Строение и молекулярная биология вируса гепатита В.

БАЛТИЙСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

ИМЕНИ ИММАНУИЛА КАНТА

Медицинский институт

 

 

Доклад

 

на тему:

Оккультный гепатит

 

 

Выполнил:

Студент 4 «а» группы 5 курс

Мирошниченко Андрей Александрович

Проверила:

к.м.н. Перминова Людмила Анатольевна

 

Калининград 2017

Содержание:

 

 

1. Определение ………………………………………………………3

2. Этиология………………………………………………………….3

3. Эпидемиология……………………………………………………5

4. Клинические формы оккультного гепатита……………………..6

5. Механизмы возникновения оккультной ВГВ инфекции……….7

6. Клиническое значение оккультной ВГВ инфекции…………….11

7. Оккультный гепатит В и его диагностика……………………….17

 

Определение

 

Разновидность формы течения хронического вирусного гепатита В, при котором его основной серологический маркер (HBsAg) отсутствует, а ДНК HBV определяется с высоким уровнем репликации в печени и редко в сыворотке крови, получила название оккультного гепатита В. Единственным маркером оккультного гепатита В могут быть суммарные антитела к сердцевинному (core) белку вируса – anti-HBc.

 

Этиология

Эпидемиология

 

Около 2 млрд человек инфицированы HBV, ежегодная смертность от которой, по данным ВОЗ, составляет 780 тыс. человек. Несмотря на наличие эффективных и безопасных вакцин, HBV-инфекция остается серьезной и чрезвычайной проблемой современного здравоохранения.

По данным ряда авторов, в мире около 400 млн. носителей хронической HBV-инфекции страдают от прогрессирующей дисфункции печени с исходом в цирротическую стадию и, более того, у них высок риск развития гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК). ГЦК занимает 5-е место по распространенности среди злокачественных новообразований и 3-е место – как основная причина смертности. Эпидемиологические данные свидетельствуют о том, что частота заболеваемости ГЦК неуклонно растет во всем мире.

 

Хотя исследования, посвященные оккультному гепатиту В, проводятся достаточно интенсивно, распространенность этой инфекции очень сложно оценить точно по нескольким причинам. Во-первых, это широкая вариабельность клинических течений данной патологии: от острого гепатита В со спонтанным выздоровлением до хронического, иногда бессимптомного носительства вируса и развития серьезных осложнений в виде цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы. Во-вторых, большинство исследований проводили на малом количестве образцов, среди неоднородной популяции и с недостаточным наполнением контрольной группы. В-третьих, хотя метод ПЦР для выявления вирусной ДНК представляется наиболее чувствительным, в действительности показатель его чувствительности варьирует. Отмечен высокий уровень ложнопозитивных результатов ПЦР при определении ДНК вируса у пациентов с "только" антиНВс. В-четвертых, было показано, что распространенность оккультного гепатита В зависит от интервала между элиминацией HBsAg и моментом определения ДНК вируса. Кроме того, уровень виремии может колебаться в течение оккультной ВГВ инфекции. Все эти факторы необходимо учитывать при определении распространенности оккультной ВГВ инфекции.

ОкГВ выявляется у 0,1–2,4 % доноров крови, у 5 % – населения США, у 7,5–16,0 % – представителей азиатской популяции, у 45–50 % – инъекционных наркоманов, больных гемофилией и гломерулонефритом, у 8–51 % – больных с ВИЧ [19, 23] и у 30–95 % – больных с хроническим гепатитом С и отрицательным HBsAg.

Спектр заболеваний, вызванных воздействием вируса, включает острый гепатит В, бессимптомное носительство вируса, хронический гепатит, изредка—фульминантный гепатит. С хронической ВГВ инфекцией связывают развитие цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК). Хроническая ВГВ инфекция характеризуется наличием поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) и виремией. Ранее утверждалось, что исчезновение HBsAg у пациентов с ВГВ инфекцией ассоциировано с прекращением виремии и ремиссией заболевания. Однако накопленный материал свидетельствует, что ДНК вируса на низких уровнях продолжает определяться в сыворотке крови и ткани печени у некоторых больных с недетектируемым уровнем HBsAg и при острой инфекции с самостоятельным разрешением, и при хронической или даже после успешно проведенного противовирусного лечения. Наличие данной клинической ситуации привело к возникновению концепции "оккультной (occult), молчащей (silent), латентной (latent)" ВГВ инфекции, которая характеризуется наличием вируса при недетектируемом уровне HBsAg. Хотя HBsAg всегда считался обязательным серологическим маркером текущей ВГВ инфекции, а наличие только антиНВсIgG рассматривалось как свидетельство предыдущей инфекции с элиминацией вируса и ремиссией заболевания, исключения из данного правила были обнаружены более двух десятилетий назад. Так, еще в 1978 году был зарегистрирован случай переливания крови, содержащей антиНВс без HBsAg и антиHBs, что привело к возникновению у реципиента вирусного гепатита В. В дальнейшем было показано, что ДНК вируса может определяться в сыворотке крови с недетектируемым уровнем HВsAg, позитивной по антиHBs, которые считались достоверным маркером наличия иммунитета к ВГВ инфекции. Данные факты позволили предположить, что рутинный профиль серологических маркеров не всегда надежен для определения статуса ВГВ инфекции. ПЦР при определении ДНК ВГВ обладает в 10000 раз большей чувствительностью по сравнению с методом прямой гибридизации. Поэтому метод ПЦР является высокоинформативным при диагностике оккультного гепатита В.

 

БАЛТИЙСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

ИМЕНИ ИММАНУИЛА КАНТА

Медицинский институт

 

 

Доклад

 

на тему:

Оккультный гепатит

 

 

Выполнил:

Студент 4 «а» группы 5 курс

Мирошниченко Андрей Александрович

Проверила:

к.м.н. Перминова Людмила Анатольевна

 

Калининград 2017

Содержание:

 

 

1. Определение ………………………………………………………3

2. Этиология………………………………………………………….3

3. Эпидемиология……………………………………………………5

4. Клинические формы оккультного гепатита……………………..6

5. Механизмы возникновения оккультной ВГВ инфекции……….7

6. Клиническое значение оккультной ВГВ инфекции…………….11

7. Оккультный гепатит В и его диагностика……………………….17

 

Определение

 

Разновидность формы течения хронического вирусного гепатита В, при котором его основной серологический маркер (HBsAg) отсутствует, а ДНК HBV определяется с высоким уровнем репликации в печени и редко в сыворотке крови, получила название оккультного гепатита В. Единственным маркером оккультного гепатита В могут быть суммарные антитела к сердцевинному (core) белку вируса – anti-HBc.

 

Этиология

Строение и молекулярная биология вируса гепатита В.

 

HBV относится к семейству ДНК, содержащих вирусы гепатита. Вирион (т.е. вирус вне

клетки хозяина) гепатита В имеет диаметр 42 нм и состоит из внешней липидной оболочки, нуклеопротеида, капсида и суперкапсида. Внутри капсида, имеющего форму икосаэдра, заключена молекула вирусной ДНК в комплексе с белком (нуклеопротеид). Геном HBV представлен частичнорелаксированной кольцевой ДНК (rcДНК), которая необычна тем, что является не полностью двухцепочечной молекулой. Одна из цепей («плюс-цепь») ДНК короче другой (длина варьирует от 1700 до 2800 нуклеотидов). Вто-

рая цепь тоже не является замкнутой (длина варьирует от 3020 до 3320 нуклеотидов). К 5’-концу второй цепи молекулы ДНК ковалентно присоединена молекула полимеразы,которая также обладает активностью обратной транскриптазы, необходимой для жизненного цикла HBV, проходящего через стадию синтеза ДНК на матрице РНК. В геноме HBV идентифицированы 4 частично перекрывающихсяоткрытых рамки считывания:

 

– пре-S/S, пре-C/C, PиX, кодирующих, соответственно, 3 вирусных поверхностных белка (большой, средний и малый; последний соответствует белку HBsAg)

 

- ядерный антиген (HBcAg), растворимый антиген «е» (HBeAg)

 

- вирусная полимераза (обладает ферментативной активностью ДНК-полимеразы, обратной транскриптазы, РНКазы Н и терминальной протеинпраймазы)

 

- белок-регулятор экспрессии генов HBx, необходимый для репликации вируса и трансактивации экспрессии ряда генов ДНК гепатоцитов и генов самого HBV.

 

Жизненный цикл HBV включает несколько этапов:

 

1-й – независимо от типа клеток первичное прикрепление с последующим необратимым связыванием вируса со специфическим рецептором, называемым Na-таурохолаткотранспортирующим полипептидом (NTCP) на поверхности гепатоцитов. NTCP транспортирует конъюгированные с глицином или таурином желчные кислоты;

2-й – высвобождение в цитоплазму ядерного нуклеокапсида, содержащего rcДНК, и его транспортировка вдоль микротрубочек к ядерной мембране;

 

3-й – высвобождение rcДНК в нуклеоплазму, в которой она подвергается репарации и превращается в ковалентно замкнутую кольцевую ДНК (сссДНК), которая в комплексе с гистоновыми и негистоновыми белками организуется в хроматиноподобную структуру, в так называемую вирусную мини-хромосому;

 

4-й – транскрипция сссДНК РНК-полимеразой II клетки-хозяина в геномную и субгеномную вирусные РНК;

 

5-й – экспорт из ядра и трансляция в цитоплазме транскриптов HBV в белки вирусной оболочки, капсида, «е», полимеразы иHBx;

 

6-й – селективная упаковка прегеномнойРНК (pgРНК) в новосинтезированномкапсиде, где путем обратной транскрипции с совместно упакованным P-белком образуются новые молекулы rcДНК;

 

7-й – сборка новосинтезированных белков вируса в эндоплазматической сети и последующий выброс зрелых вирусных частиц или транспорт нуклеокапсидов в ядро для пополнения общего количества молекул сссДНК в ядре.

Стабильность вирусных сссДНК мини-хромосом, наряду с длительным периодом полужизнигепатоцитов, способствует тому, что HBV-инфекция может персистировать в организме человека сколько угодно долгое время. Молекулярные механизмы развития ОкГВ остаются относительно малоизученными, однако, было показано, что они связаны с длительным сохранением ДНК вируса в виде стабильной хроматиновой свободной эписомы в ядре инфицированных гепатоцитов. Кроме того, сссДНК HBV была обнаружена интегрированной в хромосомы гепатоцитовпациентов с ГЦК. Причем интеграция HBV в геном хозяина является частичной и включает в себя только определенные последовательности генов вируса гепатита В.

 

Эпидемиология

 

Около 2 млрд человек инфицированы HBV, ежегодная смертность от которой, по данным ВОЗ, составляет 780 тыс. человек. Несмотря на наличие эффективных и безопасных вакцин, HBV-инфекция остается серьезной и чрезвычайной проблемой современного здравоохранения.

По данным ряда авторов, в мире около 400 млн. носителей хронической HBV-инфекции страдают от прогрессирующей дисфункции печени с исходом в цирротическую стадию и, более того, у них высок риск развития гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК). ГЦК занимает 5-е место по распространенности среди злокачественных новообразований и 3-е место – как основная причина смертности. Эпидемиологические данные свидетельствуют о том, что частота заболеваемости ГЦК неуклонно растет во всем мире.

 

Хотя исследования, посвященные оккультному гепатиту В, проводятся достаточно интенсивно, распространенность этой инфекции очень сложно оценить точно по нескольким причинам. Во-первых, это широкая вариабельность клинических течений данной патологии: от острого гепатита В со спонтанным выздоровлением до хронического, иногда бессимптомного носительства вируса и развития серьезных осложнений в виде цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы. Во-вторых, большинство исследований проводили на малом количестве образцов, среди неоднородной популяции и с недостаточным наполнением контрольной группы. В-третьих, хотя метод ПЦР для выявления вирусной ДНК представляется наиболее чувствительным, в действительности показатель его чувствительности варьирует. Отмечен высокий уровень ложнопозитивных результатов ПЦР при определении ДНК вируса у пациентов с "только" антиНВс. В-четвертых, было показано, что распространенность оккультного гепатита В зависит от интервала между элиминацией HBsAg и моментом определения ДНК вируса. Кроме того, уровень виремии может колебаться в течение оккультной ВГВ инфекции. Все эти факторы необходимо учитывать при определении распространенности оккультной ВГВ инфекции.

ОкГВ выявляется у 0,1–2,4 % доноров крови, у 5 % – населения США, у 7,5–16,0 % – представителей азиатской популяции, у 45–50 % – инъекционных наркоманов, больных гемофилией и гломерулонефритом, у 8–51 % – больных с ВИЧ [19, 23] и у 30–95 % – больных с хроническим гепатитом С и отрицательным HBsAg.

Спектр заболеваний, вызванных воздействием вируса, включает острый гепатит В, бессимптомное носительство вируса, хронический гепатит, изредка—фульминантный гепатит. С хронической ВГВ инфекцией связывают развитие цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК). Хроническая ВГВ инфекция характеризуется наличием поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) и виремией. Ранее утверждалось, что исчезновение HBsAg у пациентов с ВГВ инфекцией ассоциировано с прекращением виремии и ремиссией заболевания. Однако накопленный материал свидетельствует, что ДНК вируса на низких уровнях продолжает определяться в сыворотке крови и ткани печени у некоторых больных с недетектируемым уровнем HBsAg и при острой инфекции с самостоятельным разрешением, и при хронической или даже после успешно проведенного противовирусного лечения. Наличие данной клинической ситуации привело к возникновению концепции "оккультной (occult), молчащей (silent), латентной (latent)" ВГВ инфекции, которая характеризуется наличием вируса при недетектируемом уровне HBsAg. Хотя HBsAg всегда считался обязательным серологическим маркером текущей ВГВ инфекции, а наличие только антиНВсIgG рассматривалось как свидетельство предыдущей инфекции с элиминацией вируса и ремиссией заболевания, исключения из данного правила были обнаружены более двух десятилетий назад. Так, еще в 1978 году был зарегистрирован случай переливания крови, содержащей антиНВс без HBsAg и антиHBs, что привело к возникновению у реципиента вирусного гепатита В. В дальнейшем было показано, что ДНК вируса может определяться в сыворотке крови с недетектируемым уровнем HВsAg, позитивной по антиHBs, которые считались достоверным маркером наличия иммунитета к ВГВ инфекции. Данные факты позволили предположить, что рутинный профиль серологических маркеров не всегда надежен для определения статуса ВГВ инфекции. ПЦР при определении ДНК ВГВ обладает в 10000 раз большей чувствительностью по сравнению с методом прямой гибридизации. Поэтому метод ПЦР является высокоинформативным при диагностике оккультного гепатита В.