Антибиотики, подавляющие синтез бактериальной клеточной стенки

К данной группе относятся пенициллины, цефалоспорины,циклосерин.Пенициллины. Продуцентами пенициллинов являются плесневые грибы рода Penicillium, которые в процессе своей жизнедеятельности образуют несколько видов пенициллинов. Наиболее активным природным соединением является бензилпенициллин. М е х а н и з м а н т и б а к т е р и а л ь н о г о д е й с т в и я всех п е н и ц и л л и н о в связан с нарушением синтеза клеточной стенки за счет блокирования реакции транспептидирования в синтезе пептидогликана (муреина). Таким образом, пенициллин действует только на растущие клетки, в которых осуществляются

процессы биосинтеза пептидогликана. Вследствие отсутствия пептидогликанав клетках человека пенициллин не оказывает на них ингибирующего действия (отсутствие «мишени»), т.е. является практически нетоксичным антибиотиком. Цефалоспорины — большая группа природных антибиотиков,продуцируемых грибами рода Cephalosporium, и их полусинтетических производных. М е х а н и з м а н т и б а к т е р и а л ь н о г о д е й с т -II и я цефалоспоринов такой же, как и у пенициллинов.Цефалоспорины блокируют синтез клеточной стенки.Развитие резистентности бактерий ко многим цефалоспоринам истречается редко и происходит медленно. Отмечается перекрестнаяустойчивость бактерий к цефалоспоринам 1-го и 2-го поколений. Антибиотики, нарушающие функции

цитоплазматической мембраны (ЦМ)микроорганизмов К данной группе относятся полимиксины, полиеновые антибиотики

(нистатин, леворин, амфотерицин В). Полимиксины. Группа родственных антибиотиков, продуцируемых спорообразующими почвенными бактериями Bacillus polymyxaи др. По химическому строению представляют собой сложные соединения,включающие остатки полипептидов. К данной группе относятся полимиксин М, полимиксин В. Полиеновые антибиотики. К данной группе относятся главным образом противогрибковые антибиотики: нистатин, леворин, амфотерицин В, продуцируемые антиномицетами. Близки к ним гризеофульиин, толнафтат, клотримазол, миконазол, кетоконазол и др. К гризеофульвину и толнафтату чувствительность дермотофиты, к трем последним препаратам — большинство грибов, за исключением аспергиллов.Резистентность чувствительных микроорганизмов к данным антибиотикам развивается редко.М е х а н и з м а н т и м и к р о б н о г о д е й с т в и я полиеновых антибиотиков связан с адсорбцией на цитоплазматической мембране грибов и взаимодействием с ее стерольным компонен-

юм. Это приводит к повышению проницаемости мембраны, в результате чего клетка обезвоживается, теряет некоторые микроэлементы

(калий) и в конечном итоге погибает. Антибиотики, ингибирующие синтез белкана рибосомах бактериальных клеток

. К ним относятся аминогликозидные антибиотики, группа тетрациклина, леномицетин, макролиды и др. Аминогликозидные антибиотики Предмставитель стрептомицин. М е х а н и з м а н т и б а к т е р и а л ь н о г о д е й с тв ия стрептомицина заключается в способности блокировать субъсдиницу рибосомы 30S, а также нарушать считывание генетического кода. Группа тетрациклинов К группе тетрациклинов относятся родственные по химическому строению, антимикробному спектру и механизму действия природные

антибиотики и их полусинтетические производные: тетрациклин,тетрациклина гидрохлорид, окситетрациклина гидрохлорид М е х а н и з м а н т и б а к т е р и а л ь н о г о д е й с т в и я тетрациклинов разнообразен. Ингибирующий эффект обусловлен нарушением

связывания аминоацил-mPHK с рибосомальноматричным комплексом, что приводит к подавлению синтеза белка на рибосомах

бактериальных клеток. Ингибирующее действие тетрациклинов в отношении риккетсий Провацека объясняется подавлением окисления глутаминовой кислоты, которая у этих микроорганизмов является исходным продуктом в реакциях энергетического метаболизма. Левомицетин (хлорамфеникол) Левомицетин представляет собой синтетический антибиотик, идентичный

природному хлорамфениколу, который образуется некоторыми видами актиномицетов. М е х а н и з м а н т и б а к т е р и а л ь н о г о д е й с т в и я левомицетина состоит в подавлении пептидилтрансферазной реакциис 50 S субъединицей рибосомы, в результате чего прекращается синтезбелка в бактериальной клетке. Антибиотики, ингибирующие РНК-полимеразу К данной группе относятся рифамицины — родственные антибиотики,продуцируемые разными видами актиномицетов. М е х а н и з м а н т и б а к т е р и а л ь н о г о д е й с т в и я рифампицина заключается в его способности подавлять активность ДНК-зависимой РНК-полимеразы и тем самым блокировать синтез белка на уровне транскрипции

22. Антибиотикорезистентность, её виды, механизмы

Существует два типа лекарственной устойчивости - естественная (природная) и приобретенная.

Естественная лекарственная устойчивость является видовым признаком, чаще связана с недоступностью антибиотика к его мишени, т.е. невозможностью осуществления его механизма действия. Резистентность к антибиотикам у микробов может быть связана с негенетическими факторами (низкая метаболическая активность, переход в L- форму).Основную роль в лекарственной устойчивости принадлежит R- плазмидам, способным передаваться в другие бактерии и формировать своеобразный генофонд лекарственной устойчивости микроорганизмов. На биохимическом уровне в формировании резистентности могут участвовать различные механизмы. Механизм формирования: 1.Разрушение молекулы антибиотика 2.Модификация структуры молекулы антибиотика, приводящая к утрате биологической активности 3.Изменение структуры мишеней 4.Образование бактериями “обходного” пути метаболизма.5.Формирование механизмов активного выведения антибиотика из клетки. Из-за формирования антибиотикоустойчивых популяций микроорганизмов с целью эффективного лечения необходимо предварительно определять чувствительность данного антибиотика к выделенной культуре возбудителя. Основными методами определения антибиотикочувствительности бактерий in vitro является метод серийных разведений, диффузии в агар (бумажных дисков), определение способности к продукции бета- лактамазы, in vivo- на модели безмикробных животных, определение концентрации антибиотиков в крови и моче. Метод диффузии в агар с применением стандартных дисков, пропитанных различными антибиотиками в определенных концентрациях (зависят от терапевтической дозы и соотвествуют рекомендациям ВОЗ). Основан на использовании стандартных питательных сред, дисков и методов. Оценка результатов связана с существованием зависимости между размером зоны подавления роста исследуемых культур вокруг дисков и значениями минимальных подавляющих концентраций (МПК)соответствующих антибиотиков (чувствительностью микроорганизмов). метод серийных разведений антибиотиков позволяет более точно определить МПК, однако из-за громоздкости применяется реже.Бета- лактамазный тест (чаще определяют методом дисков с нитроцефином - цефалоспорином, изменяющим окраску дисков при гидролизе. Положительный тест свидетельствует о резистентности бактерий ко всем бета- лактамаза- чувствительным пенициллина. Побочные эффекты антибиотикотерапии: 1.токсические реакции. Поражения паренхимы печени наиболее часто вызывают тетрациклины, рифампицин и левомицетин. Поражения почек при назначении амфотерицина В, связывающегося с холестерином мембран эпителия почечных канальцев. Поражения органов кроветворения (ККМ аплестическая анемия) чаще вызывает левомицетин. 2. Дисбактериозы обычно развиваются после применения антибиотиков широкого спектра, подавляющих жизнь многих бактерий, в т.ч. и непатогенных. В результате конкурентный баланс в микробных ценозах резко нарушается, что дает устойчивым видам возможность колонизировать свободные участки. Этими химиорезистентными бактериями обычно являются условно-патогенные виды. Их чрезмерное размножение может привести к развитию вторичных эндогенных инфекций. Наиболее часто – дисбактериозы кишечника, вызвванные приемом тетрациклинов внутрь. 3. Аллергизирующее действие. Спектр реакций варьирует от кожных высыпаний до анафилактического шока. (пенициллины). 4. Иммунодепрессивные эффекты (снижение функциональной активности защитных факторов организма) во многом обусловлены цитостатическим эффектом препаратов на иммунокомпетентные клетки (в основном – левомицетин).

23. Методы культивирования, индикации и идентификации вирусов.

1.В организме лабораторных животных.2.В куриных эмбрионах.3.В клеточных культурах - основной метод. Типы клеточных культур. 1.Первичные (трипсинизированные) культуры- фибробласты эмбриона курицы (ФЭК), человека (ФЭЧ), клетки почки различных животных и т.д. Первичные культуры получают из клеток различных тканей чаще путем их размельчения и трипсинизации, используют однократно, т.е. постоянно необходимо иметь соответствующие органы или ткани.2.Линии диплоидных клеток пригодны к повторному диспергированию и росту, как правило не более 20 пассажей (теряют исходные свойства).3.Перевиваемые линии (гетероплоидные культуры), способны к многократному диспергированию и перевиванию, т.е. к многократным пассажам, наиболее удобны в вирусологической работе- например, линии опухолевых клеток Hela, Hep и др.

На первом этапе развития вирусологии единственным методом,доказывающим наличие фильтрующихся инфекционных агентов в исследуемом материале, служило заражение лабораторных животных. В 1931 г. в вирусологической практике стали использоваться куриные эмбрионы для репродукции вирусов с диагностическими целями, а также для производства вирусных вакцин. Позднее были разработаны культуры клеток, приготовленные из неперевиваемых, перевиваемых и полуперевиваемых линий нормальных или злокачественных клеток людей и животных. Они нашли Общая вирусология 83 широкое применение для диагностических, научных и производственных целей. Неперевиваемые— первичные клетки не способны размножаться in vitro, вследствие чего они годятся только для однократного использования. Полуперевиваемые культуры представляют собой диплоидные клетки человека, способные к размножению in vitro в течение 50 пассажей (до 1 года). Они, как правило, не претерпевают злокачественного перерождения. Перевиваемые культуры Злокачественных или нормальных клеток длительно размножаются in vitro. Они могут сохраняться в течение длительных сроков (десятилетиями), например культура клеток Hela и др. Недостаток клеточных культур состоит в возможности их контаминации неизвестными вирусами и микоплазмами. О репродукции вирусов в культурах клеток судят по их цито- и э т и ч е с к о м у д ейс т в и ю (ЦПД), которое носит разный характер в зависимости от вида вируса (рис. 5.10), по бляшкообра- юванию на клеточном монослое, покрытом тонким агаровым слоем (рис. 5.11), гемадсорбции эритроцитов и другим тестам.__

Таким образом, индикация вирусов производится микроскопически по наличию ЦПД, бляшкообразованию на клеточном монослое, ге- мадсорбции эритроцитов, добавленных к клеточной культуре вируса, а также в реакции гемагглютинации с исследуемым вируссодержащим материалом. Реакцию гемагглютинации вызывают вирусы, содержащие в составе своего капсида или суперкапсида гемагглютинин.

24. Микрофлорa тела человека. Классификация. Роль микробов постоянных обитателей человеческого организма в физиологических и патологических процессах