Архитектура электронного правительства: Единая архитектура – это методологический подход при создании системы управления государства, который строится...
Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...
Топ:
Особенности труда и отдыха в условиях низких температур: К работам при низких температурах на открытом воздухе и в не отапливаемых помещениях допускаются лица не моложе 18 лет, прошедшие...
Процедура выполнения команд. Рабочий цикл процессора: Функционирование процессора в основном состоит из повторяющихся рабочих циклов, каждый из которых соответствует...
Устройство и оснащение процедурного кабинета: Решающая роль в обеспечении правильного лечения пациентов отводится процедурной медсестре...
Интересное:
Уполаживание и террасирование склонов: Если глубина оврага более 5 м необходимо устройство берм. Варианты использования оврагов для градостроительных целей...
Мероприятия для защиты от морозного пучения грунтов: Инженерная защита от морозного (криогенного) пучения грунтов необходима для легких малоэтажных зданий и других сооружений...
Отражение на счетах бухгалтерского учета процесса приобретения: Процесс заготовления представляет систему экономических событий, включающих приобретение организацией у поставщиков сырья...
Дисциплины:
2017-11-17 | 232 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Вопросы для подготовки
1. Общее представление о цитокинах. Их основные группы. Цитокиновая сеть и принципы ее функционирования.
2. Провоспалительные цитокины (ИЛ-1, ФНО-α, ИЛ-6 и др.). Структура, клетки-продуценты, мишени, роль в иммунитете.
3. Противовоспалительные цитокины. Структура, клетки-продуценты, мишени, роль в иммунитете.
4. Интерфероны, классификация, структура, клетки-продуценты, мишени, роль в иммунитете.
5. Цитокиновые рецепторы. Сигнальные пути при действии на клетку цитокинов.
6. Апоптоз, его виды. Механизмы запуска апоптоза, роль цитокинов семейства ФНО и белков Вcl-2.
7. Каспазы, особенности строения и роль в апоптозе.
8. Использование цитокинов в клинике. Препараты интреферонов I типа и интерфероногены. Примеры.
9. Заполнить таблицу «Функции цитокинов»:
Распределить следующие цитокины по функциональному назначению и роли в иммунном ответе: IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, CXCL-8, TNF-α, β, IFN-α, IFN-γ, TGF-β.
Активность цитокинов | Представители |
Провоспалительные | |
Противовоспалительные | |
Активация фагоцитов | |
Подавление активности фагоцитов | |
Активация В-лимфоцитов | |
Активация Т-лимфоцитов | |
Подавление иммунного ответа |
Практическая работа
З а д а н и е №3
Определить титр комплемента в сыворотках морской свинки и человека по реакции иммунного гемолиза. Учесть полученные результаты и данные занести в таблицу. Оформить протокол. Сделать заключение.
Сыворотка человека, мл | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,1 | К |
Физ. раствор, мл | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,9 | ? | |
Гемолитическая система, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | ? |
Инкубация 45 мин, 37°С | ||||||
Результат | ||||||
Сыворотка морской свинки, мл | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,1 | ? |
Физ. раствор, мл | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,8 | 0,9 | ? |
Гемолитическая система, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | ? |
Инкубация 45 мин, 37°С | ||||||
Результат |
«+» – гемолиз (лаковая кровь), «–» – отсутствие гемолиза
|
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Сыворотки морской свинки и человека последовательно разводят физиологическим раствором (как указано в таблице). К каждому разведению сыворотки добавляют 3%-ную взвесь эритроцитов барана и инактивированную гемолитическую сыворотку (гемолитическая система). Пробирки ставят в термостат на 45 мин при 37°С. Учет производят по наличию полного гемолиза. Сыворотка человека используется неразведенная, а сыворотка морской свинки предварительно разводится в 10 раз.
Титром комплемента называется его минимальное количество, вызывающее полный гемолиз.
Занятие №5
Антитела. Главный комплекс гистосовместимости
Методы получения антител. Определение концентрации иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии. НLA-типирование
Вопросы для подготовки
1. Общий план строения иммуноглобулина. Константные и вариабельные домены иммуноглобулинов. Изотипы иммуноглобулинов. Понятие об аллотипах и идиотипах.
2. Строение вариабельных доменов иммуноглобулинов. Гипервариабельные участки. Структура антигенсвязывающих участков.
3. Физические силы, участвующие во взаимодействии антигена с антителом. Аффинность взаимодействия антигена и антитела.
4. Иммуноглобулины классов (G, M, А, D и E), особенности строения и биологические функции.
5. Секреторный IgA. Синтез и роль в защите слизистых оболочек.
6. Эффекторные функции антител. Нейтрализация, опсонизация, комплементзависимый цитолиз. Значение изотипов антител.
7. Гибридомы и моноклональные антитела. Области применения.
8. Кинетика синтеза антител. Первичный и вторичный иммунный ответ. Механизм переключения изотипов антител при иммунном ответе.
|
9. Методы количественного определения иммуноглобулинов (радиальная иммунодиффузия по Манчини).
10. Главный комплекс гистосовместимости (МНС). Генетическая структура локуса. Гены МНС I, II и III классов.
11.Строение молекул МНС I и II классов. Антигенсвязывающая щель и ее роль в иммунном ответе.
12. Методы исследования и типирования HLA (ПЦР, ДНК-гибридизация).
13. HLA и заболевания человека, механизмы.
14. Схематично нарисовать в тетради структуру молекулы IgG, подписать все фрагменты, цепи и домены.
15. Заполнить таблицу «Классы иммуноглобулинов»:
Класс Ig | Строение | Свойства |
IgМ | ||
IgG | ||
IgA | ||
IgE | ||
IgD |
16. Заполнить таблицу «Антиген-представляющие молекулы»:
Свойства молекул | МНС I | МНС II | Другие |
Клеточное распределение | |||
Локализация в клетке | |||
Тип эпитопа | |||
Место и условия связывания с эпитопом |
Практическая работа
З а д а н и е №1
Определить уровни иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови обследуемых А. и В. методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Оформить протокол в виде рисунка с обозначениями и графика. Сделать заключение.
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Три порции расплавленного 3%-ного агара смешивают в соотношении 1:1 соответственно с антиглобулиновыми сыворотками против IgM, IgG и IgА. Этими смесями покрывают три стеклянные пластины. В застывшем агаре каждой пластины делают лунки, в которые вносят по 0,2 мкл стандартной сыворотки с известным содержанием иммуноглобулинов трех классов (М, G и А): неразведенной, и в разведениях 1:2, 1:4, 1:6 и 1:8. В другие лунки каждой пластины вносят испытуемые сыворотки, взятые от обследуемых людей, в которых хотят определить содержание IgM, IgG и IgА. После суточного выдерживания во влажной камере при 4°С измеряют диаметры образовавшихся колец преципитации с разведениями стандартной сыворотки на каждой из трех пластин и строят калибровочные кривые, отражающие концентрацию IgM, IgG и IgА в этой сыворотке (dзоны= f (СIg)). Затем измеряют диаметры колец с исследуемой сывороткой (на трех пластинах) и по калибровочным кривым определяют концентрацию IgM, IgG и IgА в сыворотках обследуемых.
Исходный уровень содержания иммуноглобулинов в стандартной сыворотке:
|
IgG – 8,41 мг/мл (133 МЕ/мл)
IgM – 1,12 мг/мл (109 МЕ/мл)
IgA – 1,55 мг/мл (104 МЕ/мл)
З а д а н и е №2
Используя готовые демонстрации познакомиться с методикой проведения HLA-типирования. Оформить протокол в виде рисунка. Ответить на вопросы:
1. Как получают сыворотки для HLA-типирования?
2. Как защитить содержимое лунок от высыхания в процессе постановки реакции?
3. Когда и с какой целью проводят HLA-типирование?
М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я
Суспензию лимфоцитов смешивают с антисывороткой к определенному антигену (HLA-В8, HLA-B27 и т.д.), инкубируют 1 час при 25°С, добавляют комплемент и инкубируют вновь 2 ч при 37°С, а затем добавляют трипановый синий или эозин. В случае присутствия в лимфоцитах антигена, соответствующего антителам, содержащимся в сыворотке, антитела в присутствии комплемента повреждают мембрану лейкоцитов, краска проникает в их цитоплазму и они окрашиваются в синий или же красный цвет (если используется эозин).
|
|
Состав сооружений: решетки и песколовки: Решетки – это первое устройство в схеме очистных сооружений. Они представляют...
Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...
Историки об Елизавете Петровне: Елизавета попала между двумя встречными культурными течениями, воспитывалась среди новых европейских веяний и преданий...
Типы оградительных сооружений в морском порту: По расположению оградительных сооружений в плане различают волноломы, обе оконечности...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!