Биохимия спиртового брожения: Основу технологии получения пива составляет спиртовое брожение, - при котором сахар превращается...
Индивидуальные очистные сооружения: К классу индивидуальных очистных сооружений относят сооружения, пропускная способность которых...
Топ:
Оснащения врачебно-сестринской бригады.
Характеристика АТП и сварочно-жестяницкого участка: Транспорт в настоящее время является одной из важнейших отраслей народного...
Характеристика АТП и сварочно-жестяницкого участка: Транспорт в настоящее время является одной из важнейших отраслей народного хозяйства...
Интересное:
Финансовый рынок и его значение в управлении денежными потоками на современном этапе: любому предприятию для расширения производства и увеличения прибыли нужны...
Принципы управления денежными потоками: одним из методов контроля за состоянием денежной наличности является...
Аура как энергетическое поле: многослойную ауру человека можно представить себе подобным...
Дисциплины:
2017-09-27 | 511 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
1. Приготовить фиксированный препарат
2. Окрасить препарат 20% водным раствором таннина в течение 20-30 минут.
Микроскопическая картина: клеточная стенка окрашивается в жёлто-коричневый цвет.
Окрашивание ядер флуорохромом
1. Приготовить прижизненный препарат.
2. Добавить водный раствор акридинового оранжевого (1:5000) и выдержать в течение 10 минут.
3. Рассмотреть препарат в люминесцентном микроскопе.
Микроскопическая картина: цитоплазма – тёмно-зелёная, ядра – светло-зелёные, метахроматин – ярко-красный, вакуоли – розовые.
Окрашивание ядер нейтральным красным
1. Приготовить фиксированный препарат.
2. Окрасить препарат нейтральным красным в течение 5 минут.
3. Слить краситель и промыть препарат водой.
4. Рассмотреть препарат в люминесцентном микроскопе.
Микроскопическая картина: цитоплазма – зелёно-жёлтая, ядра – красные.
Выявление запасных полисахаридов
Гранулы полисахаридов выявляют при обработке клеток насыщенным раствором Люголя.
1. Внести культуру гриба в каплю раствора Люголя на предметном стекле.
2. Добавить каплю 1% НСl.
3. Накрыть покровным стеклом и микроскопировать.
Гранулы гликогеноподобных полисахаридов окрашиваются в красно-коричневый цвет. Полисахарид может быть распределён в цитоплазме или вакуолях не в виде гранул, а диффузно – в виде коричневатой области.
Выявление запасных липидов
Окраска запасных липидов в клетках грибов проводится также, как и окраска липидоподобного вещества прокариот - поли -β -оксимасляной кислоты.
3.6.1 Способ 1
1. Приготовить в воде прижизненный препарат на предметном стекле.
2. Добавить каплю раствора судана III.
3. Накрыть покровным стеклом и микроскопировать.
|
Капли липидов окрашиваются в красно-бурый цвет, цитоплазма остается бесцветной.
Способ 2
1. Приготовить прижизненный препарат в воде на предметном стекле.
2. Добавить каплю 40% формалина и выдержать 5 минут.
4. Добавить каплю метиленового синего, выдержать 10 минут.
5. Добавить каплю судана III.
6. Выдержать 5 минут, накрыть покровным стеклом и микроскопировать.
Капли липидов окрашиваются в розовый или оранжевый цвет, цитоплазма - в синий.
Выявление липидов без окрашивания
1. Приготовить препарат грибов в воде или в красителе метиленовом синем.
2. Накрыть покровным стеклом и микроскопировать.
Липиды видны в цитоплазме как сильно преломляющие свет (как бы светящиеся) капли.
Выявление полифосфатов
Полифосфаты (волютин, метахроматин) как резерв фосфорной кислоты образуются в клетках как прокариот, так и эукариот, и выявляются одинаковыми методами.
Окраска полифосфатов по методу Лёффлера
Метод основан на свойстве метахромазии – способности полифосфатов изменять цвет красителя (метиленового синего) - с синего на красный.
Фиксированный препарат окрасить в течение 5 минут метиленовым синим по Лёффлеру.
1. Краситель слить, препарат промыть водой, высушить и микроскопировать.
Микроскопическая картина: гранулы полифосфатов окрашены в красно-фиолетовый цвет, а цитоплазма - в голубой.
Окраска полифосфатов по методу Омелянского
Метод основан на плохой растворимости полифосфатов в кислоте.
1. Приготовить тонкий фиксированный препарат культуры.
2. Окрасить препарат фуксином Циля в течение 30 секунд.
3. Краску слить, препарат промыть водой.
4. Залить препарат на 20-30 секунд 1% раствором серной кислоты и немедленно промыть водой. Серная кислотаобесцвечиваетцитоплазму, а гранулы полифосфатов остаются окрашенными.
5. Препарат окрасить метиленовым синим (1:40) 20-30 секунд.
6. Промыть препарат водой, высушить.
Микроскопическая картина: гранулы полифосфатов окрашены в красный, цитоплазма клетки - в голубой цвет.
|
Выявление полифосфатов в вакуолях
Гранулы полифосфатов у эукариот образуются не только в цитоплазме, но и в вакуолях, где они часто движутся за счёт броуновского движения и поэтому их называют «пляшущими тельцами».
1. Приготовить препарат грибов в воде или в красителе метиленовом синем.
2. Накрыть покровным стеклом и микроскопировать.
Полифосфаты видны в вакуолях как дрожащие и переворачивающиеся гранулы.
Оформление результатов работы
1. Приготовить препараты и провести дифференциальную окраску:
1.1 Клеточной стенки таннином.
1.2 Запасных питательных веществ (гликогеноподобных полисахаридов, липидов, полифосфатов).
1.3 Ядра с помощью флуорохромов.
2. Приготовить прижизненные препараты из центра и края грибной колонии. Рассмотреть цитоплазму и зарисовать, обозначая вакуоли и гранулы.
5 Контрольные вопросы
1. Каков химический состав клеточной стенки грибов разных классов?
2. Назовите мембранные системы клетки грибов и их функции.
3. В чём заключается особенность организации ядерного аппарата грибов?
4. Грибы каких классов имеют подвижную стадию в жизненном цикле?
5. Какие структуры клетки грибов можно выявить методами дифференциального окрашивания?
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 6.
|
|
Эмиссия газов от очистных сооружений канализации: В последние годы внимание мирового сообщества сосредоточено на экологических проблемах...
Двойное оплодотворение у цветковых растений: Оплодотворение - это процесс слияния мужской и женской половых клеток с образованием зиготы...
Типы оградительных сооружений в морском порту: По расположению оградительных сооружений в плане различают волноломы, обе оконечности...
Состав сооружений: решетки и песколовки: Решетки – это первое устройство в схеме очистных сооружений. Они представляют...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!