Пятигорский медико-фармацевтический институт - — КиберПедия 

История развития пистолетов-пулеметов: Предпосылкой для возникновения пистолетов-пулеметов послужила давняя тенденция тяготения винтовок...

Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...

Пятигорский медико-фармацевтический институт -

2017-09-10 370
Пятигорский медико-фармацевтический институт - 0.00 из 5.00 0 оценок
Заказать работу

Пятигорский медико-фармацевтический институт -

Филиал ГБОУ ВПО

«Волгоградский государственный медицинский университет» МЗ РФ

 

 

КАФЕДРА БИОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ И МИКРОБИОЛОГИИ

 

Е.Г. ДОРКИНА, М. В. МАЗУРИНА,

И.В. ДУХАНИНА, Ю.Е. КУЛЬБЕКОВА

 

МЕДИЦИНСКИЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ

 

Методические указания по микробиологии для самостоятельной (внеаудиторной) работы студентов фармацевтического, медико-биологического и стоматологического факультетов

 

 

Пятигорск 2014


УДК 576. 8. 097 (076.5)

ББК 52.6 я 73

Д 68

 

Рецензент: зав.кафедрой морфологии и патологии, к.ф.н. А.Ю. Терехов

 

 

Е.Г. Доркина, М.В. Мазурина, И.В. Духанина, Ю.Е. Кульбекова

Д 68 Медицинские иммунобиологические препараты: методические указания по микробиологии для самостоятельной (внеаудиторной) работы студентов фармацевтического, медико-биологического и стоматологического факультетов/ Е.Г. Доркина, М.В. Мазурина. – Пятигорск: ПГМИ - филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ, 2014. – 47 с.

 

 

Методические указания для самостоятельной внеаудиторной работы студентов по микробиологии «Медицинские иммунобиологические препараты» составлены в соответствии с ФГОС ВПО по специальности 060301 Фармация, по специальности 060201 Стоматология и по специальности 060601 «Медицинская биохимия». В указаниях дана характеристика основных групп медицинских иммунобиологических препаратов, используемых для профилактики, лечения и диагностики заболеваний, дается классификация препаратов, описание действующего начала, механизмов действия, достоинств и недостатков, способов получения и гос. контроля, применение, приводятся примеры и описание препаратов различных групп. Учебный материал структурирован в соответствии с тематикой лабораторных и практических занятий. Доступная форма изложения поможет студентам в усвоении материала, подготовке к занятиям и работе на занятиях.

 

УДК 579:576.3(076)

ББК 28.4я73

 

Печатается по решению ЦМК

ПМФИ ГБОУ ВПО ВолгГМУ

 

 

Ó ПМФИ ГБОУ ВПО ВолгГМУ, 2014


ТЕМА: "Медицинские иммунологические препараты. Характеристика и классификация вакцинных препаратов, их достоинства и недостатки. Способы приготовления. Адъюванты. Контроль и хранение вакцин".

Задача 1. ДАТЬ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕДИЦИНСКИМ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ И ПРИВЕСТИ ИХ КЛАССИФИКАЦИЮ.

Для этого надо знать, что:

1. Медицинские иммунобиологические препараты (МИБП) - это препараты, которые оказывают влияние на иммунную систему или действие которых основано на иммунологических реакциях. Эти препараты применяют для профилактики, лечения и диагностики инфекционных заболеваний и тех неинфекционных заболеваний, в развитии которых участвует иммунная система.

2. Действующим началом МИБП являются антигены, антитела, биологически активные вещества типа цитокинов, иммунокомпетентные клетки и другие иммунореагенты. МИБП также могут включать и другие субстанции: стабилизаторы, адъюванты, консерванты, улучшающие качество препаратов.

3. В настоящее время выделяют 5 основных групп МИБП (А.А. Воробьев):

1. Вакцины и другие препараты из живых микробов (бактерии, вирусы, грибы) или микробных продуктов (живые и инактивированные вакцины, субъединичные вакцины, анатоксины, бактериофаги, пробиотики ).

2. Иммунные сывороточные препараты (иммунные сыворотки, иммуноглобулины, иммунотоксины, антитела-ферменты, рецепторные антитела, мини-антитела).

3. Иммуномодуляторы для иммунокоррекции, лечения и профилактики инфекционных, неинфекционных болезней, иммунодефицитов.

4. Адаптогены - сложные химические вещества растительного происхождения, обладающие широким спектром биологической активности, действующие на иммунную систему

5. Диагностические препараты, в том числе аллергены, с помощью которых можно идентифицировать антигены, антитела, ферменты, продукты метаболизма, биологически активные вещества, чужеродные клетки.

Задача 2. ДАТЬ ХАРАКТЕРИСТИКУ ПОНЯТИЯМ «ИММУНОПРОФИЛАКТИКА» И «ИММУНОТЕРАПИЯ».

Для этого надо знать, что:

1. Принцип иммунопрофилактики и иммунотерапии сводится к тому или иному воздействию на иммунную систему, т.е. к активации, супрессии или нормализации ее работы с помощью МИБП. Это воздействие может быть активным или пассивным, специфическим или неспецифическим.

2. Иммунопрофилактика направлена на создание иммунитета к возбудителю инфекционного заболевания или его антигенам, а также патогену для предупреждения возможного заболевания путем формирования невосприимчивости организма.

3. Иммунотерапия направлена на лечение уже развившегося заболевания, в основе которого лежат нарушения функций иммунной системы, или же иммунной системе принадлежит ведущая роль в восстановлении здоровья.

4. Иммунопрофилактика и иммунотерапия применяются, когда необходимо:

• сформировать специфический иммунитет или активизировать деятельность иммунной системы;

подавить активность отдельных звеньев иммунной системы;

нормализовать работу иммунной системы, если имеются отклонения ее функций в ту или иную сторону.

Иммунопрофилактика и иммунотерапия широко применяются для профилактики и лечения инфекционных и онкологических болезней, аллергий, иммунопатологических состояний, иммунодефицитов и других заболеваний, а также при трансплантологии.

Задача 3. ДАТЬ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВАКЦИННЫМ ПРЕПАРАТАМ, УКАЗАТЬ ДЕЙСТВУЮЩЕЕ НАЧАЛО, МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ, ПРИМЕНЕНИЕ И КЛАССИФИКАЦИЮ.

Для этого надо знать, что:

1. Вакцины - это препараты для создания активного искусственно приобретенного иммунитета. Термин «вакцина» (от франц. vacca - корова) ввел Л. Пастер в честь создателя первой вакцины Дженнера, применившего вирус коровьей оспы для иммунизации людей против натуральной оспы человека.

2. Действующее начало вакцин - специфический антиген. В качестве антигенов выступают: 1) целые микробные тела (живые или убитые); 2) отдельные антигены микроорганизмов; 3) токсины микроорганизмов; 5) искусственно созданные антигены микроорганизмов; 6) антигены, полученные методом генной инженерии.

3. После введения антигена (прививки) происходит его распознавание и формирование специфического гуморального или клеточного иммунного ответа, направленного на уничтожение данного антигена, а также выработка «клеток памяти» (В- и Т-лимфоцитов), сохраняющих многие годы способность реагировать на повторное введение антигена, т.к. вырабатывают рецепторы к этому антигену. При повторной встрече с этим же антигеном организм отвечает более активным и быстрым формированием иммунитета, т.е. реагирует по типу вторичного иммунного ответа. Этот феномен получил название иммунологической памяти и используется в практике вакцинации людей.

4. Вакцины используют в первую очередь для активной специфической профилактики, значительно реже – для лечения инфекционных заболеваний. Применяемый метод профилактики получил название вакцинопрофилактика или активная иммунизация.

С целью иммунотерапии вакцины применяют в тех случаях, когда инфекционный процесс носит затяжной, хронический характер. Для этого применяют убитые вакцины. Иммунотерапия служит вспомогательным методом лечения и служит для повышения реактивности организма.

В последнее время область применения вакцин значительно расширилась. Созданы вакцины для профилактики и лечения неинфекционных и онкологических болезней, наркозависимости, табакокурения и др.

5. Общепризнанной классификации вакцин не разработано. В основном, их делят на следующие группы:

I. Живые вакцины (аттенуированные, дивергентные, векторные рекомбинантные).

II. Убитые (инактивированные) корпускулярные вакцины.

III. Субкорпускулярные (химические, субъединичные) вакцины.

IV. Молекулярные вакциныанатоксины).

V. Синтетические вакцины.

VI. Ассоциированные вакцины.

Задача 4. ОХАРАКТЕРИЗУЙТЕ ЖИВЫЕ ВАКЦИНЫ.

Для этого надо знать, что:

1. Живые вакцины пдразделяют на:

- аттенуированные (ослабленные);

- дивергентные;

- векторные рекомбинантные.

2. Живые аттенуированные вакцины - препараты из ослабленных микробов, потерявших вирулентность, но сохранивших иммуногенность. Ослабленные микробы - это вакцинные штаммы. Вакцинные штаммы микробов сохраняют способность размножаться в месте введения и распространяться по организму. В результате этого возникает вакцинная инфекция - заболевание протекает в легкой форме. Вакцинная инфекция всегда приводит к формированию иммунитета к патогенным микробам данного вида, к которым относится вакцинный штамм. Лишь в единичных случаях могут возникать вакцинно-ассоциированные заболевания с клиническими признаками инфекционного заболевания, против которого проведена прививка.

3. Важным этапом создания живых аттенуированных вакцин является получение вакцинного штамма. Способы получения вакцинных штаммов:

а) метод отбора (селекции) мутантов с ослабленной вирулентностью (вакцина против полиомиелита);

б) метод направленного (искусственного) снижения вирулентности:

- выращивание при повышенной температуре (сибиреязвенная вакцина Пастера);

-выращивание при пониженной температуре (вакцина против чумы);

-выращивание на неблагоприятной питательной среде (вакцина БЦЖ получена при выращивании на среде с добавлением желчи):

- длительное пассирование (последовательное заражение) через организм маловосприимчивых лабораторных животных (вакцина против бешенства Пастера – пассаж через мозг кролика);

в) метод генной инженерии (инактивация гена, который отвечает за образование факторов вирулентности патогенных микробов).

Требования к вакцинному штамму:

-стойкое снижение вирулентности;

- отсутствие возврата (реверсии) в вирулентную форму;

-полноценная антигенная структура и иммуногенность.

4. Приготовление живой вакцины:

- выращивают вакцинный штамм в асептических условиях в оптимальных условиях (бактериальные штаммы культивируют на оптимальных жидких или плотных питательных средах; вирусы – в куриных эмбрионах и на культуре клеток);

- биомассу микробов концентрируют;

- проводят стандартизацию - определяют титр - количество микробов в 1мл;

- добавляют стабилизатор (сахарозожелатиновый агар, человеческий альбумин), который защищает антигены от разрушения,

- лиофильно высушивают,

- фасуют в стерильные ампулы или флаконы.

После получения вакцины проходят государственный контроль – проверяется реактогенность, безвредность и иммуногенность.

5. Преимущества живых вакцин:

1) создание прочного (напряженного) и длительного иммунитета, т.к. они содержат полностью сохраненный набор а/г возбудителя (5-7 лет);

2) прививки делают однократно более простыми способами (перорально, интраназально, накожно, подкожно);

3) менее реактогенны, т.к. не содержат консервантов и адъювантов.

6. Недостатки живых вакцин:

1) трудоемкость получения вакцинных штаммов;

2) малый срок хранения (1-2 года);

3) хранение и транспортировка при пониженной температуре (+4°С - +8°С);

4) потеря аттенуации - необходимо проводить постоянный контроль реверсии вирулентности возбудителя (при реверсии вакцинного штамма возникает вакциноассоциированное заболевание);

5) трудность дозировки и комбинирования с другими вакцинами (возможна интерференция между вирусами и одна из вакцин становится неэффективной);

6) содержание большое количество балластных веществ;

7. Примеры живых вакцин. Живыевакцины составляют примерно половину всех применяемых в практике вакцин. Наиболее важные из них:

1) бактериальные вакцины - туберкулезная (БЦЖ), чумная (штамм EV), туляремийная (штамм № 15), сибиреязвенная (СТИ-1), бруцеллезная (штамм 19-ВА), против Ку-лихорадки (штамм М-44);

2) вирусные вакциныполиомиелитная (из штаммов Сэбина типов 1,2 и 3), коревая (штамм Л-16), гриппозная (из лабораторных штаммов В.М. Жданова), паротитная (из штаммов А.А. Смородинцева и Н.С. Клячко), против желтой лихорадки (штамм 17D).

В России также разрешены к применению такие живые импортные вакцины, как:

Полио Сэбин Веро» (США-Франция)- полиомиелитная вакцина;

Рувакс» (Франция) – против кори (после однократного введения обеспечивает защиту в течение 20 лет);

Рудивакс» (Франция) – против краснухи (после однократного введения обеспечивает защиту в течение 20 лет).

8. Живые дивергентные вакцины - препараты из живых микробов, не болезнетворных для человека, но сходных по антигенным свойствам с болезнетворными микробами. Например, для прививки против оспы человека использовали вирус оспы коров. Вакцину готовили из материала, собранного из везикулярных поражений кожи телят, зараженных коровьей оспой и консервировали в глицерине. Затем был разработан метод приготовления осповакцины на куриных эмбрионах и культуральной вакцины, приготовленной из вируса, выращенного в культуре клеток. В настоящее время по рекомендации ВОЗ обязательная вакцинация против натуральной оспы отменена, т.к. последний случай заболеваемости был зарегистрирован в 1977 г. в Сомали.

9. Живые векторные рекомбинантные вакцины - получают методом генной инженерии. Для этого в геном вакцинного штамма встраивают ген (вектор), контролирующий образование антигенов другого возбудителя (чужеродного антигена). Например, в штамм вируса оспенной вакцины встраивают антиген вируса гепатита B (HBs - антиген). Такая векторная вакцина создает иммунитет и против оспы и против гепатита В.

К векторным рекомбинантным также относят вакцину на основе вируса осповакцины и антигена вируса бешенства.

10. Для обеспечения безопасности живых вакцин необходимо строго соблюдать требования, обеспечивающие сохранность и активность вакцинных микробов. Следует помнить, что применение живых вакцин опасно для детей с врожденными или приобретенными иммунодефицитными состояниями.

Задача 5. ОХАРАКТЕРИЗУЙТЕ УБИТЫЕ (ИНАКТИВИРОВАННЫЕ) КОРПУСКУЛЯРНЫЕ ВАКЦИНЫ.

Для этого надо знать, что:

1. Убитые (инактивированные) корпускулярные вакцины – это препараты из инактивированных культур патогенных (высоко вирулентных) или вакцинных штаммов бактерий и вирусов. Способы инактивирования: 1) физические: температура. УФ-лучи, ионизирующее излучение; 2) химические - формалин, спирт, ацетон, 3-пропиолактон. Инактивацию проводят в оптимальном режиме (инактивирующая доза, температура, концентрация микроорганизмов), чтобы лишить микроорганизмы жизнеспособности, но сохранить иммуногенность (не разрушить основные протективные антигены). Поскольку при этом бактериальные клетки или вирусные частицы остаются неразрушенными, эти вакцины еще называют цельноклеточными и цельновирионными.

2. Приготовление инактивированных вакцин:

- выращивают в асептических условиях чистую культуру микробов;

-определяют чистоту культуры путем микроскопии окрашенного по Граму препарата (чистая культура содержит один вид микробов);

- проводят инактивацию в оптимальном режиме, например, гретые вакцины инактивируют путем прогревания взвеси микробов при 56°С;

-определяют стерильность путем посева на специальные среды (отсутствие роста);

-определяют титр (например, методом оптических стандартов - сравнение оптической плотности полученного смыва с эталоном – раствором с известной концентрацией микробов);

- стандартизуют - разводят до нужного титра (если, например, получен титр 10 млрд/мл, а по ГОСТу требуется 2 млрд/мл, необходимо развести физ. раствором в 5 раз: 1 мл+4 мл физ.раствора);

- добавляют консервант (мертиолат, формальдегид, 2-феноксиэтанол и др.), который подавляет постороннюю микрофлору при хранении;

-фасуют (ампулы, флаконы).

Вакцины могут быть жидкие (суспензии) или сухие. Готовые вакцины подвергают контролю на стерильность, безвредность, иммуногенность, реактогенность.

3. Преимущества цельноклеточных и цельновирионных вакцин:

1) простота получения и стандартность;

2) большая устойчивость при хранении и более длительный срок хранения;

3) безопасность применения, т.е. невозможна реверсия вирулентности;

4) легкость дозирования и возможность комбинирования с другими вакцинами.

4. Недостатки цельноклеточных и цельновирионных вакцин:

1) меньшая эффективность - менее прочный и продолжительный иммунитет;

2) необходимость 2-х и 3-х-кратных прививок (что может вызвать аллергию) парентеральным путем (подкожно, внутримышечно), иногда перорально;

3) большое содержание балластных веществ и содержание остаточного количества токсичных веществ, используемых для инактивации (н-ер, фенол), что обусловливает реактогенность - боль, чувство жжения на месте введения, повышение температуры, судорожный синдром и т.д.

5. Примеры инактивированных вакцин:

1) бактериальные вакцинылептоспирозная (взвесь убитых нагреванием лептоспир нескольких серогрупп); коклюшная (взвесь убитых формалином коклюшных бактерий); холерная (убитые нагреванием или формалином холерные вибрионы типа Огава и Инаба);

2) вирусные вакцины – против гриппа, гепатита А, против клещевого энцефалита (инактивированный формалином препарат культур фибробластов куриного эмбриона, зараженных вирусом клещевого энцефалита), противогерпетическая вакцина (препарат из инактивированных формалином штаммов вируса простого герпеса 1-2 типов, репродуцированных в культуре ткани).

Импортные цельновирионные вакцины, разрешенные к применению в России:

- «Имовакс полио» (Франция) – трехвалентная инактивированная вакцина для профилактики полиомиелита;

- «ХДСВ» (Франция) – инактивированная антирабическая вакцина. Первая среди клеточно-культуральных препаратов, разрешенных к применению.

Убитые вакцины иногда применяют и для вакцинотерапии – лечения хронических (длительно протекающих) заболеваний:

- стафилококковая аутовакцина (из убитых стафилококков- возбудителей заболевания у данного больного);

- гонококковая (из убитых нагреванием гонококков; используется для провокации при хронической гонорее);

- бруцеллезная вакцина (взвесь убитых нагреванием бруцелл овечьего и коровьего видов);

- спиртовая дизентерийная вакцина содержит дизентерийные микробы Флекснера и Зонне; применяется при затяжных и хронических формах дизентерии;

- противогерпетическая вакцина.

Задача 6. ОХАРАКТЕРИЗУЙТЕ СУБКОРПУСКУЛЯРНЫЕ (ХИМИЧЕСКИЕ, СУБЪЕДИНИЧНЫЕ) ВАКЦИНЫ.

Для этого надо знать, что:

1. Субкорпускулярные вакцины – это препараты, состоящие не из целых микробных клеток (живых или убитых), а из отдельных частей клеток или отдельных протективных антигенов (О-Аг, Н-Аг, К-Аг и т.д .). Протективные антигены – это антигены, на которые вырабатываются защитные антитела, формирующие иммунитет. Целая микробная клетка или вирус содержат много различных антигенов, из которых «протективностью», т.е. способностью индуцировать защитную реакцию, обладают не все антигены.

2. Вакцины из частично разрушенных клеток или вирионов называют расщепленными или сплит-вакцинами. Такой вакциной является, например, вакцина «Ваксигрипп» (Франция), которая содержит не только поверхностные антигены вируса гриппа трех типов (трехвалентная), но и внутренние, что увеличивает ее активность. От цельновирионной гриппозной вакцины «Ваксигрипп» отличается тем, что не содержит липидного слоя вируса гриппа, который ответственен за прививочные реакции, в частности за повышение температуры тела.

2. Протективные антигены выделяют (экстрагируют) из микробных клеток или вирусных частиц различными способами. Для этого могут быть использованы химические вещества (этанол и др.), поэтому эти вакцины раньше назывались химическими. Однако этот термин более применим к вакцинам, полученным методом химического синтеза.

Аналогами бактериальных химических вакцин являются вирусные субъединичные вакцины, содержащие наиболее иммуногенные компоненты вирионов.

Вакцины на основе протективных антигенов могут выделять в отдельную группу.

3. Получение субкорпускулярных вакцин более сложное и дорогое, чем цельноклеточных и цельновирионных. Основной этап в приготовлении таких вакцин – экстрагирование антигенов (например, ферментативное переваривание с последующим осаждением антигенов этиловым спиртом). Поскольку выделяется только иммунологически активная часть, в таких вакцинах содержится меньше балластных веществ.

4. Преимущества субкорпускулярных вакцин:

1) содержат только иммунологически активные части клеток - антигены без других компонентов;

2) менее реактогены;

3) более стабильны и лучше подвергаются стандартизации и более точной дозировке;

4) можно вводить в больших дозах и в виде ассоциированных препаратов.

5. Недостатки субкорпускулярных вакцин:

1) слабая иммуногенность;

2) малые размеры, что приводит к быстрому выведению и к краткому антигенному раздражению.

Для устранения недостатков к таким вакцинам добавляют адъюванты.

6. Адъюванты укрупняют антигенные частицы и усиливают иммуногеность вакцин. Они создают в месте введения "депо", из которого антигены медленно высвобождаются, что удлиняет время их воздействия на иммунную систему, а также стимулируют фагоцитоз и выработку антител. В качестве адъювантов используют:

- минеральные коллоиды (фосфат алюминия, фосфат кальция, гидрат окиси алюминия, алюмо-калиевые квасцы);

- полимерные вещества (липополисахариды, синтетические полимеры);

- растительные вещества (сапонины) и др.

Вакцины с адъювантами называются адъювантными, сорбированными, адсорбированными или депонированными вакцинами.

7. Примеры субкорпускулярных вакцин:

1) бактериальные – менингококковая вакцина (из капсульных полисахаридных антигенов серогрупп А и С), сыпнотифозная вакцина (поверхностный растворимый антиген риккетсий Провацека), брюшнотифозная вакцина (на основе О-, Н- и Vi-антигенов), против сибирской язвы (на основе капсульного антигена); против дизентерии и холеры;

2) вирусные – субъединичная противогриппозная вакцина «Инфлювак» (Нидерланды) и «Гриппол» (Россия)(на основе очищенных поверхностных антигенов – нейраминидазы и гемагглютинина); проходит клинические испытания субъединичная протеосомальная противогриппозная вакцина Intellivax (США). Она содержит только поверхностные антигены вируса, адсорбированные на протеосомах (микрочастицах очищенного белка), которые служат транспортным средством и адъювантом.

Задача 7. ОХАРАКТЕРИЗУЙТЕ МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ВАКЦИНЫ (АНАТОКСИНЫ).

Для этого надо знать, что:

1. Молекулярные вакцины - это препараты, содержащие специфические антигены в молекулярной форме. Они могут быть получены путем биосинтеза,химического синтеза и генной инженерии.

2. Метод биосинтеза заключается в том, что из микроба или из культуральной жидкости выделяют протективный антиген в молекулярной форме. Выделение протективных антигенов в молекулярной форме из самих микроорганизмов – сложная задача, поэтому приготовление вакцин таким способом не вышло за рамки эксперимента.

Возбудители дифтерии, ботулизма, столбняка при росте синтезируют и выделяют в культуральную жидкость молекулы экзотоксинов. После обработки формалином экзотоксины теряют свои токсические свойства, но сохраняют иммуногенность. Таким образом, к типичным молекулярным вакцинам, которые получают путем биосинтеза, относятся анатоксины.

3. Анатоксины – это экзотоксины, лишенные своих ядовитых свойств, но сохранившие антигенные свойства. При введении анатоксинов в организме создается искусственный активный антитоксический иммунитет. А натоксины используются для профилактики токсинемических инфекций, возбудители которых образуют экзотоксин: дифтерия, столбняк, ботулизм, газовая гангрена, стафилококковые инфекции.

Применяют анатоксины подкожно, внутримышечно, 2 или 3-екратно с последующими ревакцинациями.

4. Приготовление анатоксина:

- выращивание возбудителей в жидкой питательной среде в ферментаторах;

-накопление в культуральной жидкости экзотоксина;

- фильтрация через бактериальные фильтры (экзотоксин поступает в фильтрат, бактерии остаются на фильтре);

- обезвреживание путем добавления 0,3-0,4% формалина и выдерживании при 37°С 3-4 недели или при 400С 30 дней (это основной этап получения анатоксина, когда экзотоксин теряет токсические свойства при сохранении полноценной антигенной структуры);

- очистка и концентрирование;

- стандартизация - определение активности анатоксина;

- добавление консерванта и адъюванта;

- фасовка.

Такие анатоксины называют очищенными сорбированными. Анатоксины проверяют на безвредность, стерильность, иммуногенность.

5. Активность анатоксина выражают в единицах связывания (ЕС) или единицах флоккуляции (ЛФ). 1 ЛФ — это то количество анатоксина, которое с 1 ME антитоксической сыворотки дает начальную реакцию флокулляции (появление опалесценции или хлопьевидной массы). Титр анатоксина - это содержание ЛФ в 1 мл вакцины.

6. В России применяют:

- дифтерийный (АД);

-столбнячный (АС);

-дифтерийностолбнячный (АДС – дианатоксин);

-трианатоксин (ботулинический типов А, В, Б);

- стафилококковый;

-пентаанатоксин (ботулинический сероваров А, В, С, Д и Е);

-секстаанатоксин (анатоксины из экзотоксинов возбудителей ботулизма типов А, В, Е, анатоксины из экзотоксинов возбудителей газовой гангрены (Cl. perjringens и Cl. novyi) и столбнячный анатоксин).

Полианатоксины (три-, пента-, секстаанатоксины) относят к ассоциированным вакцинам.

6. Методом генной инженерии получена молекулярная вакцина против гепатита В. Поверхностный протективный антиген вируса гепатита В (HBS-Аg) синтезируется дрожжевыми клетками, в геном которых встроен ген, контролирующий синтез HBS-Аg, выделенный из вирусной ДНК. Синтезированный дрожжевыми клетками HBS-Аg отделяют от клеточных компонентов и сорбируют на гидрооксиде алюминия (адъювант).

Применяется вакцина «Энджерикс В» (Бельгия), трехкратной введение которой приводит к образованию антител, предотвращающих заболевание гепатитом В у 98% привитых. В России генно-инженерная вакцина против гепатита В разработана компанией «Комбитех». Она безопасна и не реактогенна, разрешена к повсеместному применению в практике здравоохранение России с 1994 г.

Данную вакцину также относят к группе вакцин на основе протективных антигенов.

Задача 8. ОХАРАКТЕРИЗУЙТЕ АССОЦИИРОВАННЫЕ (ПОЛИВАЛЕНТНЫЕ ИЛИ КОМБИНИРОВАННЫЕ) ВАКЦИНЫ.

Для этого надо знать, что:

1. Ассоциированные вакцины состоят из вакцин разного типа и вырабатывают иммунитет к нескольким заболеваниям. Они еще называются комплексными, комбинированными или поливалентными. Их используют для одновременной иммунизации против нескольких инфекционных заболеваний. Антигены в вакцинах содержатся в дозировках, не создающих взаимной конкуренции, чтобы иммунитет вырабатывался ко всем антигенам. Учитывается совместимость не только антигенных компонентов, но и их различных добавок (адъювантов, консервантов, стабилизаторов и пр.).

2. Ассоциированные вакцины могут включать:

а) однородные антигены (например, анатоксины), примером может служить секстаанатоксин против столбняка, газовой гангрены и ботулизма;

б) разнородные антигены - антигены различной природы: корпускулярные и молекулярные, живые и убитые. Например, вакцина АКДС содержит столбнячный и дифтерийный анатоксины + коклюшная корпускулярная вакцина.

3. Примеры отечественных ассоциированных вакцин:

- АДС адсорбированный дифтерийно- столбнячный анатоксин;

- АКДС – адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина;

- TABte – содержит полные антигены брюшнотифозных, А- и В-паратифозных бактерий, извлеченные из клеток путем ферментативного переваривания трипсином и осаждения спиртом, и столбнячный анатоксин;

Бубо-М»– содержит рекомбинантную вакцину против гепатита В и очищенный дифтерийный и столбнячный анатоксины;

Бубо-Кок» – сотоит из АКДС-вакцины и вакцины против гепатита В; создает иммунитет против коклюша, дифтерии, столбняка и гепатита В.

4. Импортные ассоциированные вакцины:

- «* Инфанрикс» (Бельгия) - адсорбированная, ацеллюлярная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина; содержит антигены дифтерийного и столбнячного анатоксина и компоненты клеточной стенки возбудителя коклюша. Обладает меньшей реактогенностью, чем АКДС;

- «* Тетракок» (Франция) – содержит дифтерийный и столбнячный анатоксин, убитые коклюшные палочки и инактивированные формалином вирусы полиомиелита трех типов;

-«* Акт-ХИБ» (Франция) - содержит капсульный полисахаридный антиген Haemophilus influenzae типа b, конъгированный со столбнячным анатоксином, который используется в виде носителя и придает полисахариду свойства полноценного антигена; применяется у детей в возрасте от 2 мес до 5 лет для профилактики заболеваний, вызываемых Haemophilus influenzae типа b (пневмония, менингит, септицемия и др.);

- «* Пента Акт-ХИБ» (Франция) – пятивалентная комбинированная вакцина, предназначенная для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, полиомиелита и гемофильной инфекции;

- «Приорикс» (Бельгия) - содержит аттенуированные вакцинные штаммы вируса кори, эпидемического паротита и краснухи;

- «MMR» (США) - против кори, паротита и краснухи;

* -разрешены к применению в России.

Задача 9. ОХАРАКТЕРИЗУЙТЕ СПОСОБЫ ВАКЦИНАЦИИ.

1. Вакцины вводят накожным, чрескожным (подкожно и внутримышечно) интраназальным (через нос), пероральным (через рот) ингаляционным (через легкие) путями. Способ введения вакцины обусловлен характером препарата и вакцинального процесса. Он должен обеспечивать реализацию иммуногенных свойств вакцины и не вызывать чрезмерных поствакцинальных реакций.

2. Для живых вакцин более надежны накожный, интраназальный и пероральный способы. Сорбированные вакцины можно вводить только чрескожными методами.

3. Большое значение имеют производительность и экономичность способа введения препарата, что особенно важно при необходимости вакцинации больших масс людей в короткие сроки (например, во время эпидемий).

4. Разработаны массовые способы иммунизации – безыгольная инъекция, пероральный и аэрозольный способы. Для безыгольной инъекции применяют автоматы пистолетного типа, в которых струя жидкости (вакцины) под большим давлением проникает через кожу на заданную глубину (внутрикожно, подкожно, внутримышечно). Для пероальной и ингаляционной иммунизации используют специальносконструированные вакцины – таблетки, конфеты-драже, жидкие и сухие препараты. Эти способы позволяют бригаде из1-2 человек привить около 1000 и более человек в 1 час.

5. Требованиям массовой иммунизации наиболее удовлетворяют пероральные вакцины. Они менее реактогенны и исключают передачу «шприцевых» инфекций (СПИД, гепатиты В и С, сифилис, малярию).

6. Вакцины применяют согласно календарю прививок или по определенным для каждой вакцины показаниям.

Календарь профилактических прививок – это рациональная схема, определяющая виды вакцин, дозы и сроки введения каждой вакцины, начиная с рождения.

Каждая страна имеет свой национальный календарь профилактических прививок для проведения плановой массовой вакцинации населения. Обязательность таких прививок устанавливается законодательством страны. Календари прививок разных стран отличаются друг от друга.

В России национальный календарь включает плановую иммунизацию в отношении 10 инфекций: туберкулез, корь, краснуха, паротит, полиомиелит, столбняк, дифтерия, коклюш, гепатит В, грипп.

7. Другие вакцины являются обязательными для ограниченного контингента людей:

-проживающих в определенной местности, эндемичной по какому-либо заболеванию; например, эндемичными по клещевому энцефалиту являются 46 субъектов Российской федерации, среди них Ивановская, Костромская, Тверская, Ярославская, Вологодская, Ленинградская области, Пермский и Хабаровский края и другие территории РФ, где проводится вакцинация против клещевого энцефалита;

-при опасности профессионального контакта с возбудителем (против сибирской язвы, бруцеллеза, туляремии, чумы).

8. Некоторые вакцины применяют по эпидемиологическим показания для предупреждения распространения эпидемий. Например, ежегодная вакцинация против гриппа.

Задача 10. ОХАРАКТЕРИЗУЙТЕ КОНТРОЛЬ ВАКЦИН.

Для этого надо знать, что:

1.Вакцины, как и все МИБП, - это особый вид продукции, к производству которой предъявляют особо жесткие требования. Это обусловлено тем, что вакцины готовят на основе патогенных или ослабленных возбудителей, поэтому необходимо строго соблюдать регламентированные условия производства, гарантирующие безопасность работающего персонала, безвредность, эффективность и стандартность препаратов при их использовании.

2. Контроль качества вакцин проводится на всех этапах производства: оценка качества исходного сырья и реактивов, оценка качества производственных штаммов, питательных сред, полуфабрикатов и готовой продукции.

3. Этапы контроля:

1) внутрилабораторный контроль – подвергается


Поделиться с друзьями:

Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...

Типы сооружений для обработки осадков: Септиками называются сооружения, в которых одновременно происходят осветление сточной жидкости...

Семя – орган полового размножения и расселения растений: наружи у семян имеется плотный покров – кожура...

Типы оградительных сооружений в морском порту: По расположению оградительных сооружений в плане различают волноломы, обе оконечности...



© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!

0.013 с.