Разработка методики изолирования офлоксацина

В. А. Тютрина

Научный руководитель: профессор, д. х. н. Е. А. Илларионова, доцент, к. ф.-м. н. Е. Г. Горячкина
Кафедра фармацевтической и токсикологической химии
Кафедра фармакогнозии и ботаники
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение профессионального образования «Иркутский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Иркутск, Россия

 

Актуальность. Объектом настоящего исследования является офлоксацин – лекарственное средство группы фторхинолонов II поколения, применяемое в медицинской практике в качестве антибактериального препарата. Встречаются случаи отравления больных офлоксацином при использовании его самостоятельно и в комплексной терапии с психотропными лекарственными средствами. Так как для диагностики интоксикации этим лекарственным средством важное значение имеют результаты химико-токсикологического исследования, необходимо разработать методику изолирования данного вещества из биологических объектов.

Цель. Разработать методику изолирования офлоксацина из биологических объектов.

Материалы и методы. В работе использовали субстанцию и таблетки офлоксацина. В качестве реактивов были использованы: хлороформ, дихлорметан, этилацетат, бензол, эфир, толуол, 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, 0,1М раствор натрия гидроксида, приготовленные из фиксанала; спирт этиловый 95%; вода очищенная. Для измерения оптической плотности растворов использовали спектрофотометр СФ-2000; измерение проводили в кюветах с толщиной слоя 1 см на фоне растворителя. Величину рН контролировали с помощью универсального ионометра ЭВ – 74. При статистической обработке результатов анализа использовали методы Стьюдента и Фишера. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез р=0,05.

Результаты. Для разработки методики изолирования необходимо изучить влияние следующих факторов: природы органического растворителя, рН среды, наличия электролита, времени и кратности экстракции. Изучили влияние следующих органических растворителей на экстракцию офлоксацина: хлороформа, дихлорметана, этилацетата, бензола, эфира, толуола. Определено, что оптимальными органическими растворителями для экстрации офлоксацина являются хлороформ и дихлорметан, которые экстрагируют исследуемое вещество при рН 6 в максимальном количестве. Изучение влияния электролита на степень экстракции офлоксацина показало, что аммония сульфата раствор насыщенный обладает высаливающим действием для офлоксацина. Изучение влияния времени экстрагирования и кратности на степень экстракции офлоксацина показали, что наибольший выход офлоксацина (%) достигается при двукратном экстрагировании хлороформом и трёхкратном экстрагировании дихлорметаном в течение трех минут. На основании проведенных исследований была разработана методика изолирования офлоксацина из модельной смеси мочи.

Выводы. На основании вышеописанных исследований, можно сделать вывод, что разработанная методика позволяет проводить изолирование офлоксацина из модельной смеси мочи и может быть рекомендована для химико-токсикологического анализа исследуемого препарата.

______________________________

 

 

РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕНАЗЕПАМА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

А. М. Лазицкая

Научный руководитель: профессор, д. х. н. Е. А. Илларионова
Кафедра фармацевтической и токсикологической химии
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение профессионального образования «Иркутский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Иркутск, Россия

 

Актуальность. Противотревожные препараты (производные бензодиазепина) являются востребованной группой психофармакологических средств. Феназепам – представитель этой группы, высокоактивный препарат, по силе транквилизирующего и анксиолитического действия превосходит другие бензодиазепиновые производные. Злоупотребление, а так же необоснованное, недифференцированное и мало контролируемое его применение - актуальная проблема. Фармакопейные статьи рекомендует для количественного определения феназепама в таблетках спектрофотометрический метод. Хроматографические методы в количественном анализе приобрели в настоящее время большую актуальность, в частности высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Однако активное применение ВЭЖХ в повседневной практике ограничено отсутствием унифицированных методик анализа.

Цель. Разработать методику количественного анализа феназепама в таблетках методом ВЭЖХ

Материалы и методы. В работе использовали: таблетки феназепама по 1мг. Исследования проводили на хроматографе микроколоночном жидкостном «Милихром А-02» (ЗАО «ЭкоНова», Новосибирск) с ультрафиолетовым спектрофотометрическим детектором, снабженным стальной колонкой (75х2 мм), заполненной обращенной фазой ProntoSIL-120-5-C18 AQ ("BischoffAnalysentechnikundGerateGmbH", Германия) с размером частиц 5 мкм. Температура колонки 40°С. Эффективность колонки – 3500 т.т. В качестве стандартного (контрольного) вещества использована фармацевтическая субстанция феназепама, содержание основного вещества в которой не ниже 98%. Для растворения образцов и приготовления элюентов использовали: ацетонитрил «о.с.ч» (сорт 1) фирмы «Криохром» (Санкт-Петербург); лития перхлорат, хлорную кислоту, спирт метиловый, квалификации не ниже «х.ч». Результаты исследований обработаны статистически с использованием пакета программ Microsoft Excel для Windows XP.

Результаты. Феназепам проявляет основные свойства за счет атома азота, что ведет к асимметрии его пиков на хроматограмме. Поэтому использовали полимерный сорбент ProntoSIL-120-5-C18 AQ, не проявляющий ионообменных свойств, что позволяет получать симметричные пики. Величина коэффициента асимметрии для феназепама - 1,42. Подвижная фаза состоит из двух элюентов: элюент А – [4 M LiClO4–0,1 M HClO4] - H2O (5: 95); элюент Б – ацетонитрил. Для анализа таблеток феназепама был выбран обращенно-фазовый вариант хроматографии. Время удерживания феназепама - 27,41 минут. Линейность метода оценивали, анализируя растворы модельных смесей в диапазоне концентраций 0,025- 0,5 мг/мл. Коэффициент корреляции - 0,9991.

Выводы. Таким образом, нами предложены условия количественного определения таблеток феназепама методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детекцией.

______________________________

 

 

РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛАВОНОИДОВ В СЫРЬЕ GERANIUM ERIOSTEMON

Ю. А. Ершова

Научный руководитель: доцент, к. фарм. н. Е. Г. Горячкина, профессор, д. фарм. н. Г. М. Федосеева
Кафедра фармакогнозии и ботаники
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Иркутский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской федерации, г. Иркутск, Россия

 

Актуальность. Фармакологические исследования показали, что экстракт, содержащий сумму флавоноидов герани волосистотычинковой, оказывает выраженное противовоспалительное действие. Для внедрения в медицинскую практику необходимо создание нормативной документации – проекта фармакопейной статьи - которая обеспечивает требования к показателям подлинности и доброкачественности данного вида сырья.

Цель. Разработать методику количественного определения флавоноидов в траве герани волосистотычинковой для включения в проект нормативной документации.

Материалы и методы. В качестве объектов исследования использовали траву герани волосистотычинковой, собранную в различных районах Иркутской области в период цветения. При разработке методики изучили влияние различных технологических факторов на выход флавоноидов из сырья: степень измельчения сырья, тип и концентрация экстрагента, температурный режим и время экстракции. Условия и параметры спектрофотометрического определения определяли на приборе СФ-2000.

Результаты. В результате установлено, что оптимальными явились следующие технологические показатели: мелкость сырья – 2-3 мм, спирт этиловый 70%, температура водяной бани, время экстракции – 30 минут (максимальное извлечение суммы флавоноидов). Количественное определение предложено проводить спектрофотометрическим методом в пересчете на лютеолин-7-гликозид (цинарозид) в присутствии алюминия хлорида 2% (спиртового) при соотношении 1:1. Хромогенный комплекс показал свою устойчивость через 30 минут и оставался таковым 15 минут. На основании разработанной методики проведен количественный анализ 6 партий сырья герани волосистотычинковой. Результаты подвергнуты статистической обработке.

Выводы. Разработана методика количественного определения флавоноидов в траве герани волосистотычинковой для включения в проект фармакопейной статьи.

______________________________

 

 

СОДЕРЖАНИЕ ДУБИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ В БАДАНЕ ТОЛСТОЛИСТНОМ, ПРОИЗРАСТАЮЩЕМ В ИРКУТСКОЙ ОБЛАСТИ

А. С. Мельникова

Научный руководитель: доцент, д. фарм. н. В. М. Мирович, профессор, д. х. н. Е. А. Илларионова
Кафедра фармакогнозии и ботаники/фармакогнозия
Кафедра фармацевтической и токсикологической химии/фармацевтическая химия
Иркутский государственный медицинский университет, г. Иркутск, Россия

 

Актуальность. Бадан толстолистный (Bergenia crassifolia L.) – вечнозеленое травянистое растение с мощным горизонтальным корневищем, листья прикорневые кожистые, цветоносный стебель заканчивается раскидистым метельчато-щитковидным соцветием. Растение имеет эндемичный южно-сибирский ареал – охватывает Алтай, Западные и Восточные Саяны, Прибайкалье, Забайкалье. Народные названия растения – раноцвет, сибирский чай. В народной медицине бадан толстолистный применяется как вяжущее, противовоспалительное, в тибетской медицине при туберкулезе легких. Фармакологические исследования показали для листьев черных (прошлого года) адаптогенное, иммуностимулирующее действие.

Цель. Провести качественное и количественное определение дубильных веществ в корневищах, листьях зеленых и черных.

Материалы и методы. Образцы сырья для анализа были собраны в 2016 году в окрестностях поселка Лиственичное в пади Крестовая. Листья прошлого года (черные) и корневища собирали в мае, листья зеленые в июле. Сырье сушили в тени под навесом. Присутствие дубильных веществ определяли аналитическими реакциями. Количественное определение перманганатометрическим методом по ГФ XIII.

Результаты. Для обнаружения дубильных веществ получали водные извлечения (1:10), использовали реактивы: 1% раствор желатины, 1% раствор хинина хлорида, бромную воду (появились осадки). Реакция дифференциации: с 10% раствором уксусной кислоты и свинца ацетатом средним (осадок гидролизуемых таннидов), фильтрат от 1% раствора железоаммонийных квасцов окрасился в зеленый цвет. Это указывает на дубильные вещества гидролизуемой и конденсированной группы. Для проведения количественного определения дубильных веществ 2 г измельченного сырья экстрагировали 250 мл горячей воды очищенной при кипячении в течении 30 минут. Извлечения фильтровали после его охлаждения до комнатной температуры. Титрование проводили 0,02 моль/л раствором перманганата калия. Индикатор – раствор сульфаниловой кислоты. Корневища бадана содержат 28,1±1,52% дубильных веществ (по ГФ XI должно быть не менее 15%), листья зеленые – 22,05±0,98%, листья черные – 18,6±1,2%.

Выводы. Бадан толстолистный, произрастающий в Иркутской области, содержит дубильные вещества конденсированной и гидролизуемой группы, корневища содержат до 28,1% дубильных веществ, листья характеризуются также высоким содержанием дубильных веществ.

______________________________

 

 

СОДЕРЖАНИЕ ФЛАВОНОИДОВ В НАДЗЕМНЫХ ОРГАНАХ БАГУЛЬНИКА БОЛОТНОГО, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО В ЦЕНТРАЛЬНОЙ СИБИРИ

Е. Ф. Каракаш

Научный руководитель: доцент, д. фарм. н. В. М. Мирович, профессор, д. х. н. Е. А. Илларионова
Кафедра фармакогнозия и ботаника/фармакогнозия
Кафедра фармацевтической и токсикологической химии/фармацевтическая химия
Иркутский государственный медицинский университет, г. Иркутск, Россия

 

Актуальность. Багульник болотный (Ledum palustre L.) относится к семейству вересковых (Ericaceae). Это вечнозеленый кустарник с сильным запахом. Молодые побеги с густым рыжевато-бурым опушением. Листья очередные, линейно-ланцетные, кожистые, с завернутыми вниз краями. Побеги, собранные, в период плодоношения, используют в научной медицине в качестве отхаркивающего. Надземные органы багульника болотного содержат разнообразные биологически активные вещества – флавоноиды, эфирное масло, простые фенольные соединения (арбутин), кумарины, дубильные вещества. По химическому составу багульник болотный образует хеморасы.

Цель. Провести исследование состава флавоноидов надземных органов багульника болотного, произрастающего на территории Центральной Сибири.

Материалы и методы. Побеги багульника болотного заготавливали в период плодоношения (в первой половине сентября) в окрестностях СНТ «Большой Колей» Иркутской области, Иркутского района. Сырье срезали серпом (побеги текущего года), сушили в тени под навесом. Качественный состав флавоноидов исследовали методом одномерной бумажной хроматографии в системах н-бутанол-уксусная кислота ледяная-вода (4:1:2) и 15% уксусная кислота. Количественное определение флавоноидов проводили спектрофотометрическим методом, измерение оптической плотности проводили на приборе «LEKI SS 1207» (Финляндия). В качестве стандартного образца использовали рутин.

Результаты. Растительное сырье измельчали до частиц размером, проходящие сквозь сито диаметром 1 мм. Для изучения состава суммы флавоноидов извлечение получали 70% спиртом этиловым в соотношении сырье-экстрагент 1:10 при нагревании колбы на водяной бане в течении 30 минут. После охлаждения извлечение фильтровали и концентрировали в выпарительной чашке до 2 мл. Сконцентрированное извлечение наносили на листы хроматографической бумаги «Санкт-Петербургская С», параллельно наносили на хроматограмму растворы стандартных образцов (флавоноидов). В побегах багульника болотного установлено содержание гиперозида, авикулярина, рутина, кверцетина. Количественное определение суммы флавоноидов проводили в 6 повторностях, результаты статистически обрабатывали при Р=95. В листьях найдено суммы флавоноидов 2,61±0,11%, в стеблях – 2,20±0,09%, побеги (смесь листьев и стеблей) содержали 2,31±0,06% суммы флавоноидов.

Выводы. В багульнике болотном, произрастающем в Центральной Сибири накапливаются флавоноиды гиперозид, авикулярин, рутин, кверцетин. Побеги содержат 2,31±0,06% суммы флавоноидов.

______________________________