Е.И. Ярыгина, М.С. Калмыкова, И.В. Третьякова — КиберПедия 

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого...

Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰)...

Е.И. Ярыгина, М.С. Калмыкова, И.В. Третьякова

2019-08-03 216
Е.И. Ярыгина, М.С. Калмыкова, И.В. Третьякова 0.00 из 5.00 0 оценок
Заказать работу

Е.И. Ярыгина, М.С. Калмыкова, И.В. Третьякова

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ

К ЛАБОРАТОРНЫМ ЗАНЯТИЯМ

ПО ДИСЦИПЛИНЕ

«ВЕТЕРИНАРНАЯ ВИРУСОЛОГИЯ»

Для обучающихся

ветеринарно-биологического факультета

 

 

Москва 2018 г.

УДК 619:578 (07)

 

Е.И. Ярыгина, М.С. Калмыкова, И.В. Третьякова

 

Рабочая тетрадь предназначена для самостоятельной работы обучающихся по направлению подготовки 06.03.01 – Биология

Рекомендована для аудиторной и внеаудиторной работы студентов.

Обучающийся  на занятии выполняет практическую работу и оформляет протокол, отвечает на поставленные вопросы, решает диагностические задачи, заполняет таблицы, делает рисунки и т.п. После выполнения задания преподаватель оценивает самостоятельную работу обучающегося и принимает протокол.

Для выполнения внеаудиторной работы и подготовки к рубежному контролю знаний (коллоквиум) обучающемуся рекомендуется самостоятельно изучить учебную литературу и материалы лекции по изучаемой дисциплине.

 

 

Содержание

                                                                                                       стр.

Требования и правила работы с вирусами Направление борьбы с вирусными болезнями. Этапы диагностики вирусных болезней Правила отбора патологического материала Лабораторные животные – живая система в вирусологии. Индикация вирусов Куриные эмбрионы – живая система в вирусологии. Методы заражения куриных эмбрионов Индикация вирусов в куриных эмбрионах Титрование вирусов по инфекционной активности Задачи по определению инфекционного титра вируса Титрование вирусов по гемагглютинирующей активности Культура клеток – живая система в вирусологии Индикация вирусов в культуре клеток Индикация вирусов по вирионам и внутриклеточным тельцам-включениям Серологические реакции Реакция иммунофлуоресценции (метод флуоресцирующих антител) Иммуноферментный анализ (ИФА) Реакция диффузионной преципитации (РДП) Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) Реакция нейтрализации (РН) Сводная таблица серологических реакций Полимеразная цепная реакция (ПЦР) Вирус бешенства Перечень тем к проверочным тестам по дисциплине «Вирусология» Вопросы к итоговому контролю по дисциплине «Вирусология»   4 6   7 8   10   12 14 17 19 21 24 26   29 29   30 32 33 35 37 39 41 44 48   49

 

Тема: Требования и правила работы с вирусами

Вирус– ___________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Формы существования вирусов _____________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Схемы вирионов вирусов с различными типами симметрии

Спиральный тип симметрии   Кубический тип симметрии  
Безоболочечный вирус   Безоболочечный вирус    
Оболочечный вирус   Оболочечный вирус  
Сложный тип симметрии (оболочечный вирус)   Смешанный тип симметрии (чётный Т-бактериофаг)  
Требования к работе с вирус- содержащим материалом __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________  
Правила работы в вирусологической лаборатории __________________________________________ _________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________ __________________________________________  

Методы консервации и инактивации вирусов

 

Методы инактивации (уничтожение) _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ ______________________________________________ ______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________ _______________________________________________

Тема: Направление борьбы с вирусными болезнями.

Этапы диагностики вирусных болезней

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Тема: Правила отбора патологического материала

Требование:________________________________________________________ ___________________________________________________________________

___________________________________________________________

Правила____________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вид патологического материала:

От больных животных ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________   От павших животных ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________  

Методика подготовки патологического материала

к вирусологическим исследованиям

Смывы со слизистых оболочек ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________   Кусочки органов ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________  

Тема: Лабораторные животные – живая система в вирусологии.

Индикация вирусов

Цели использования   _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________  
Требования к лабораторным животным _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________ _________________________________________  
Вид лабораторных животных _________________________________________ _________________________________________  

 

Тропизм вируса ____________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

Группы вирусов по тропизму   Метод(ы) заражения лабораторных животных Вид вируса в исходном материале
     
     
     
     
     
     
     

Пассаж вируса в живой системе _______________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Признаки репродукции вирусов

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

Тема: Куриные эмбрионы – живая система в вирусологии

Тема: Титрование вирусов по инфекционной активности

Титр вируса, метод определения _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________  
Цели определения инфекционной активности вируса                               _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________  
Единица обозначения инфекционной активности вируса _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________  

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Тема: Титрование вирусов по гемагглютинирующей активности

Этапы гемагглютинации                                 _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________  
Единица обозначения _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________  

Учёт результатов гемагглютинации

% ГА Описание результата Оценка
       
       
       
       

Протокол титрования вируса болезни Ньюкасла

Тема: Культура клеток – живая система в вирусологии

 

Культура клеток (КК) ______________________________________________

__________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Цели использования                               _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________  
Классификация   _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________  
Преимущества КК _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________  
Методика получение первично-трипсинизированной (первичной) КК _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ ____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________  
Растворы и питательные среды _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ ____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________  

 

Свойства однослойных стационарных КК

       
       
       
       
       

________________________________________________________________________________________________________________________________________

Тема: Индикация вирусов по вирионам и внутриклеточным

Тельцам-включениям

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Электронная микроскопия вирионов вирусов

 

_____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ _____________________________________________ ______________________________________________ ______________________________________________ ______________________________________________ ______________________________________________

 

 

Электронная микрофотография Вид  вируса Форма  вириона Тип симметрии Размер Наличие суперкапс. обол.
           
             
             
           
             

 

  Световая микроскопия вирионов вирусов семейства Poxviridae                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                     

 

 

  Классификация телец-включений   ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________  

 

Световая микроскопия телец-включений Бабеша-Негри                                                        _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________                                             _________________________________________  

 

___________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________

Метод флуоресцирующих антител (МФА)

Принцип     Признак «+» реакции   Метод учёта результата   Схема прямого варианта РИФ     Схема непрямого варианта РИФ   ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________  

 

______________________________________________________________________________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Принцип и схема метода     Метод учёта результата   ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________     ___________________________________________________ ___________________________________________________
сэндвич – вариант ИФА ________________________________________________ ________________________________________________
непрямой вариант ИФА ________________________________________________ ________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________

Методика постановки РДП

Компоненты     Схема РДП для индикации и идентификации вируса   Схема РДП для обнаружения антител в сыворотке крови   Схема РДП для определения титра антител в сыворотке крови   ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________    

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

Принцип и схемы метода   ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________     ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________    

Контроль ЭрАГ

Компоненты: 1.Физ.р-р (мкл)                     2. Сыворотка исследуемая                    3 Эритроцитарный антигенный диагностикум                

Контакт 30 мин. при комнатной температуре

Учёт результата    

 

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)

Принцип и схема метода   ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________  
Подготовка компонентов для РТГА ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________

1:2

1:4

1:8

1:16

1:32

1:64

КОНТРОЛИ

Компоненты:

 

 

 

 

 

 

ЭР

АГ (вируса) ГАЕ

2

1

1/2

1/4 1.Физ.р-р (мкл)  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  2. Сыворотка исследуемая  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  3. Вирус, мкл 4 ГАЕ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Контакт -25-30 мин. при комнатной температуре

 

4. 1% взвесь эритроцитов  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Контакт -25-30 мин. при комнатной температуре

 

Учёт результатов    

                                               

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

Реакция нейтрализации (РН)

Принцип и схема метода   ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________ ______________________________________________________    

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Экспресс-методы

Иммуноферментный анализ - ИФА (ELISA)

 

«Сэндвич» вариант специфические АТ + АГх = комплекс АГх-АТ + специфический конъюгат = комплекс АГх-АТ-конъюгат + субстрат = продукты ферментативной реакции  

 

Окрашивание

Индикация и идентификация вируса Непрямой вариант специфический АГ + АТх = комплекс АГ-АТх + антивидовой конъюгат = комплекс комплекс АГ- АТх – –антивидовой  конъюгат  + субстрат = продукты фермента-. тивной реакции   Обнаружение и определение титра антител Реакция диффузионной преципитации - РДП   АГ + АТ = комплекс АГ-АТ в агаровом геле Линия преципитации 1 Индикация и идентификация вируса 2 Обнаружение и определение титра антител

Не экспресс-методы

Реакция торможения гемагглютинации -РТГА   АГ + АТ = комплекс АГ-АТ + эритроциты Отсутствие гемагглютинации («пуговка») 1 Идентификация гемагглютинирующего вируса 2 Обнаружение и определение титра антител Реакция нейтрализации - РН Вирус + АТ = комплекс АГ вируса - АТ → биопроба на живой системе (ЛЖ, КЭ, КК) Отрицательная биопроба 1 Идентификация вируса 2 Обнаружение и определение титра антител Реакция торможения гемадсорбции -РТГАд   Вирус в культуре клеток + специфические АТ = комплекс АГвируса -АТ + эритроциты Отсутствие гемадсорбции 1 Идентификация гемадсорбирующего вируса 2 Обнаружение и определение титра антител

 

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Характеристика вириона

 

Таксономия ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________
Морфология вириона ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________
Свойства вируса _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________
Культуральные свойства _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________

 

Репродукция вируса _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________ _________________________________________________ ________________________________________________
Устойчивость во внешней среде _________________________________________________ ________________________________________________ ________________________________________________

Поделиться с друзьями:

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой...

История создания датчика движения: Первый прибор для обнаружения движения был изобретен немецким физиком Генрихом Герцем...

Индивидуальные очистные сооружения: К классу индивидуальных очистных сооружений относят сооружения, пропускная способность которых...

Автоматическое растормаживание колес: Тормозные устройства колес предназначены для уменьше­ния длины пробега и улучшения маневрирования ВС при...



© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!

0.147 с.