Эмиссия газов от очистных сооружений канализации: В последние годы внимание мирового сообщества сосредоточено на экологических проблемах...
Кормораздатчик мобильный электрифицированный: схема и процесс работы устройства...
Топ:
Генеалогическое древо Султанов Османской империи: Османские правители, вначале, будучи еще бейлербеями Анатолии, женились на дочерях византийских императоров...
Проблема типологии научных революций: Глобальные научные революции и типы научной рациональности...
Установка замедленного коксования: Чем выше температура и ниже давление, тем место разрыва углеродной цепи всё больше смещается к её концу и значительно возрастает...
Интересное:
Наиболее распространенные виды рака: Раковая опухоль — это самостоятельное новообразование, которое может возникнуть и от повышенного давления...
Уполаживание и террасирование склонов: Если глубина оврага более 5 м необходимо устройство берм. Варианты использования оврагов для градостроительных целей...
Берегоукрепление оползневых склонов: На прибрежных склонах основной причиной развития оползневых процессов является подмыв водами рек естественных склонов...
Дисциплины:
2017-06-25 | 737 |
5.00
из
|
Заказать работу |
Адсорбционная хроматография основана на различной степени адсорбции компонентов исследуемой пробы на пористом адсорбенте. В зависимости от агрегатного состояния подвижной фазы различают твердожидкостную адсорбционную или газоадсорбционную хроматографию.
Пористые материалы обладают способностью достаточно прочно сорбировать различные вещества. В твердожидкостном варианте на границе твердой и жидкой фаз частицы твердого адсорбента обтекаются подвижной фазой, несущей в растворенном виде анализируемую биопробу. Ее разделение происходит за счет того, что компоненты с различной прочностью удерживаются на поверхности адсорбента. При выполнении газоадсорбционного варианта растворитель заменяется на газ-носитель, который переносит по колонке газообразную смесь компонентов биопробы.
В качестве неподвижной фазы в адсорбционной хроматографии используются несколько видов материалов.
Силикагель. Этот материал получают из золей кремневой кислоты, при этом в зависимости от условий проведения реакции образуются нерегулярные или сферические частицы различной величины и пористости. Хроматографию при нормальном давлении обычно проводят на сорбентах с размерами частиц 40...60 мкм, при высоком давлении — на сорбентах с размерами 3, 5, 7, 10 мкм. Важной характеристикой сорбента наряду с размерами частиц является средний диаметр их пор.
Силикагели применяются:
· для фракционирования неполярных и малополярных веществ;
· контроля качества разделения (главным образом, при высоком
давлении на колонках с размером частиц 3...15 мкм);
· препаративного фракционирования при нормальном давлении
на сорбентах с размерами частиц 10...30 мкм;
· препаративного разделения в производственном масштабе на
сорбентах с диаметрами частиц 60...200 и 200...500 мкм.
Оксид алюминия. Этот адсорбент характеризуется не только размерами частиц, но и кислотно-основными свойствами: водная суспензия адсорбента может иметь кислую, нейтральную или основную реакцию. Кроме того, адсорбент может обладать различной степенью активности.
Оксид алюминия применяют для решения тех же задач, что и силикагель: на кислом оксиде алюминия разделяют вещества с кислотными свойствами (фенолы, карбоновые кислоты). На основном оксиде алюминия фракционируют основания (амины), а также удаляют перекиси, присутствующие в органических растворителях (эфире, диоксане и др.).
Поверхностно-модифицированный силикагель. К находящимся на поверхности частиц диоксида кремния атомам Si могут быть прикреплены различные группы (например, посредством ковалентной связи), полностью покрывающие поверхность силикагеля, вследствие чего полярный сорбент приобретает гидрофобные свойства. Наиболее прочная адсорбция неполярных и умеренно полярных соединений наблюдается в водной среде. Десорбция происходит в присутствии органических растворителей. Поверхностно-модифицированные силикагели применяют, в основном, в хроматографии с обращенными фазами для аналитического и полупрепаративного разделения, главным образом, полярных веществ.
Производные агарозы различных марок. В этом виде адсорбента в качестве основы (матрицы) используется агароза, сшитая специальным химическим соединением, которая несет гидрофобные группы сорбента, способные вступать во взаимодействие с цепями аминокислотных остатков белков. Производные агарозы применяются для фракционирования белков по их гидрофобным свойствам. Разделение проводится в водной среде (что важно при работе с белками).
В колоночной хроматографии применяются и другие адсорбенты:
· целлюлоза;
· производные декстрана (сефасорб и др.), представляющие собой жестко сшитый гидроксипропильными мостиками слабонабухающий декстран. За счет жесткости структуры частицы сефасорба устойчивы при давлении до 107 Па. Сорбент производится в виде мелкого порошка (с диаметром частиц до 10...23 мкм), что позволяет существенно повысить разрешающую способность.
Технологическая процедура пробоподготовки в адсорбционной хроматографии имеет некоторые особенности. При проведении колончатой хроматографии биопробу предварительно растворяют в элюенте, а при необходимости — дополнительно фильтруют или центрифугируют с целью удаления примесей (пылинок, коллоидных частиц). Поскольку при клинических анализах часто возникает необходимость в определении небольших количеств органических веществ в большом объеме биологических жидкостей (мочи, ликвора и др.), то в ряде случаев используют достаточно сложную процедуру получения исходного вещества биопробы (присутствие в пробах солей и белков заметно затрудняет проведение анализа).
Технологическая процедура анализа методом твёрдожидкостной адсорбционной хроматографии включает следующие операции.
1. Подготовка колонки. Как правило, сорбент суспендируют в растворителе, в котором предполагается проводить элюирование, а за тем проводят деаэрацию в вакууме. Силикагель предварительно обрабатывают ультразвуком.
2. Нанесение биопробы. Биопробу растворяют в растворителе, в котором предполагается проводить элюирование. При препаративном разделении емкость сорбента используется максимально, а в аналитическом варианте объем биопробы не должен превышать 2 % от объема колонки (перегрузка колонки при высокой концентрации вещества нарушает ее работу).
3. Разделение. Полярность элюентов оказывает существенное влияние на качество разделения, поэтому их подбирают с учетом определенных требований. Если биопроба состоит из компонентов различной полярности, то элюирование проводят в условиях возрастания или снижения полярности растворителя. Замена элюента может осуществляться ступенчато или плавно при помощи специального градиентного смесителя на входе колонки.
Типы сооружений для обработки осадков: Септиками называются сооружения, в которых одновременно происходят осветление сточной жидкости...
Своеобразие русской архитектуры: Основной материал – дерево – быстрота постройки, но недолговечность и необходимость деления...
Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...
История создания датчика движения: Первый прибор для обнаружения движения был изобретен немецким физиком Генрихом Герцем...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!