бактерий
Микроскопические
Определение подвижности микроорганизмов методом
«раздавленной капли»
Жгутики являются органами движения бактерий, состоят из белка флагеллина. По количеству и характеру расположения жгутиков различают бактерии: монотрихи, лофотрихи, амфитрихи и перитрихи. Жгутики обладают антигенными свойствами (Н-антиген) и дают возможность бактериям перемещаться в жидкой среде.
|
О наличии жгутиков можно судить по характеру движения бактерий в «раздавленной» и «висящей» каплях при опущенном конденсоре и частично прикрытой диафрагме микроскопа.
Метод «раздавленной капли»
Культуру в изотоническом растворе хлорида натрия наносят на предметное стекло и сверху накладывают покровное. Капля материала должна быть такой величины, чтобы она заполняла все пространство между покровным и предметным стеклом и не выступала за пределы покровного. Препарат рассматривают с иммерсионной системой и слегка опущенным конденсором.
Метод «висячей капли»
Необходимо иметь предметное стекло с лупочкой. Каплю культуры наносят на покровное стекло. Сверху накладывают предметное стекло с лупочкой посредине, края которого предварительно обмазаны вазелином. Затем предметное стекло слегка прижимают к покровному, и препарат переворачивают покровным стеклом кверху. Получается герметично закрытая камера, в которой капля долго не высыхает.
Бактериологические
Метод Шукевича
Для этого каплю микробной взвеси наносят в конденсат скошенной плотной питательной среды в пробирке. Подвижные микробы (протей) способны подниматься вверх по скошенному агару, неподвижные формы остаются расти внизу на месте посева.
|
|
Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни...
Археология об основании Рима: Новые раскопки проясняют и такой острый дискуссионный вопрос, как дата самого возникновения Рима...
Эмиссия газов от очистных сооружений канализации: В последние годы внимание мирового сообщества сосредоточено на экологических проблемах...
Типы оградительных сооружений в морском порту: По расположению оградительных сооружений в плане различают волноломы, обе оконечности...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!