Историки об Елизавете Петровне: Елизавета попала между двумя встречными культурными течениями, воспитывалась среди новых европейских веяний и преданий...
Адаптации растений и животных к жизни в горах: Большое значение для жизни организмов в горах имеют степень расчленения, крутизна и экспозиционные различия склонов...
Топ:
Устройство и оснащение процедурного кабинета: Решающая роль в обеспечении правильного лечения пациентов отводится процедурной медсестре...
Проблема типологии научных революций: Глобальные научные революции и типы научной рациональности...
Когда производится ограждение поезда, остановившегося на перегоне: Во всех случаях немедленно должно быть ограждено место препятствия для движения поездов на смежном пути двухпутного...
Интересное:
Уполаживание и террасирование склонов: Если глубина оврага более 5 м необходимо устройство берм. Варианты использования оврагов для градостроительных целей...
Что нужно делать при лейкемии: Прежде всего, необходимо выяснить, не страдаете ли вы каким-либо душевным недугом...
Влияние предпринимательской среды на эффективное функционирование предприятия: Предпринимательская среда – это совокупность внешних и внутренних факторов, оказывающих влияние на функционирование фирмы...
Дисциплины:
2017-06-29 | 701 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
В настоящее время установлено, что все виды бактерий имеют не только кольцевые ДНК, но и плазмиды – двухцепочечный дополнительный генетический аппарат, обладающий свойством репликона.
-Размеры самой маленькой плазмиды 0,5х10(в 6) мДа. Наличие даннойплазмиды позволяет синтезировать 1-2 белка средних размеров.
- Крупные плазмиды 300-400 мДа.
Существует корреляция между размером плазмиды и числом копий: мелкиеплазмиды – многокопийный (от 10-60). Молекулярная масса плазмид не должна превышать молекулярную массу хромосом. В некоторых условиях, например, при аминокислотном голодании, происходит амплификация плазмид – репликация хромосомной ДНК не происходит, а происходит только репликация плазмид, пока их копийность не достигнет тысяч.
Могут ли бактерии существовать без плазмид? Существуют штаммы бактерий, которых не существует в природе, и только у них нет плазмид.
Плазмиды позволяют бактериям занимать определенные экологические ниши. Плазмиды делятся на:
1)Конъюгативные (трансмиссивные) – могут самостоятельно передаваться из одной бактериальной клетки в другую через контакт.
2)Неконъюгативные– не обладают данной способностью.
По фенотипическим признакам плазмиды делятся на:
1. R-плазмиды – (от англ слова устойчивость), позволяют выжить в присутствии антибиотиков. Могут быть как конъюгативные, так и неконъюгативные.
Устойчивость к пенициллину: под контролем генов, происходит синтез фермента В-лакталаза. При действии пенициллина, этот фермент выделяется наружу и инактивирует пенициллин.
2. Плазмидыбактериоциогении. Первая открытая плазмида из этого класса Cal-плазмида – на кончиках плазмиды происходит синтез колицина (белок, выделенный из E-coli). Этот белок удалял бактерии, которые не содержали данного белка (киллеры).
|
3. Ent-плазмиды. E-coli – условно патогенная бактерия. В 80-е годы была эпидемия у поросят. Выделили плазмиды E-coli. Под контролем данных плазмид происходит синтез энтероцептина – токсичного белка, вызывающего эпидемии.
4. Д-плазмиды (плазмиды биодеградации). К ним относятся крупныеплазмиды (300-450 мДа). В зависимости от того, какой ген отвечает за синтез того или иного вещества, их называют: Tol (толуол), Sal (салициловая кислота) и др. В 1974 году Чакрабати сконструировал штамм бактерий – пожирателей нефти. На плазмиде он поместил несколько генов, отвечающих за синтез тех или иных веществ, расщепляющих нефтяные продукты. Значение: охрана окружающей среды. Такой же подход Чакрабати использовал для борьбы с пестицидами.
5. Ti-плазмиды. Вызывают образование злокачественных опухолей у растений. Тоже крупные плазмиды. Находятся эти плазмиды в агробактериях. Через повреждения могут встраиваться в хромосому, и там начинается синтез гормонов роста, клетки начинают безудержно делиться, вызывая злокачественные опухоли.
Если вырезать такой Т-участок из плазмиды, то способность к образованию злокачественных опухолей удаляется, а способность проникать в растительную клетку остается. Данный метод используют для получения трансгенных растений (голубые розы).
6.Криптические плазмиды. Фенотипически никак не выражаются, их можно обнаружить лишь биохимически. Они очень мелкие.
7. Факторы переноса (F-плазмиды). Мол.масса = 64 мДа, размеры = 31 мкм.
Наличие этой плазмиды придает свойство донора. У них имеется tra-оперон (22-23 гена). 13 генов отвечает за синтез пили на поверхности бактерии. Пили необходимы для стабилизации конъюгирующих пар.
8. Hlay-плазмиды – разрушают эритроциты крови.
Тема 7. Генетический анализ у прокариот.
Основные способы обмена генетической информацией у бактерий.
Трансформация – процесс, при котором происходит передача генетической информации от донора к реципиентной клетке посредством ДНК.
|
Трансформация возможна у целого ряда бактерий: Diplococcus, Bacillus, у цианобактерий, актиномицетов и др.
Та клетка, из которой выделяется ДНК, называется донором, а другая – реципиентной клеткой.
Для проведения трансформации необходимы маркеры на селективных средах.
Для того, чтобы ДНК проникла в реципиентную клетку, реципиентные клетки должны находиться в состоянии компетентности, т.е. клеточные стенки должны быть готовы поглотить ДНК (образуются поры).
Этапы трансформации:
Выделение хромосомной ДНК
-ДНК должна быть высокомолекулярной, размером 10(в7) Д.
-ДНК должна быть двуцепочечной.
Компетентность возникает в середине логарифмической фазе роста. Образуются поры. Этому способствует фактор компетентности - белок, который вырабатывается в ходе роста культуры.
Различают следующие стадии:
А)Обратимая адсорбция. ДНК связывается с поверхностью реципиентной клетки. ДНК, связанная с реципиентными клетками, расщепляется специальными нуклеазами до фрагментов с молекулярной массой 5 х 10(в6) Д.
Б) Необратимая адсорбция. Фрагменты ДНК попадают внутрь клетки. Фрагменты менее 5х10(в5) в клетку не проникают.
-После попадания в бактерию двуцепочечная ДНК превращается в одноцепочечную: одна нить ДНК деградирует.
-На заключительной стадии происходит интеграция одноцепочечного фрагмента с ДНК клетки-реципиента.
Весь процесс трансформации завершается в течение 10-30 минут.
Высев на селективные среды.
Трансформанты:
-одиночные (селекция по одному маркеру).
-двойные (селекция сразу по двум маркерам, генам).
Частота появления двойных трансформантов очень низкая.
|
|
Автоматическое растормаживание колес: Тормозные устройства колес предназначены для уменьшения длины пробега и улучшения маневрирования ВС при...
Двойное оплодотворение у цветковых растений: Оплодотворение - это процесс слияния мужской и женской половых клеток с образованием зиготы...
Историки об Елизавете Петровне: Елизавета попала между двумя встречными культурными течениями, воспитывалась среди новых европейских веяний и преданий...
История создания датчика движения: Первый прибор для обнаружения движения был изобретен немецким физиком Генрихом Герцем...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!